(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210962076.7 (22)申请日 2022.08.11 (71)申请人 北京大学第三医院 （北京大 学第三 临床医学院） 地址 100191 北京市海淀区花园北路49号 (72)发明人 徐明　周江　王佳星　 (74)专利代理 机构 北京中和立达知识产权代理 有限公司 1 1756 专利代理师 张可 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/72(2006.01) (54)发明名称 一种辅助预测或诊断肥胖合并高脂血症儿 童的标志 物组合物 (57)摘要 本发明属于生物医药技术领域， 具体涉及一 种辅助预测或诊断肥胖合并高脂血症儿童的标 志物组合物， 所述标志物组合物包含饱和烷烃、 芳香烃和不饱和醛酮类物质， 所述标志物组合物 用于通过气相色谱 ‑质谱法对样品进行检测， 所 述样品是呼出气可挥发代谢物。 本发 明首次将包 含饱和烷烃、 芳香烃和不饱和醛酮类物质的标志 物组合物用于辅助预测或诊断肥胖合并高脂血 症儿童， 这种标记物组合物通过对呼出气可挥发 代谢物进行气相色谱 ‑质谱法检测即可， 具有检 测方法简单、 检测高通量、 检测方法高灵敏度和 高特异性等优点， 具有重要的科学研究和临床应 用价值。 权利要求书1页 说明书5页 附图3页 CN 115326958 A 2022.11.11 CN 115326958 A 1.一种辅助预测或诊断肥胖合并高脂血症儿童的标志物组合物， 其特征在于： 所述标 志物组合物包 含饱和烷烃、 芳 香烃和不饱和醛酮类物质。 2.根据权利要求1所述的标志物组合物， 其特征在于： 所述标志物组合物包含十七烷、 萘和顺式 ‑6‑壬烯醇。 3.根据权利要求1所述的标志物组合物， 其特征在于： 所述标志物组合物由十七烷、 萘 和顺式‑6‑壬烯醇组成。 4.根据权利要求1至3中任一项所述的标志物组合物， 其特征在于： 所述标志物组合物 用于通过气相色谱 ‑质谱法对样品进行检测。 5.根据权利要求4所述的标志物组合物， 其特征在于： 所述样品是呼出气可挥发代谢 物。 6.根据权利要求1至5中任一项所述的标志物组合物， 其特征在于： 所述辅助预测或诊 断肥胖合并高脂血症儿童的检测方法包括以下步骤： 步骤1： 收集呼出气； 步骤2： 代谢物固相萃取； 步骤3： 代谢物检测； 和 步骤4： 质谱数据分析。 7.根据权利要求6所述的标志物 组合物， 其特征在于： 所述步骤1具体包括以下步骤： 在 晨起吃早饭前， 收集受试儿童的呼出气， 嘱受试儿童深吸气， 之后缓缓呼入气袋， 使用一次 性特氟龙气 体采样袋收集呼出气， 直至气 袋充满后关闭单向阀门， 气 袋需在6小时之内进 行 后续检测。 8.根据权利要求6所述的标志物 组合物， 其特征在于： 所述步骤2具体包括以下步骤： 将 步骤1收集呼出气气袋的吹气嘴去掉， 旋上取样帽， 对呼出气中的代谢物进行固相萃取， 将 固相微萃取组件中的萃取针插 入所述气袋中， 伸出萃取针置 于37℃孵箱孵 育30分钟。 9.根据权利要求6所述的标志物 组合物， 其特征在于： 所述步骤3具体包括以下步骤： 缩 回萃取针， 从气袋中取出， 立即插入气相色谱(GC)进样孔， 释放30秒后开始采集， GC温度梯 度为： 40℃持续1分钟， 从40℃升到180℃， 5℃/分钟， 180℃持续2分钟， 总计31分钟； 质谱检 测源温度250℃， 离子源温度200℃， 扫描范 围质核比(m/z)为30 ‑550， 扫描速度2.8次扫描/ 秒， 电离能量70eV。 10.根据权利要求6所述的标志物组合物， 其特征在于： 所述步骤4具体包括以下步骤： 使用TraceFinder  5.0软件对质谱 数据进行后处理， 进行去 卷积分析， 将空气空白背景扣除 后， 对样本进 行峰对齐比较， 如果所述样品中饱和烷烃、 芳香烃和不饱和醛酮类物质的丰度 与肥胖但未合并高脂血症儿童或超重儿童的历史平均丰度相比显著较高， 则认为所述儿童 属于肥胖合并高脂血症的可能性较高。