(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211079008.2 (22)申请日 2022.09.05 (66)本国优先权数据 202111034538.0 2021.09.0 3 CN (71)申请人 成都中医药大学 地址 610000 四川省成 都市十二 桥路37号 申请人 张定堃 (72)发明人 张定堃　杨明　陈露梦　贾明艳　 林俊芝　袁海峰　贺亚男　谭鹏　 (74)专利代理 机构 成都高远知识产权代理事务 所(普通合伙) 51222 专利代理师 全学荣　张娟 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01)G01N 30/74(2006.01) (54)发明名称 一种附子强心作用的快速 评价方法 (57)摘要 本发明公开了一种附子强心作用的快速评 价方法， 它是采用光化学比色传感器评价， 具体 包括如下步骤： 1)供试品溶液的制备； 2)采集光 化学比色传感器图像中的绿色值； 3)计算绿色值 的差值。 该方法可快速定量评价各种附子饮片的 强心作用， 操作简单、 准确性 好、 检测通 量高。 权利要求书2页 说明书29页 附图6页 CN 115541739 A 2022.12.30 CN 115541739 A 1.一种附子强心作用的快速评价方法， 其特征在于： 它是采用光化学比色传感器评价， 具体包括如下步骤： 1)供试品溶液的制备： 生附片供试品溶液制备： 取生附片粉末， 加甲醇或50％甲醇或水浸泡， 提取， 提取液离 心， 取上清液挥干溶剂， 加缓冲液 溶解， 离心， 取 上清液， 过 滤， 即得； 黑顺片或白附片供试品溶液制备： 取黑顺片或白附片粉末， 加甲醇或50％甲醇或水浸 泡， 提取， 提取液离心， 取上清液挥干溶剂， 加含EDTA ‑2Na的缓冲溶液溶解， 离心， 取上清液， 调pH值7.8 ‑8.2， 过滤， 即得； 附子配方颗粒供试品溶液制备： 取附子配方颗粒， 加甲醇或50％甲醇或水浸泡， 提取， 提取液离心， 取上清液挥干溶剂， 加含EDTA ‑2Na的缓冲溶液溶解， 离心， 取上清液， 调pH值 7.8‑8.2， 再加缓冲液稀释2 ～3倍， 过 滤， 即得； 2)采集光化学比色传感器中图像的绿色值： 取茜素红S ‑苯硼酸混合溶液， 分别加缓冲溶液和附子饮片供试品溶液， 或分别加含 EDTA‑2Na的缓冲溶液和附子配方颗粒供试品溶液； 或分别加含EDTA ‑2Na的缓冲溶液和黑顺 片或白附片供试品溶液， 混匀， 0℃静置5min， 取静置后的溶液， 用平板扫描仪采集图像， 获 取图像中的绿色值； 3)计算绿色值的差值。 2.根据权利要求1所述的快速评价方法， 其特征在于： 步骤1)所述粉末为过40目筛的粉 末； 所述生附片与甲醇的质量体积比为1g： 5～15ml， 优选1g： 10ml； 所述黑顺片或白附片与 甲醇的质量体积比为1g： 10～20ml； 所述附子配方颗粒与甲醇的质量体积比为1g： 10～ 30ml， 优选1g： 20ml。 3.根据权利 要求1所述的快速评价方法， 其特征在于： 步骤1)所述浸泡30min； 所述提取 为超声提取， 时间15mi n； 所述提取液离心速度80 00r·min‑1， 时间10mi n。 4.根据权利要求1所述的快速评价方法， 其特征在于： 步骤1)所述加缓冲 液溶解是加生 附片10倍量的缓冲溶液溶解； 所述含EDTA ‑2Na的缓冲溶液中EDTA ‑2Na浓度为0.13g·mL‑1， 加入量分别为附子配方颗粒的8倍量v/w,ml/g， 黑顺片或白附片的10～20倍量v/w,ml/g； 所 述含EDTA ‑2Na的缓冲溶 液中还含有抗氧化剂； 所述 抗氧化剂为无 水Na2SO3， 浓度为0.1％。 5.根据权利要求1或4所述的快速评价方法， 其特征在于： 所述缓冲液为4 ‑羟乙基哌嗪 乙磺酸溶 液， 浓度为10‑2mol·L‑1， pH值为8.0。 6.根据权利要求1所述的快速评价方法， 其特征在于： 步骤1)所述溶解后离心的速度为 12000r·min‑1， 时间10min； 所述调pH值8.0， 调pH值的试剂为1.2 ×10‑2mol·L‑1的NaOH溶 液； 所述稀释3倍。 7.根据权利要求1所述的快速评价方法， 其特征在于： 步骤2)所述茜素红S ‑苯硼酸混合 溶液中茜素红S与苯硼酸的摩尔比为1： 3； 所述茜素红S ‑苯硼酸混合溶液与供试品溶液、 缓 冲溶液或含EDTA ‑2Na的缓冲溶 液的体积比为2： 1。 8.根据权利要求1所述的快速评价方法， 其特征在于： 步骤2)所述绿色值是采用Adobe   Photoshop  CS6软件包获取。 9.根据权利要求1～8任意一项所述的快速评价方法， 其特征在于： 所述绿色值的差值 越大， 供试品强心成分含量越高。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115541739 A 210.根据权利要求9所述的快速评价方法， 其特征在于： 所述绿色值的差值| △G|> 14.55， 生附片供试品为一等品， 9.8 1<|△G|<14.55， 生附片供试品为二等品， | △G|<7.41， 生附片供 试品为三等品。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115541739 A 3