(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210892284.4 (22)申请日 2022.07.27 (71)申请人 江苏中邦制药有限公司 地址 211300 江苏省南京市高淳经济开发 区双高路3 6号 申请人 南京红太阳医药研究院有限公司 (72)发明人 孙春霞　张根元　甘建英　赵树花　 黄双　李维思　 (74)专利代理 机构 南京天华专利代理有限责任 公司 32218 专利代理师 徐冬涛　邢贤冬 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/74(2006.01) (54)发明名称 一种高效液相色谱法测定左卡尼汀有关物 质的方法 (57)摘要 本发明公开了一种高效液相色谱法测定左 卡尼汀有关物质的方法， 包括： 配制系统适用性 溶液： 取3 ‑羧基‑N,N,N‑三甲丙烯‑2‑烯‑1‑氯化 铵、 (R)‑4‑氨基‑2‑羟基‑N,N,N‑三甲基‑4‑氧代 丁基‑1‑氯化铵和(3 ‑氨基甲酰烯丙基)三甲基铵 和左卡尼汀对照品， 配成对照品溶液； 配制供试 品溶液； 分别对系统适用性溶液、 供试品溶液进 行HPLC检测； 采用外标法测定左卡尼汀中3 ‑羧 基‑N,N,N‑三甲丙烯 ‑2‑烯‑1‑氯化铵、 (R) ‑4‑氨 基‑2‑羟基‑N,N,N‑三甲基‑4‑氧代丁基 ‑1‑氯化 铵和(3‑氨基甲酰烯丙基)三甲基铵的含量。 本发 明分离效率高、 分析速度快、 检测灵敏度高， 能够 有效控制左卡尼汀质量。 权利要求书2页 说明书8页 附图11页 CN 115290779 A 2022.11.04 CN 115290779 A 1.一种高效液相色谱法测定左卡尼汀有关物质的方法， 其特 征在于： 包括： 配制系统适用性溶液： 取3 ‑羧基‑N,N,N‑三甲丙烯 ‑2‑烯‑1‑氯化铵、 (R) ‑4‑氨基‑2‑羟 基‑N,N,N‑三甲基‑4‑氧代丁基 ‑1‑氯化铵和(3 ‑氨基甲酰烯丙基)三甲基铵和左卡尼汀对照 品， 采用流动相和水的混合溶剂配制 成每1mL混合溶剂含15～30μg3 ‑羧基‑N,N,N‑三甲丙 烯‑2‑烯‑1‑氯化铵、 3～7 μg(R) ‑4‑氨基‑2‑羟基‑N,N,N‑三甲基‑4‑氧代丁基 ‑1‑氯化铵和3 ～7 μg(3‑氨基甲酰烯丙基)三甲基铵和3～15mg左卡尼汀的对照品溶 液； 配制供试品溶液： 取左卡尼汀， 采用流动相和水的混合溶剂配制成每1mL混合溶剂含 4mg～6mg左卡尼汀的供 试品溶液； 分别对系统适用性溶液、 供试品溶液进行HPLC检测， HPLC检测的色谱条件为： 采用有机 混合硅胶颗粒上化学键合了二羟基丙基的亲水性作用色谱柱， 流动相为乙腈和50～ 60mmol/L磷酸二氢钾溶液体积比为65:35～75:25的混合溶液， 柱温为25～35℃， 流速为0.8 ～1.2mL/mi n， 检测波长为20 0～210nm； 进样量5 μL～10 0 μL； 采用外标法测定左卡尼汀中杂质3 ‑羧基‑N,N,N‑三甲丙烯‑2‑烯‑1‑氯化铵、 (R) ‑4‑氨 基‑2‑羟基‑N,N,N‑三甲基‑4‑氧代丁基 ‑1‑氯化铵和(3 ‑氨基甲酰烯丙基)三甲基铵的含量； 其中， 所述 的混合溶剂由流动相和 水按照体积比为40:60～60:40配制而成； 50mmol/L 磷酸二氢钾溶 液的pH值 为4.3～5.5 。 2.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定左卡尼汀有关物质的方法， 其特 征在于： 配制系统适用性溶液： 取3 ‑羧基‑N,N,N‑三甲丙烯 ‑2‑烯‑1‑氯化铵、 (R) ‑4‑氨基‑2‑羟 基‑N,N,N‑三甲基‑4‑氧代丁基 ‑1‑氯化铵和(3 ‑氨基甲酰烯丙基)三甲基铵和左卡尼汀对照 品， 采用流动相和水的混合溶剂配制成每1mL混合溶剂含25 μg3 ‑羧基‑N,N,N‑三甲丙烯 ‑2‑ 烯‑1‑氯化铵、 5 μg(R) ‑4‑氨基‑2‑羟基‑N,N,N‑三甲基‑4‑氧代丁基 ‑1‑氯化铵和5 μg(3 ‑氨基 甲酰烯丙基)三甲基铵和5mg左卡尼汀的对照品溶 液； 配制供试品溶液： 取左卡尼汀， 采用流动相和水的混合溶剂配制成每1mL混合溶剂含 5mg左卡尼汀的供 试品溶液。 3.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定左卡尼汀有关物质的方法， 其特征在于： 所述的有机混合硅胶颗粒上化学键合了二羟基丙基的亲水性作用色谱柱为HILIC色谱柱 (柱长250mm×内径4.6m m， 粒径5 μm)。 4.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定左卡尼汀有关物质的方法， 其特征在于： 所述的流动相为乙腈和5 0～60mmol/L磷酸二氢钾溶 液体积比为75:25的混合溶 液。 5.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定左卡尼汀有关物质的方法， 其特征在于： 磷酸二氢钾溶 液的pH值 为4.7。 6.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定左卡尼汀有关物质的方法， 其特征在于： 所述的流速为1.0mL/mi n。 7.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定左卡尼汀有关物质的方法， 其特征在于： 所述的检测波长为20 5nm。 8.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定左卡尼汀有关物质的方法， 其特征在于： 高效液相色谱法采用的检测器为 紫外吸收检测器。 9.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定左卡尼汀有关物质的方法， 其特征在于： 所述的混合溶剂由流动相和水按照体积比为5 0:50配制而成。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115290779 A 210.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定左卡尼汀有关物质的方法， 其特征在 于： 还包括： 配制对照溶液： 精密量取供试品溶液适量， 采用流动相和水的混合溶剂配制成每1mL混 合溶剂含0.02mg～0.0 3mg左卡尼汀的供 试品溶液； 分别对对照溶液、 灵敏度溶液进行HPLC检测， HPLC检测的色谱条件与供试品溶液的 HPLC检测的色谱条件相同； 采用自身对照法测定左卡尼汀中的未知杂质。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115290779 A 3