ICS 11.220 CCS B 41 团体标准 T/CVMA 367—2026 规模化鹿场轮状病毒病防控技术 Prevention and control t echnology for rotavirus disease in large scale deer farms 2026 - 4 - 1发布 2026 - 4 - 1实施 中国兽医协会 发布 中国兽医协会 CVMA 全国团体标准信息平台 中国兽医协会 CVMA全国团体标准信息平台 T/CVMA 367—2026 I 前 言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由中国兽医协会特种经济动物兽医分会提出。 本文件由中国兽医协会归口。 本文件起草单位： 中国农业科学院特产研究所、中农威特生物股份有限公司、东丰县梅花鹿科技服 务中心、黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院。 本文件主要起草人： 刘志杰、王晓旭、王奇林、曹润来、刘学荣、王爽、李铁军、李鸿昌、杜娟、 江波涛、徐海录、孙明月 。 中国兽医协会 CVMA 全国团体标准信息平台 T/CVMA 367—2026 II 引 言 轮状病毒（ Rotavirus ，RV）是一种分节段的双链 RNA病毒，可引发多种幼龄动物严重腹泻。根据 VP6抗原差异，将轮状病毒分为 10组，即轮状病毒 A~J组。其中 A组轮状病毒是引发仔鹿病毒性腹泻 的主要病原。该病 原主要通过粪口途径传播，易造成仔鹿脱水、生长受阻甚至死亡，严重制约鹿产业的 发展。当前规模化鹿场防控措施参差不齐，缺乏针对 轮状病毒病 的防控技术。为规范该病在规模化鹿场 的防控，依据相关标准化工作制定本标准，明确该病防控各环节技术要求，为规模化鹿场科学防控轮状 病毒病提供技术支撑。 中国兽医协会 CVMA 全国团体标准信息平台 T/CVMA 367—2026 1 规模化鹿场轮状病毒病防控技术 1 范围 本文件规定了规模化鹿场轮状病毒病的防控术语、定义、诊断方法和防治措施等内容。 本文件适用于规模化鹿场轮状病毒病的防控。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改 单）适用于本 文件。 GB/T 27622 畜禽粪便贮存设施设计要求 GB/T 36195 畜禽粪便无害化处理技术规范 NY/T 3075 畜禽养殖场消毒技术 NY/T 3445 畜禽养殖场档案规范 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 规模化鹿场 large scale deer farm 具有法人资格， 鹿只存栏量大于或等于 500只的鹿场。 3.2 轮状病毒病 rotavirus disease 由轮状病毒引起的一种以消化不良、腹泻、呕吐、脱水、体重减轻为主要症状的消化道疾病。 3.3 仔鹿 fawn 7月龄以内的鹿。 3.4 育成鹿 yearing deer 8月龄 ~ 27月龄的鹿。 中国兽医协会 CVMA 全国团体标准信息平台 T/CVMA 367—2026 2 3.5 成年鹿 adult deer 28月龄以上的鹿。 4 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 cDNA：互补脱氧核糖核酸（ Complementary Deoxyribo Nucleic Acid ） MA104：恒河猴肾细胞（ Rhesus kidney cell ） DMEM：杜氏改良伊格尔培养基（ Dulbecco ’s Modified Eagle Medium ） PCR：聚合酶链式反应（ Polymerase chain reaction ） qRT-PCR：反转录实时荧光聚合酶链式反应（ Real-time RT-PCR） RNA：核糖核酸（ Ribonucleic Acid ） Vero：非洲绿猴肾细胞（ Verda reno cell ） 5 临床诊断 5.1 流行病学特点 5.1.1 传染源 患病鹿和隐性感染鹿是主要传染源，处于发病期或潜伏期的鹿，其粪便中含有大量轮状病毒，易对 周围环境、饮水及饲料造成污染，且患病鹿康复后，在一定时期内仍持续向外排毒。 