! 7 ,     江苏省市场监督管理局 发　布 中 国 标 准 出 版 社 出　版纺织品　花粉 、螨虫等过敏原去除活性 的测定　酶联免疫吸附法 Textiles—Determination of reduction activity of allergen derived from pollen and mite and other sources —Enzyme⁃linked immunosorbent assay CCS W 04 DB32/T 5359—2026ICS 59.080.01 2026-04-03 ·¢²¼ 2026-05-03 ʵʩDB32/T 5359—2026 前言…………………………………………………………………………………………………………… Ⅲ 引言…………………………………………………………………………………………………………… Ⅳ 1 范围………………………………………………………………………………………………………… 1 2 规范性引用文件 …………………………………………………………………………………………… 1 3 术语和定义 ………………………………………………………………………………………………… 1 4 原理………………………………………………………………………………………………………… 2 5 试剂和材料 ………………………………………………………………………………………………… 2 6 仪器与设备 ………………………………………………………………………………………………… 3 7 测试准备 …………………………………………………………………………………………………… 3 8 过敏原标准曲线绘制 ……………………………………………………………………………………… 5 9 测试步骤 …………………………………………………………………………………………………… 5 10 过敏原去除率计算与表示 ………………………………………………………………………………… 6 11 回收率……………………………………………………………………………………………………… 6 12 重复性和再现性 …………………………………………………………………………………………… 6 13 测试报告 …………………………………………………………………………………………………… 6 附录 A（资料性） 花粉、螨虫过敏原 ………………………………………………………………………… 7 附录 B（资料性） 试剂盒组成示例 …………………………………………………………………………… 8 附录 C（资料性） 酶联免疫吸附法 ：夹心 ELISA法………………………………………………………… 9 附录 D（资料性） 过敏原标准曲线 ………………………………………………………………………… 10 附录 E（资料性） 回收率…………………………………………………………………………………… 11 附录 F（资料性） 实验室间对比结果 ……………………………………………………………………… 12 附录 G（资料性） 重复性和再现性 ………………………………………………………………………… 15 参考文献 ……………………………………………………………………………………………………… 17目　　次 ⅠDB32/T 5359—2026 前 言 本文件按照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则　第 1部分：标准化文件的结构和起草规则 》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利 。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任 。 本文件由江苏省市场监督管理局提出并组织实施 。 本文件由江苏省化学纤维标准化委员会归口 。 本文件起草单位 ：江苏省纺织产品质量监督检验研究院 、中国药科大学 。 本文件主要起草人 ：卞莹、王鑫、周金香、李裕陆、邢然、龚贤荣、马文权、张祥琨、顾加雨、陈昌斌、 成钢、李丽、刘艳容、樊文楚、叶青、刘冲、王磊、宋春常、仇兆波、崔宏恩、倪鑫茹、薛文文、董雨桐、孙姗姗、 王思渊、戴国英、陆梅、蒋洁蓉。 ⅢDB32/T 5359—2026 引 言 经整理具有抗细菌 、真菌、病毒等功能的纺织品 ，满足了消费者对健康和卫生的需求 ，自面世以来其 应用领域越来越广泛 。 一定条件下 ，可引发人体抗原 -抗体反应的过敏原 （如螨虫、花粉来源的过敏原 ）会通过污染纺织品 给消费者的健康带来一些隐患 。因此，经整理具有去除此类过敏原功能的高性能纺织品越来越受关注和 青睐。 这类高性能纺织品的研发 、生产不仅涉及纺织技术还有生物技术 。