(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210920822.6 (22)申请日 2022.08.02 (71)申请人 人福普克 药业 （武汉） 有限公司 地址 430206 湖北省武汉市东湖新 技术开 发区神墩二路9 9号 (72)发明人 陈凌燕　杨晗　刘淇　王超　王静　 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) (54)发明名称 一种采用高效液相色谱法检测尼达尼布含 量的方法 (57)摘要 本发明公开了一种采用高效液相色谱法检 测尼达尼布含量的方法， 属于医药化学分析技术 领域。 本发 明公开了一种采用高效液相色谱法检 测尼达尼布含量的方法， 所述检测方法采用高效 液相色谱法， 且以十八烷基键合硅胶为填充剂的 色谱柱， 以0.01mol/L的磷酸二氢钾缓冲液(含 0.1％的三乙胺， 用磷 酸调节pH至2.0) ‑乙腈(70： 30)为流动相， 进行等度洗脱。 本发明提供了一种 采用高效液相色谱法检测尼达尼布含量的方法， 对液相仪器的要 求低， 操作简单， 成本低， 能够快 速、 准确地定量检测乙磺酸尼达尼布软胶囊样品 中尼达尼布的含量。 权利要求书1页 说明书6页 附图3页 CN 115266993 A 2022.11.01 CN 115266993 A 1.一种采用高效液相色谱法检测尼达尼布含量的方法， 其特征在于， 所述高效液相色 谱法采用以十 八烷基键合硅胶为填充剂的色谱柱， 以缓冲液溶液和有机溶剂的混合溶液为 流动相， 进行等度洗脱； 所述缓冲盐溶 液为用磷酸调节pH的磷酸盐溶 液； 所述有机溶剂选自乙腈、 甲醇中的至少一种。 2.根据权利要求1所述的一种采用高效液相色谱法检测尼达尼布含量的方法， 其特征 在于， 所述 缓冲盐溶液为0.01mol/L的磷酸二氢钾缓冲液， 所述磷酸二氢钾缓冲液含体积浓 度为0.1‑0.2％的三乙胺， 用磷酸调节pH 至1.8‑2.2。 3.根据权利要求1所述的一种采用高效液相色谱法检测尼达尼布含量的方法， 其特征 在于， 所述有机溶剂为乙腈。 4.根据权利要求3所述的一种采用高效液相色谱法检测尼达尼布含量的方法， 其特征 在于， 所述磷酸 二氢钾缓冲液与所述乙腈的体积比为(68 ‑72)： (28‑32)。 5.根据权利要求1所述的一种采用高效液相色谱法检测尼达尼布含量的方法， 其特征 在于， 所述高效液相色谱法中， 柱温为20 ‑30℃。 6.根据权利要求1所述的一种采用高效液相色谱法检测尼达尼布含量的方法， 其特征 在于， 所述高效液相色谱法中， 流速为0.8 ‑1.2mL/mi n， 运行时间为15 ‑25min。 7.根据权利要求1所述的采用高效液相色谱法检测尼达尼布含量的方法， 其特征在于， 所述高效液相色谱法中， 检测波长为218 ‑222nm， 进样量 为10‑50 μL。 8.根据权利要求1所述的采用高效液相色谱法检测尼达尼布含量的方法， 其特征在于， 所述色谱柱规格为： 内径为 4.6mm， 长度为25 0mm， 填料粒径为5 μm。 9.根据权利要求1 ‑8任一项所述的采用高效液相色谱法检测尼达尼布含量的方法， 其 特征在于， 具体包括以下步骤： S1、 溶液配制： 样品溶液配制： 取乙磺酸尼达尼布软胶囊， 置于容量瓶中， 加稀释剂并水浴振摇， 冷却 后定容， 摇匀并过 滤， 再移取 滤液于容量瓶中， 并用稀释剂定容， 摇匀， 备用； 对照品溶液配制： 称取乙磺酸尼达尼布对照品， 加入稀释剂， 经两步稀释定容配制成含 乙磺酸尼达尼布3 5‑210 μg/mL的对照品溶 液； S2、 进样检测： 分别取步骤S1的所述样品溶液和对照品溶液进样， 采用高效液相色谱法 进行色谱分析， 按外标法以峰面积计算样品溶 液中尼达尼布的含量。 