(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210980781.X (22)申请日 2022.08.16 (71)申请人 江阴天江药业有限公司 地址 214429 江苏省无锡市江阴高新区新 胜路1号 (72)发明人 周海琴　钱润　胡剑虹　顾超　 李松　陈盛君　海丰　张开雪　 查同乐　张云天　 (74)专利代理 机构 南京苏高专利商标事务所 (普通合伙) 32204 专利代理师 柏尚春 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/54(2006.01)G01N 30/72(2006.01) G01N 30/88(2006.01) (54)发明名称 一种麦冬药 材和山麦冬药 材的鉴别方法 (57)摘要 本发明公开了一种麦冬药材和山麦冬药材 的鉴别方法， 包括 （1） 供试品溶液的制备； （2） 参 照物溶液的制备； （3） 色谱方法的建立； （4） 麦冬 药材对照指纹图谱制定； （5） 不同产地麦冬和/或 不同基原山麦冬药材鉴别。 本发 明构建了不同产 地麦冬和/或不同基原山麦冬药材UPLC特征图 谱， 充分展示了不同产地、 不同基原山麦冬药材 的化学成分特征， 可 以用来鉴别和区分浙麦冬、 川麦冬及近似品湖北麦冬、 短葶山麦冬的中药 材； 构建的特征图谱全面的反应样品的特征峰信 息， 且方法稳定， 精密度高， 重现性 好。 权利要求书1页 说明书6页 附图5页 CN 115326964 A 2022.11.11 CN 115326964 A 1.一种麦冬药 材和山麦冬药 材的鉴别方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： (1)供试品溶液的制备： 取供试品加入有机溶剂提取， 称定重量， 放冷， 滤过， 滤液蒸干， 用溶剂进行提取并洗涤， 蒸干加甲醇定容， 摇匀， 滤 过， 取续滤 液， 即得供试品溶液； (2)参照物溶液的制备： 取麦冬皂苷D对照品、 麦冬龙脑苷对照品、 麦冬皂苷C对照品、 麦 冬皂苷元 ‑3‑O‑α‑L‑吡喃鼠李糖基 ‑(1→2)‑β‑D‑吡喃葡萄糖苷对照品、 重楼皂苷 Ⅵ对照品， 分别加溶剂溶解， 既得参照物溶 液； (3)色谱方法的建立： 称取不同产地麦冬和/或不同基原山麦冬药材粉末， 制备得到相 应药材的供试品溶液， 分别吸取参照物溶液和供试品溶液， 注入超高效液相色谱仪， 测定， 得到不同产地麦冬和/或不同基原山麦冬药 材的UPLC特 征图谱； (4)麦冬药材对照指纹图谱制定： 采用超高效液相色谱法， 分别建立川麦冬、 浙麦冬、 湖 北麦冬和短葶山麦冬的特征图谱， 形成川麦冬、 浙麦冬、 湖北麦冬和短葶山麦冬对照特征图 谱， 并对相应特 征峰进行质谱指认及对照品确认； (5)不同产地麦冬和/或不同基原山麦冬药 材鉴别 采用川麦冬、 浙麦冬、 湖北麦冬和短葶山麦冬的对照特 征图谱进行对比研究结果表明： ①不同产地麦冬药材鉴别： 以川麦冬为参照， 通过峰10麦冬皂苷D可将川麦冬和浙麦冬 药材进行区分；②麦冬与山麦冬药材鉴别： 以川麦冬为参照， 峰5麦冬皂苷元 ‑3‑O‑α‑L‑吡喃 鼠李糖基 ‑(1→2)‑β‑D‑吡喃葡萄糖苷可将 麦冬和山麦冬进行区分； ③以川麦冬为参照， 峰1 麦冬龙脑 苷可将湖北麦冬和短葶山麦冬区分。 2.根据权利要求1所述的麦冬药材和山麦冬药材的鉴别方法， 其特征在于， 步骤(1)中 所述提取的有机溶剂为甲醇或体积浓度为3 0‑70％甲醇水 溶液， 提取时间为3 0‑90分钟。 3.根据权利要求1所述的麦冬药材和山麦冬药材的鉴别方法， 其特征在于， 步骤(1)中 所述提取方式为超声处 理、 振摇提取或加热回流。 4.根据权利要求1所述的麦冬药材和山麦冬药材的鉴别方法， 其特征在于， 步骤(1)中 所述滤液蒸干后的提取溶剂为水饱和正丁醇， 提取次数为1 ‑2次； 所述洗涤溶剂为氨试液， 清洗次数为1 ‑2次。 5.根据权利要求3所述的麦冬药材和山麦冬药材的鉴别方法， 其特征在于， 所述超声处 理时间为3 0‑90min。 6.