(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211006013.0 (22)申请日 2022.08.22 (71)申请人 贵州医科 大学 地址 550004 贵州省贵阳市 云岩区北京路4 号 (72)发明人 郑林　黄勇　周祖英　迟明艳　 巩仔鹏　李月婷　陆苑　 (74)专利代理 机构 贵州派腾知识产权代理有限 公司 521 14 专利代理师 龙远宁 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/72(2006.01) G01N 30/88(2006.01)G01N 30/86(2006.01) (54)发明名称 一种透骨香药材中多种成分含量测定的方 法 (57)摘要 本发明涉及中药检测技术领域， 具体是一种 透骨香药材中多种成分含量测定的方法。 本发明 采用UPLC ‑MS/MS方法， 使用Acquity  I‑Class  UPLC BEH C18色谱柱(2.1mm ×100mm， 内径1.7μ m)进行分析。 色谱柱和自动进样器分别保持在40 ℃和25℃， 流速为0.3mL/min， 进样量为1μL。 流 动相由0.1 ％的甲酸水溶液A和0.1％的乙腈甲酸 B组成。 按照本发明的方法， 可以快速同时分离透 骨香药材中的原儿茶酸、 表儿茶素、 绿原酸、 槲皮 素、 白珠树苷、 滇白珠苷A， 且分离效果好。 可用于 透骨香药材中原儿茶酸、 表儿茶素、 绿原酸、 槲皮 素、 白珠树苷、 滇白珠苷A的含量测定， 为提升透 骨香药材的质量控制水平提供实验依据。 权利要求书2页 说明书11页 附图5页 CN 115326981 A 2022.11.11 CN 115326981 A 1.一种透骨香药材中多种成分含量测定的方法， 其特征在于， 采用UPLC ‑MS/MS方法进 行测定； 使用A cquityI‑Class UPLC BEH C18色谱柱(2.1mm ×100mm， 内径1.7 μm)进行分析； 色谱柱和自动进样器分别保持在40℃和25℃， 流速为0.3mL/min， 进样量为1μL； 流动相由 0.1％的甲酸水溶液A和0.1％的乙腈甲酸B组成； 洗脱梯度如下： 0 –0.5min， 10％～10％B； 0.5–2.5min； 10％～40％B； 2.5 –4分钟， 40％～9 0％B； 4–4.5分钟， 9 0％～90％B； 4.5 –6分钟， 90％～10％B。 2.根据权利要求1所述的透骨香药材中多种成分含量测定的方法， 其特征在于， 所述 UPLC‑MS/MS方法， 所用UPLC ‑MS/MS系统由配备有电喷雾电离源的ACQUITYI ‑Class UPLC系 统和XEVO  TQS‑三重四极串联质谱仪组成。 3.根据权利要求2所述的透骨香药材多种成分含量测定的方法， 其特征在于， 所述 UPLC‑MS/MS系统， 还配备了Waters  VanGuard BEH C18(2.1m m×5mm， 1.7 μm)色谱柱。 4.根据权利要求1所述的透骨香药材多种成分含量测定的方法， 其特征在于， 所述 UPLC‑MS/MS方法， 其质谱仪参数如下： 毛细管电压3.0kV； 毛细管电离电压3.0kV； 离子源温 度为120℃； 喷雾气体和反吹气体， N2； 脱溶剂气流量， 650L/h； 和去溶剂化气体温度为350 ℃， 使用多反应监测模式进行定量。 5.根据权利要求4所述的透骨香药材中多种成分含量测定的方法， 其特征在于， 所述多 反应监测模式下分析物的参数， 具体如下： 6.根据权利要求1所述的透骨香药材中多种成分含量测定的方法， 其特征在于， 所述供 试品溶液通过如下步骤制备得到： 精密称取透骨香药材， 精密加入50％甲醇25mL， 称 重后回 流2h， 冷却， 加入50％甲醇进行补重， 取200μL加入50％甲醇800μL涡混， 离心12000rpm， 10min， 取上清液。 7.根据权利要求1所述的透骨香药材中多种成分含量测定的方法， 其特征在于， 所述对 照品溶液通过如下步骤制备得到： 精密称取对照品适量， 用甲醇稀释 至10mL， 分别获得绿原 酸(1.020g/L)、 原儿茶酸(1.035g/L)、 表儿茶素(1.018g/L)、 槲皮素(0.878g/L)、 白珠树苷 (1.030g/L)和滇白珠苷A(1.116g/L)的储备液； 精密量取上述六种对照品储备溶液并稀释 至最终浓度为 绿原酸(0.012mg/mL)、 原儿茶酸(0.041mg/mL)、 表儿茶素(0.101mg/mL)、 槲皮 素(0.137mg/mL)、 白珠树苷(0.0 77mg/mL)和滇白珠苷A(0.0 71mgm/L)； 精密量取上述六种对 照品的终浓度原液100 μL， 混合后得到混合对照品溶液， 依次用2倍稀释法稀释后， 保存在 ‑ 20℃环境中备用。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115326981 A 28.根据权利要求1所述的透骨香药材中多种成分含量测定的方法， 其特征在于， 所述多 种成分含量测定， 是同时测定透骨香药材中的原儿茶酸、 表儿茶素、 绿原 酸、 槲皮素、 白珠树 苷、 滇白珠苷 A含量。 9.根据权利要求1所述的透骨香药材中多种成分含量测定的方法， 其特征在于， 所述 UPLC‑MS/MS方法， 所得数据均使用MasslynxTM  V 4.1软件获得， 并使用QuanlynaTMV4.1工 作站进行处 理。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115326981 A 3