5.1.2 传播方式 粪口途径是轮状病毒主要传播途径，易感鹿只接触并摄入被污染的饲料、饮水等污染物后，病毒可 随摄入过程进入动物消化道，进而引发感染。 5.1.3 易感鹿群 仔鹿通常比成年鹿更易感，尤其 1月龄以内的仔鹿 ，且日龄越小 越易感。 5.1.4 潜伏期 通常为 1 d ~ 3 d。 5.2 临床症状 5.2.1 仔鹿 仔鹿感染轮状病毒后，症状通常较为严重，粪便呈水样或糊状，颜色从淡黄色到灰白色不等，有时 带有未消化的凝乳块或黏液。患病仔鹿还会出现精神沉郁，食欲减退甚至废绝，表现明显的虚弱和脱水 症状。脱水严重时，可见皮肤弹性下降、眼窝凹陷、口腔黏膜干燥等，部分仔鹿伴有呕吐症状。 5.2.2 成年鹿 成年鹿感染轮状病毒后症状相对较轻，多表现为隐性感染或轻微腹泻，一般在短时间内自行恢复。 但在应激因素（如长途运输、环境改变、其他疾病感染等）作用下，症状加重。 中国兽医协会 CVMA 全国团体标准信息平台 T/CVMA 367—2026 3 5.3 病理变化 5.3.1 消化道病变 胃内充满凝乳块，小肠扩张，肠壁变薄，呈半透明状；肠腔内充满黄色或灰白色液体，有时可见出 血点或出血斑；肠绒毛萎缩、变短、变钝，严重时甚至消失。 5.3.2 其他病变 除消化道外，肝脏、肾脏等实质器官出现不同程度的变性，肠系膜淋巴结肿大，切面多汁。 5.4 结果判定 患病鹿出现上述临床症状和 /或病理变化，可初步判定为疑似感染轮状病毒，应通过实验室进一步 确诊。 6 实验室诊断 6.1 病原的分离鉴定 采集疑似感染轮状病毒的粪便样品。挑取 5 g ~ 10 g 加入含双抗（青霉素和链霉素）的 DMEM中， 于4 ℃条件下， 5 000 r /min离心 10 min，收集上清，用 0.22 µ m滤膜过滤。将处理好的样品加入终浓度为 15 μg/mL 的胰蛋白酶，于 37 ℃激活 1 h ~ 2 h。接种至适宜细胞系（ MA104或Vero），于 37 ℃孵育 1 h， 弃去接种样品，用含终浓度 5 μg/mL胰蛋白酶的 DMEM培养基进行维持培养，培养过程中观察细胞病变 效应。运用电镜观察、分子生物学方法（如 PCR等）对分离到的病毒进行鉴定。 6.2 胶体金试纸条检测 使用商品化 的胶体金试纸条，按照说明书操作。 在质控线和检测线 均出现红色条带 判定为阳性 ；仅 在质控线出现一条红色条带 判定为阴性 ；若质控线无条带出现， 无论检测线是否出现红色条带，结果均 判定为无效。 6.3 ELISA检测 使用商品化的轮状病毒 ELISA检测试剂盒，按照说明书操作。通过酶标仪测定吸光度值，根据吸 光度值判断样本中是否存在病毒抗体。 6.4 PCR检测 以反转录得到的 cDNA为模板，使用针对轮状病毒 VP6基因的引物 和反应程序（ PCR引物、反应 体系和反应程序见 附录 A）进行 PCR扩增，轮状病毒 VP6基因参考序列见附录 B。扩增产物经琼脂糖 凝胶电泳分析，若出现大小与预期相符的特异性条带，对阳性产物测序验证 进行结果判定 。 6.5 荧光RT-PCR检测 采用商品化的轮状病毒荧光 RT-PCR检测试剂盒进行检测（见附录 C）。荧光 RT-PCR扩增特异性引 物、反应体系和反应程序分别 见附录 C中C.1、C.2和C.3，用于设计引物的 轮状病毒 NSP3基因参考序列 见附录 D。根据荧光曲线特征及 Ct值，当扩增曲线呈 “S”形， Ct 值处于 15 ~ 35，结果判定为阳性。 7 防治措施 中国兽医协会 CVMA 全国团体标准信息平台 T/CVMA 367—2026 4 7.1 规模化鹿场建设 7.1.1 选址要远离居民区、学校、 矿区及其他畜禽养殖场 且位于居民生活区下风向；优先选择地势高 燥、向阳通风、排水顺畅的地块 。 7.1.2 严格遵循“办公区 -生产区 -隔离区 -粪污处理场 ”的规划顺序， 生活区与生产区间距不低于 100 m 且以绿化带或墙体隔离；生产区位于生活区下风向或侧风向，隔离区距主要生产区 100 m以上。 7.1.3 生产区明确划分净道（人员、饲料运输）与污道（粪污、病鹿转运），避免交叉污染；入口处 设置车辆消毒装置和人员消毒间。 7.1.4 粪污处理场位于场区下风向，配备符合 GB/T 27622 要求的贮存与无害化处理设施。 7.2 生物安全管理 7.2.1 对引种对象应进行严格的检疫和消毒，并经 28 d以上隔离观察确认健康后方可混群。 7.2.2 进入养殖场内的人员应全身消毒、更换衣服和鞋。 7.2.