(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210877372.7 (22)申请日 2022.07.25 (71)申请人 四川新绿 色药业科技发展 有限公司 地址 611930 四川省成 都市彭州市致和镇 东河东路279号 (72)发明人 周厚成　周靖惟　张晨　胡昌江　 黄宇　梅国荣　张林　胡庆　 邱亚磊　 (74)专利代理 机构 北京集佳知识产权代理有限 公司 11227 专利代理师 杨威 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/86(2006.01) (54)发明名称 一种鸡内金及其炮制品饮片、 标准汤剂、 配 方颗粒中染料木苷的含量测定方法 (57)摘要 本发明提供了一种 鸡内金及其炮制品饮片、 标准汤剂、 配方颗粒中染料木苷的含量测定方 法， 包括以下步骤： 采用染料木苷作为鸡内金待 测样品的指标性成分， 进行超高效液相色谱检 测， 得到染料木苷含量。 与现有 技术相比， 本发明 采用高效液相色谱法(UPLC)首次建立了一种鸡 内金及其炮制品中染料木苷的含量测定方法， 该 方法将染料木苷作为指标性 成分， 通过测定其含 量来衡量鸡内金及其炮制品制剂工艺的稳定性， 以保证制剂的质量， 达到临床用药安全、 有效； 本 发明方法稳定， 操作 简单， 精密度高， 对研究鸡内 金及其炮制品具有重要的意 义。 权利要求书2页 说明书76页 附图26页 CN 115266975 A 2022.11.01 CN 115266975 A 1.一种鸡内金及其炮制品饮片、 标准汤剂、 配方颗粒中染料木苷的含量测定方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： 采用染料木苷作为鸡内金待测样品的指标性成分， 进行超高效液相色谱检测， 得到染 料木苷含量。 2.根据权利要求1所述的含量测定方法， 其特征在于， 所述鸡内金待测样品包括鸡内金 药材、 鸡内金饮片、 鸡内金标汤、 鸡内金配方颗粒、 炒鸡内金饮片、 炒鸡内金标汤、 炒鸡内金 配方颗粒、 醋鸡内金饮片、 醋鸡内金 标汤和醋鸡内金配方颗粒中的一种或多种。 3.根据权利要求2所述的含量测定方法， 其特征在于， 所述鸡内金待测样品制备供试品 溶液的方法具体为： 鸡内金药材和鸡内金饮片： 取样品粉末1g～3g， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密加入 甲醇20ml～30ml， 称定重量， 回流提取2.5h～3.5h， 放冷， 用甲醇补 足减失的重量， 摇匀， 滤 过， 取续滤 液， 即得； 炒鸡内金饮片和醋鸡内金饮片： 取样品粉末1g～3g， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密 加入甲醇20ml～30ml， 称定重量， 回流提取1.5h～2.5h， 放冷， 用甲醇补足减失的重量， 摇 匀， 滤过， 取续滤 液， 即得； 鸡内金标汤、 炒鸡内金标汤、 醋鸡内金标汤及鸡内金配方颗粒、 炒鸡内金配方颗粒、 醋 鸡内金配方颗粒： 取样品粉末0.005g～0.15g， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密加入甲醇 5ml～15ml， 称定重量， 功率550W～650W、 频率35kHz～45kHz超声处理25min～35min， 放冷， 用甲醇补足减失的重量， 摇匀， 滤 过， 取续滤 液， 即得。 4.根据权利要求1所述的含量测定方法， 其特征在于， 所述进行超高效液相色谱检测的 过程中， 制备对照品溶 液的方法具体为： 精密称取染料木苷对照品， 加甲醇制成每1ml含6 μg～10 μg的溶 液。 5.根据权利要求1所述的含量测定方法， 其特征在于， 所述超高效液相色谱检测的色谱 条件包括： 以十八烷基键合硅胶为填充剂， 以甲醇为流动相A， 以0.005％～0.02％醋酸溶液为流 动相B， 进行梯度洗脱。 6.根据权利要求5所述的含量测定方法， 其特征在于， 所述填充剂的柱长为90mm～ 110mm， 内径为2.0m m～2.2mm， 粒度为1.5 μm～ 2 μm。 7.根据权利要求5所述的含量测定方法， 其特 征在于， 所述梯度洗脱的过程具体为： 0～3min， 流动相A： 10wt％ →30wt％， 流动相B： 90wt％ →70wt％； 3min～10min， 流动相A： 3 0wt％→32wt％， 流动相B： 70wt％ →68wt％； 10min～12min， 流动相A： 32wt％， 流动相B： 68wt％； 12min～12.01mi n， 流动相A： 32wt％ →95wt％， 流动相B： 68wt％ →5wt％； 12.01min～15min， 流动相A： 95wt％， 流动相B： 5wt％。 8.根据权利要求1所述的含量测定方法， 其特征在于， 所述超高效液相色谱检测的检测 波长为250n m～270nm， 流速为0.3ml/min～ 0.5ml/min， 柱温为39℃～41℃， 理论板 数按染料 木苷峰计算应不低于 5000。 9.根据权利要求1所述的含量测定方法， 其特征在于， 所述超高效液相色谱检测的过程 具体为：权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115266975 A 2精密吸取对照品溶 液、 供试品溶液各1.5 μL～ 2.5 μL， 注入液相色谱仪， 测定， 即得。 10.一种鸡内金及其炮制品饮片、 标准汤剂、 配方颗粒的质量控制方法， 其特征在于， 采 用权利要求1～ 9任一项所述的含量测定方法， 以染料木苷为指标性成分， 实现质量控制。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115266975 A 3