根据权利要求1所述的麦冬药材和山麦冬药材的鉴别方法， 其特征在于， 步骤(3)中 所述超高效液相色谱仪分析 的色谱条件为： 以乙腈为流动相A， 以甲酸溶液为流动相B进行 梯度洗脱， 流速为0.25～0.35ml/min， 柱温为35～45℃， 用电雾式检测器检测， 进样量5～15 μl/min。 7.一种权利要求1 ‑6任一所述的鉴别方法在区分不同产地的麦冬药材及不同基原的山 麦冬药材中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115326964 A 2一种麦冬药材和山麦冬药材的鉴别方 法 技术领域 [0001]本发明涉及 一种药材的鉴别方法， 尤其涉及一种麦冬药材和山麦冬药材的鉴别方 法。 背景技术 [0002]麦冬， 别名麦门冬， 为百合科植物麦冬Ophiopogon  japonicus(L.f)Ker ‑Gawl.的 干燥块根， 具有养阴生津， 润肺清心的作用， 多用于肺燥干咳， 阴虚痨嗽， 喉痹咽痛， 津伤口 渴， 内热消渴， 心烦失眠， 肠燥便秘。 麦冬主要栽培于浙江和四川两省， 产于浙江的麦冬称为 浙麦冬， 为浙江道地药材， 明代及以前为其主流品种。 川麦冬种植和 应用始于清代， 并形成 川药道地药材， 亦是目前市场主流商品药材， 二者采收时期因地区各有不同， 浙江于 栽后第 三年的小满到夏至采挖， 四川在栽后第二年的清明至谷雨季节采收。 浙麦冬和川麦冬由于 生长环境、 栽培方式和采收年限不同， 药材中主要化学成分的结构类型和含量存在差异， 其 药理作用的特点和作用强度也存在明显不同， 二者药材在市场上价格相差较大。 此外， 同为 百合科沿阶草属植物湖北麦冬Liriop e spicata(Thunb.)Lour.var.prolifera  Y.T.Ma和 短葶山麦冬Liriope  muscari(Decne.)Baily作为山麦冬药材主 流商品， 因其药材性状与麦 冬有较高的相似性， 且山麦冬价格较麦冬低， 易被混入麦冬销售。 因此， 建立一种全面、 快 速、 客观评价其内在质量的方法， 从而对不同产地麦冬及易混 品山麦冬药材进 行鉴别， 对于 提升中药品质具有重要的实际意 义。 [0003]目前对于区分不同产地麦冬和/或不同基原山麦冬药材的研究， 已有文献报道， 使 用薄层方法鉴别区分中药制剂成品中的浙麦冬和川麦冬(CN  110426486  A)； 一种浙麦冬的 鉴别方法(CN  109633012  A)， 建立了浙麦冬对照指 纹图谱， 13个共有峰， 并对其中4个成分 峰面积比值进 行约束， 与7号峰 的峰面积比值均大于3％即为浙麦冬， 峰缺 失或比值小于3％ 的为川麦冬或麦冬混淆品； 一种鉴别 不同产地麦冬的方法(CN105388228A)， 利用龙脑次苷 鉴别麦冬产地； 麦冬指纹图谱研究(陈有根等， 北京市药品检验所)， 建立了麦冬指纹 图谱， 相似度计算结果表明： 来源于四川和浙江的麦冬， 同产区样品间相似度多 数大于0.95， 不同 产区间样品的相似度小于0.80； 麦冬与山麦冬的HPLC指纹图谱比较研究(董政起等， 延边大 学)， 通过指纹图谱的整体图貌和个别成分指标辨别川麦冬、 浙麦冬与山麦冬。 [0004]目前， 法定标准对麦冬和山麦 冬药材分别从基原、 性状、 显微、 薄层、 检查项进行了 标准限定， 麦冬药材以麦冬总皂苷成分进 行定性、 定量分析， 但性状鉴定需鉴定者具备一定 的理论基础和实践经验， 推广难度大， 且制剂后无法应用性状进 行鉴定， 以上研究对于区分 不同产地麦冬和/或不同基原山麦冬药材均存在一些缺陷， (1)采用薄层色谱法区分， 存在 灵敏度不 足、 专属性不 强， 尤其对近缘中药化学成分类似时， 其分辨类不高； (2)采用指纹图 谱的相似度可鉴别浙麦冬， 但对川麦冬与山麦冬均未规定相似度， 仍无法区分； (3)上述方 法建立时采集样 本较少， 尤其山麦冬批次较少， 甚至 短葶山麦冬未采集到样品， 所建立的方 法实际应用存在一定的局限性。 因此本发明提供了一种不同产地麦冬和/或不同基原山麦 冬药材UPLC特征图谱的构建方法及其应用， 该方法除区分不同产地麦冬外， 更重要的可以说　明　书 1/6 页 3 CN 115326964 A 3