当前，由于缺乏现行有效的 、规范 统一的测试方法 ，不同测试结果之间不具有可比性 ，因此，无法为生产商 、经销商、消费者以及市场监管部 门有效评估此类经整理纺织品的去除过敏原功效提供依据 。为满足市场各相关方获取纺织品去除过敏 原性能准确评价的需求 ，本文件提供了一种基于酶联免疫吸附法 （Enzyme⁃linked immunosorbent assay ， ELISA）测定纺织品的螨虫 、花粉等过敏原去除活性的试验方法 。 为响应此迫切需求 ，基于 ELISA，本文件提供了一种科学的 、有效的、可行的，可测定纺织品的螨虫 、 花粉等过敏原去除活性的试验方法 。需要说明的是 ，该测试方法不用于人体过敏原检测 。 ⅣDB32/T 5359—2026 纺织品　花粉 、螨虫等过敏原去除活性 的测定　酶联免疫吸附法 警告——使用本文件的人员应有正规实验室工作的实践经验 。本文件并未指出所有可能的安全问 题。使用者有责任采取适当的安全和健康措施 ，并保证符合国家有关法规规定的条件 。 1 范围 本文件描述了采用酶联免疫吸附法测定纺织品的花粉 、螨虫等过敏原去除活性的方法 。 本文件适用于纤维 、纱线、无纺布、机织物、针织物、编织物等纺织品的花粉 、螨虫等过敏原去除活性 测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款 。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件 ；不注日期的引用文件 ，其最新版本 （包括所有的修改单 ）适用于本 文件。 GB/T 6682　分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 33411　酶联免疫分析试剂盒通则 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件 。 3.1 抗原 antigen 被免疫系统识别为外来物 ，并诱发免疫反应生成抗体的物质 。 3.2 抗体 antibody B淋巴细胞响应外来物 （抗原）而产生并分泌的 ，能够与对应抗原特异性结合的免疫球蛋白 。 注： 免疫球蛋白是抗体的常见同义词 。 3.3 过敏原 allergen 能够诱发机体发生过敏反应的抗原物质 ，如来源于花粉 、螨虫、霉菌、蟑螂或宠物等的特异性蛋白 。 注： 花粉、螨虫过敏原示例见附录 A。 3.4 去除过敏原 allergen reduction 采用物理 、化学、生物等方法减少或去除作用对象上过敏原的过程 。 3.5 过敏原去除活性 reduction activity of allergen 在规定条件下试验后 ，试样过敏原浓度比空白对照组过敏原浓度减少的百分比 。 1DB32/T 5359—2026 注1： 以过敏原去除率表示 。 注2： 有未经整理纺织品样品作为参比对照时 ，试验后，比较试样过敏原浓度比未经整理试样过敏原浓度减少的百 分比。 3.6 过敏原去除剂 allergen reduction agents 能够降低过敏原浓度的无机 、有机化学物质 ，或生物学物质 。 3.7 经整理纺织品 treated textiles 经过敏原去除剂整理的纺织品 。 3.8 未经整理纺织品 untreated textiles 未经过敏原去除剂整理 ，材质和性能与经整理纺织品相同或相似的纺织品 。 注： 测试中用作参比对照 。 3.9 酶联免疫吸附法 Enzyme⁃linked immunosorbent assay ；ELISA 利用抗体 （3.2）或抗原（3.1）与酶共价结合原理的测试方法 。 注： 以酶作为标记指示物 ，以抗原抗体反应为基础 ，通过色原呈色程度进行结果判断的固相吸附测试方法 。 4 原理 在试样和对照上 ，滴加一定浓度的过敏原工作溶液 ，在规定的温度下 ，接触、孵育一定时间 ，用ELI⁃ SA法测定试样和对照上过敏原的浓度 。通过比较接触 、孵育后试样与对照上剩余过敏原浓度 ，计算过 敏原去除率 ，以此表示试样的过敏原去除活性 ，评价试样去除过敏原的效果 。 5 试剂和材料 5.1 通则 所有试剂和材料应适用于生物学试验 。 5.2 水 符合 GB/T 6682规定的三级水 。 5.3 磷酸盐缓冲溶液 （PBS） 氯化钠　　　　　　　　　　　 8.0 g 氯化钾　　　　　　　　　　　 0.2 g 磷酸二氢钾　　　　　　　　　 0.2 g 十二水合磷酸氢二钠　　　　　 2.83 g 水　　　　　　　　　　　　　定容至 1 000 mL 5.4 含吐温 ⁃20的磷酸盐缓冲溶液 （PBST） 吐温 ⁃20 （Tween⁃ 20）　 　　　 0.5 mL PBS （5.2）　　　　　　　　　 定容至 1 000 mL 2DB32/T 5359—2026 5.5 过敏原溶液 于-20 ℃或以下温度保存过敏原溶液 。 于生物安全柜中 ，操作过敏原溶液 。 5.6 过敏原工作溶液 取已知浓度的过敏原溶液 ，用