(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210998067.3 (22)申请日 2022.08.19 (71)申请人 辽宁中医药大学 地址 110847 辽宁省沈阳市皇姑区崇山 东 路79号 (72)发明人 孟宪生　丁昕瑶　赵琳　包永睿　 王帅　李天娇　孟莹　郑莹　 (74)专利代理 机构 沈阳亚泰专利商标代理有限 公司 21107 专利代理师 史力伏 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/14(2006.01) G01N 30/30(2006.01)G01N 30/32(2006.01) G01N 30/34(2006.01) G01N 30/72(2006.01) G01N 30/74(2006.01) G01N 30/86(2006.01) (54)发明名称 丹参药材的质量双标可视化质量控制技 术 (57)摘要 本发明公开了一种丹参药材的质 ‑量双标可 视化质量控制技术， 属于中药质量控制技术领 域。 本发明采用HPLC技术 建立丹参对照药材的特 征图谱， 将其与供试药材图谱进行比对来辨别药 材的真伪， 即 “质”； 采用内标物质对特征峰化学 成分进行相对定量来区分药材的优劣， 即 “量”； 利用Visual Basic编程语言设计使质 ‑量双标控 制方法可视化。 建立的丹参药材 “质‑量”分析方 法符合方法学考察要求， 各供试药材与对照药材 的相似度均大于0.96； 规定了丹参药材特征峰化 学成分相对含量下限。 该方法利用度高、 重复性 好， 能够完善中药材质量控制体系， 减轻企业质 检部门的经济负担， 以期推动中医药事业可持续 发展。 权利要求书2页 说明书5页 附图3页 CN 115326978 A 2022.11.11 CN 115326978 A 1.一种丹参药 材质量控制标准的建立方法， 其特 征在于， 所述方法包括以下步骤： 步骤1 基于对照药 材的丹参药 材定性研究； 步骤2 基于内标物质的特 征峰化学成分相对定量研究； 步骤3 方法学考 察。 2.根据权利要求1所述的一种 丹参药材质量控制标准的建立方法， 其特征在于， 所述步 骤1的具体步骤 包括： （1） 溶液的制备： 取丹参对照药材及供试药材粉末， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密加 入50倍量的80%甲醇， 称定重量， 加热回流1  h， 放冷， 补足失重， 摇匀， 滤过； 续滤液挥干， 80% 甲醇定容， 摇匀， 过0.2 2 μm滤膜， 即得； （2） 色谱条件与系统适用性试验： 采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的Agilent  EC‑ C18色谱柱， 色谱柱规格为3.0 ×100 mm， 2.7‑Micron； 以0.1%甲酸水为流动相A， 以乙腈为流 动相B， 进行梯度洗脱； 流速1.0  mL/min； 柱温30℃； DAD检测器在波长280  nm下进行检测； 进 样量5 μL； （3） 特征图谱的建立： 每份样品平行2次， 按色谱条件依次进样检测， 将280  nm波长下的 图谱数据由分析检测仪器中导出获得10批供试药材的HPLC叠加图谱； 10批供试药材使用中 位数进行自动匹配， 加以多点校正， 生成共有模式R， 与对照药 材特征图谱进行比对； （4） 相似度评价： 以特征峰的相似度明确丹参药材真伪； 供试药材与对照药材的相似度 均大于0.96； （5） 特征峰化学成分解析： 采用Q ‑TOF‑MS技术， 通过分析化合物的保留时间、 一级离子 质荷比以及二级离 子碎片信息， 并与相关文献报道信息进行匹配， 共鉴定出6个化学成分； （6） 中药材 （饮片） 可视化的质 ‑量双标质量控制方法程序： 利用Visual  Basic编程语言 设计包含1个 OEL控件和4个Command控件的适用于丹参药材 （饮片） 可视化的质 ‑量双标质量 控制程序。 3.根据权利 要求2所述的方法， 其特征在于， 所述 （5） 中鉴定出6个化学成分分别为： （5） 号峰为迷迭香酸、 （6） 号峰为紫草酸、 （7） 号峰为丹酚酸B、 （16） 号峰为隐丹参酮、 （17） 号峰为 丹参酮I和 （18） 号峰为丹参酮I IA。 4.根据权利要1所述的一种丹参药材质量控制标准的建立方法， 其特征在于， 所述步骤 2的具体步骤 包括： 以步骤1中确定的 （7） 号峰丹酚酸B作为 内标物质， 通过内标物质化学成分准确定量， 计 算供试药材特征峰化学成分的相对含量； 取 “中位数‑标准差”作为特征峰化学成分相对于 内标物质化学成分的相对 含量下限。 5.根据权利要求1一种丹参药材质量控制方法， 其特征在于， 所述步骤2 的特征峰均为 丹参发挥其功效及药理作用的特 征活性化学成分。 6.根据权利要求1所述的一种 丹参药材质量控制标准的建立方法， 其特征在于， 所述步 骤3的具体步骤 包括： （1） 精密度实验： 精密吸取同一供试品溶液， 按色谱条件测定， 连续进样6次， 测定各色 谱峰相对保留时间、 相对 峰面积， 计算相对标准偏差； 各色谱峰相对保留时间、 相对 峰面积 RSD值均小于1.0%， 表明仪器精密度良好； （2） 稳定性试验： 精密吸取同一供试品溶液， 按色谱条件， 分别在0、 2、 4、 8、 12、 24  h进样权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115326978 A 26次检测， 测定各色谱峰相对保留时间、 相对峰面积， 计算相对标准偏差； 各色谱峰相对保留 时间、 相对峰面积RS D值均小于2.3  %， 表明供 试品溶液在24 h内稳定； （3） 重复性实验： 按供试品溶液制备方法制备6份供试样品， 按色谱条件， 分别进样检 测， 测定各色谱峰相对保留时间、 相对峰面积， 计算相对标准偏 差； 各色谱峰相对保留时间、 相对峰面积RS D值均小于1.7  %， 表明方法重复性良好； （4） 线性关系考察： 配制 “丹酚酸B”的6个质量浓度溶液， 按色谱条件， 分别进样检测， 以 质量 （X） 为横坐标， 峰面积 （ Y） 为纵坐标， 绘制标准曲线并进 行线性回归， 得到线性回归方程 （Y=1220.5X‑33.17） 、 相关系数 （ r=0.999 8） ； 结果表明 “丹酚酸B”在0.500~3.400mg·mL‑1范 围内与峰面积呈良好的线性关系。 7.根据权利要求1所述的一种 丹参药材质量控制标准的建立方法， 其特征在于， 所述方 法通过丹参药材特征图谱中的特征峰作为丹参药材的定性标准， 能够明确鉴定药材的真 伪。 8.根据权利要求1所述的一种 丹参药材质量控制标准的建立方法， 其特征在于， 所述方 法通过建立的特征峰相对含量的计算方法确定的各特征峰相对含量的下限， 能够区分丹参 的优劣。 9.根据权利要求1所述的一种 丹参药材质量控制标准的建立方法， 其特征在于， 所述方 法通过Visual  Basic编程语言设计的可视化的质 ‑量双标质量控制程序适用于丹参药材 （饮片） 。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115326978 A 3