ICS65.020.30 CCSB.41 54 西藏自治区地方标准 DB54/T0599—2026 牦牛沙门氏菌病防治技术规范 2026-03-09发布 2026-04-09实施 西藏自治区市场监督管理局  发布DB54/T0599—2026 I目次 前言..................................................................................II 1范围................................................................................1 2规范性引用文件......................................................................1 3术语和定义..........................................................................1 4诊断................................................................................1 5预防................................................................................3 6治疗................................................................................4 7疫情监测与处理......................................................................5DB54/T0599—2026 II前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由西藏自治区农业农村标准化技术委员会提出并归口。 本文件起草单位：西藏农牧大学、海北州农牧综合服务中心、甘南藏族自治州畜牧工作站。 本文件主要起草人：索朗斯珠、罗润波、贡嘎、拜占春、李登宇、黄家艳、钟亚男、李可欣、孔祥 颖、石红梅。DB54/T0599—2026 1牦牛沙门氏菌病防治技术规范 1范围 本文件规定了牦牛沙门氏菌病的诊断、预防、治疗和疫情监测与处理等方面的技术要求。 本文件适用于牦牛沙门氏菌病的防治。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB4789.4食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验 GB5749生活饮用水卫生标准 GB13078饲料卫生标准 GB/T36195畜禽粪便无害化处理技术规范 NY/T388畜禽场环境质量标准 NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范 NY/T682畜禽场场区设计技术规范 NY/T1167畜禽场环境质量及卫生控制规范 NY/T3075畜禽养殖场消毒技术 NY/T3457牦牛舍饲半舍饲生产技术规范 NY/T3467牛羊饲养场兽医卫生规范 NY/T4146动物源沙门氏菌分离与鉴定技术规程 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 牛沙门氏菌病 俗称牛副伤寒，是由沙门氏菌引起的一种临床上以败血症和肠炎为主要特征的传染病，主要侵害幼 龄牛，也可引起妊娠牛流产。 4诊断 临床综合诊断 4.1.1易感动物 各种年龄段的牦牛均可感染，幼龄牛较成年牛易感。 4.1.2传染源DB54/T0599—2026 2主要是患病牦牛和带菌牦牛。 4.1.3传播途径 主要通过消化道传播，粪-口传播是主要途径。 4.1.4流行特点 该病一年四季均可发生，夏秋季多发。 临床症状 4.2.1急性型 犊牛出生后48h内表现拒食、卧地、迅速衰竭；成年牛出现高热、昏迷、食欲废绝、呼吸困难、体 力衰竭。严重者死亡。 4.2.2慢性型 多由急性型转变而来，症状逐渐减轻或停止。犊牛后期可发生腕关节、跗关节肿大，跛行。有的伴 有支气管炎和肺炎。多数妊娠母牛出现流产。 病理变化 4.3.1急性型 胃肠黏膜有出血性炎症变化，全身浆膜、黏膜及心外膜有多数出血点；淋巴结、脾脏、肝脏、肾脏 肿大，特别是脾脏可肿大1倍～3倍，肝脏、脾脏散布有灰色小坏死灶。 4.3.2慢性型 有肺炎症灶，且伴有坏死，表面覆盖有纤维素薄膜；肝有坏死结节；小肠黏膜有出血点；腕关节和 跗关节等关节囊肿胀，腔内有较多的浆液性纤维素渗出物。 实验室诊断 4.4.1样品采集及运送 采集肠道内容物或粪便，置于无菌采样袋中。