10.根据权利要求9所述的采用高效液相色谱法检测尼达尼布含量的方法， 其特征在 于， 所述稀释剂为乙腈和水的混合溶 液， 乙腈和水的体积比为(25 ‑30):(70‑75)； 所述两步稀释具体为： 乙磺酸尼达尼布对照品置25mL量瓶中， 加适量稀释剂使溶解， 用 稀释剂稀释至刻度， 摇匀， 精密量取上述溶液5mL， 置50mL量瓶中， 用稀释剂稀释至刻度， 摇 匀。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115266993 A 2一种采用高 效液相色谱法检测尼达尼布含量的方 法 技术领域 [0001]本发明涉及医药分析化学技术领域， 更具体的说是涉及 一种采用高效液相色谱法 检测尼达尼布含量的方法。 背景技术 [0002]尼达尼布(Nintedanib)是勃 林格殷格翰公司开发的一种口服三联血管激酶抑制 剂， 2014年10月经FDA批准 (尼达尼布)用于治疗特发性肺纤维化(IPF)， 成为首个 获准用于治疗IPF的酪氨酸激酶抑制剂(TKI)。 尼达尼布(Nintedanib)针对已被证实在肺纤 维化病理机制中具有潜在影响的生长因子受体发挥作用， 其中最为重要的就是血小板源性 生长因子受体(PDGFR)、 成纤维细胞生长因子受体(FGFR)和血管内皮生长因子受体 (VEGFR)。 通过阻断这些参与纤维化进程的信号转导通路， 尼达尼布(Nintedanib)能够通过 减少肺功能下降速度、 从而减缓IPF疾病进 展。 [0003]目前， 中国药典(现行版)、 美国药典(现行版)、 日本药局方(JP17)， 欧洲药典 (EP10.5)均未收载乙磺酸尼达尼布原料药及制剂， 但乙磺酸尼达尼布软囊中尼达尼布含量 的准确测定是保证乙磺酸尼达尼布软胶囊质量的关键。 乙磺酸尼达尼布软胶囊(规格： 150mg和100mg)已在国内上市， 乙磺酸尼达尼布软胶囊进口注册标准中尼达尼布含量的测 定采用高效液相的分析方法进行检测， 方法采用梯度洗脱的方法进行测定， 样品运行 的时 间周期较长， 在测定的过程中， 检测波长在样品运行周期内是变化的， 方法对仪器的要求较 高。 [0004]因此， 针对现有技术中存在的缺陷， 为降低方法对仪器的要求和分析时间， 提供一 种能降低其对液相色谱的要求， 又能简单、 快速、 准确地检测出乙磺酸尼达尼布软胶 囊中尼 达尼布的含量是本领域 技术人员亟需解决的问题。 发明内容 [0005]有鉴于此， 本发明提供了一种采用高效液相色谱法检测尼达尼布含量的方法， 该 方法专属性好， 重现性好， 准确度高， 不受空 白和其他杂质干扰， 且能降低其对液相色谱的 要求， 又能简单、 快速、 准确地检测出乙磺酸尼达尼布软胶囊中尼达尼布的含量， 能够保证 对乙磺酸尼达尼布软胶囊的质量控制。 [0006]为了实现上述目的， 本发明采用如下技 术方案： [0007]一种采用高效液相色谱法检测尼达尼布含量的方法， 所述高效液相色谱法采用以 十八烷基键合硅胶为填充剂的色谱柱， 以缓冲液溶液和有机溶剂的混合溶液为流动相， 进 行等度洗脱； [0008]所述缓冲盐溶 液为用磷酸调节pH的磷酸盐溶 液或醋酸盐溶 液； [0009]所述有机溶剂选自乙腈、 甲醇中的至少一种。 [0010]优选地， 所述缓冲盐溶液为0.0 1mol/L的磷酸二氢钾缓冲液， 所述磷酸二氢钾缓冲 液含体积浓度为0.1 ‑0.2％的三乙胺， 用磷酸调节pH 至1.8‑2.2。说　明　书 1/6 页 3 CN 115266993 A 3