样品采集和运送符合NY/T541的规定。 4.4.2培养基 蛋白胨水缓冲液、亚硒酸盐胱氨酸增菌液、四硫磺酸钠煌绿增菌液、氯化镁孔雀绿增菌液、沙门氏 菌显色培养基、木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂等均可选用商品化培养基，参照说明书配制；也可参照NY/T 4146及GB4789.4配制。 4.4.3分离培养 沙门氏菌的分离培养步骤如下。 a)取0.5g肠道内容物或粪便置于5mL蛋白胨水缓冲液中，37℃培养8h～18h，进行预增菌。 b)取a）中的预增菌液1mL，转接于10mL亚硒酸盐胱氨酸增菌液，37℃增菌培养18h～24h。 同时，另取a）中的预增菌液1mL，转接于10mL四硫磺酸钠煌绿增菌液，于42℃增菌培养 22h～24h；或转接于10mL氯化镁孔雀绿增菌液，于35℃增菌培养22h～24h。DB54/T0599—2026 3c)取b）中的增菌液，接种于沙门氏菌显色培养基或木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂，于37℃培养18 h～24h。 d)参照NY/T4146进行菌落形态鉴别、纯化。 4.4.4形态学检查 取纯化单菌落，革兰氏染色，镜检。沙门氏菌呈红色、短直杆菌，大多数周生鞭毛，无芽孢，无荚 膜。 4.4.5生化鉴定 具体操作步骤及结果判定参照GB4789.4或商品化沙门氏菌生化鉴定试剂盒等说明书。 4.4.6血清学鉴定 具体操作步骤及结果判定参照GB4789.4或商品化沙门氏菌属诊断血清试剂盒说明书。 4.4.7PCR鉴定 PCR鉴定步骤如下。 a)引物：参照NY/T4146合成引物，上游引物（invAF）：5′-GTGAAATTATCGCCACGTTCGGGCAA-3′； 下游引物（invAR）：5′-TCATCGCACCGTCAAAGGAACC-3′，扩增片段长度为285bp，退火温度 64℃。 b)模板：取新鲜菌落，加灭菌水0.5mL，煮沸10min，冷却，12000r/min离心2min，上清 液即为DNA模板。也可选用商品化试剂盒，参照说明书进行DNA提取。 c)PCR检测：沙门氏菌标准菌株作为阳性对照，双蒸水为阴性对照。PCR扩增体系及程序参照商 品化DNA聚合酶说明书，PCR产物经1.2%琼脂糖凝胶电泳，凝胶成像分析。 d)结果判定：阴阳性对照成立。待检样本的扩增条带大小与285bp目标片段一致，判定为沙门 氏菌阳性，必要时测序鉴定。否则为阴性。 结果判定 临床症状、病理变化符合沙门氏菌病特征，且实验室诊断确证为沙门氏菌，可确诊为牦牛沙门氏菌 病。 5预防 饲养管理 饲养管理遵循以下要求。 a)场区设计、生产管理符合NY/T682、NY/T3457、NY/T3467的规定。 b)牦牛常用的饲草饲料主要有青草、青干草、小麦、玉米、青稞，选择品质优良、无污染、无 霉变的饲草饲料，饲料和饲料添加剂使用符合GB13078的规定。 c)自由饮水，饮水水质符合GB5749的规定，环境质量及卫生控制符合NY/T388、NY/T1167 的规定。 d)放牧时，根据不同年龄、性别、生产特征、生理阶段、采食习性进行合理组群，实行轮牧和 休牧制度。冬春季做好补饲及保温工作，夏秋季做好抓膘配种工作。 免疫接种DB54/T0599—2026 45.2.1疫苗选择 符合《兽药管理条例》和《中华人民共和国动物防疫法》的牛副伤寒疫苗。. 5.2.2疫苗接种 对疫区和受威胁区的牛群接种疫苗，按照疫苗使用说明书进行免疫。 5.2.3注意事项 免疫接种遵循以下注意事项。 a)选择针对本地区流行菌株疫苗进行免疫接种。 b)疫苗保存、接种剂量严格按照使用说明书进行。 c)接种前核查牦牛健康状况，接种时避免交叉感染。 d)进行免疫抗体效价监测，开展补免工作。 e)根据本地区流行病学监测结果，优化免疫程序。 消毒 5.3.1消毒制度 日常消毒和紧急消毒相结合，制定并严格执行消毒制度。 5.3.2消毒管理 消毒管理遵循以下要求。 a)消毒剂选择符合《中华人民共和国药典》和《中华人民共和国兽药典》的规定，严格按照说 明书使用。 b)定期对场区道路、牛舍内部环境及工具进行消毒，在疫病多发季节增加消毒频次。 c)场区入口设置可覆盖全车的消毒设施，严格执行消毒程序。生产区设置消毒通道，人员消毒 后方可进出。 d)消毒记录包括消毒日期，消毒场所，消毒剂名称、生产厂家、生产批号，消毒浓度，消毒方 法，消毒人员签字。 e)不同生产环节消毒符合NY/T3075的规定。 6治疗 治疗原则 按照早发现、早隔离、早治疗的原则，采用抗菌、退热、强心、补液等措施治疗。 抗菌疗法 兽药的使用符合《中华人民共和国兽药典》的规定。推荐使用头孢类（头孢噻呋）、喹诺酮类（环 丙沙星）及磺胺类（磺胺甲