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115326958 A 2一种辅助预测或诊断肥胖合并 高脂血症儿童的标志物组合物 技术领域 [0001]本发明属于生物医药技术领域， 具体涉及 一种辅助预测或诊断肥胖合并高脂血症 儿童的标志 物组合物。 背景技术 [0002]在过去的几十年中， 肥胖已成为全球日益严重的公共卫生问题。 肥胖与高血压、 心 绞痛、 高血压、 糖尿病和关节炎有关， 还导致多种其他疾病。 儿童和 青春期肥胖患病率的增 加带来了一个日益严重的问题， 因为很大一部 分超重儿童往往会变成肥胖的成年人。 肥胖， 尤其是早年开始的血脂异常会显着增加晚年的心血管风险。 也就是说， 青少年期的肥胖与 成年后多种心血管及代谢性疾病的发生有密切关联， 因此对于青少年肥胖的精准分型对于 未来合并疾病的预测可能有重要意 义。 [0003]合并高脂血症的肥胖儿童相较于其他肥胖或超重儿童的代谢特征可能存在一定 差异。 此前的研究揭示， 患有血脂异常 的肥胖儿童的甘油三酯(TG)和非HDL ‑胆固醇均较高 (参见， 例如， Calcaterra  V,De Giuseppe  R,Biino G,Mantelli  M,Marchini  S,Bendotti   G,MadèA,Avanzini  MA,Montalbano  C,Cossellu  G et al:Relation  between   circulating  oxidized ‑LDL and metabolic  syndrome  in children  with obesity:the   role of hypertriglyceridemic  waist phenotype.J  Pediatr Endocrinol  Metab 2017, 30(12):1257 ‑1263)。 然而， 此前的研究还表明， 肥胖儿童可能并不总是并发血脂异常， 反之 亦然。 这种不同的血脂异常或肥胖表型可能包含不同的内部机制和未来风险。 因此， 开 发区 分有无血脂异常的各类肥胖的方法将有利于对某些并发症的了解和治疗。 但是， 包括实验 室检查在内的传统方法在诊断效率方面存在局限性。 由此可见， 无创检测呼吸可挥发代谢 物的创新方法可能提供深入研究的机会。 [0004]人类呼出气为儿童的诊断应用提供了几个好处， 包括访问简单和非侵入性收集。 呼出气是临床相关生物信息的丰富来源。 用于疾病诊断或预后的可挥发有机物评估是一个 不断发展的研究领域。 一些研究人员已经证明， 呼气测试可以显着改善肺癌或非传染性慢 性病等疾病的早期发现(参见， 例如， Issitt  T,Wiggins  L,Veysey  M,Sweeney  ST, Brackenbury  WJ,Redeker  K:Volatile  compounds  in human breath:critical  review  and meta‑analysis.J Breath Res 2022,16(2))。 此前的研究发现， 一组可挥发代谢物， 如 乙苯、 2‑辛烯醛或十八烯， 可用于区分哮喘儿童和健康儿童(参见， 例如， Gahleitner  F, Guallar‑Hoyas C,Beardsmore  CS,Pandya  HC,Thomas  CP:Metabolomics  pilot study to  identify  volatile  organic compound  markers of childhood  asthma in exhaled  breath.Bioanalysis  2013,5(18):2239 ‑2247)。 此外， 慢性阻塞性肺疾病患者呼出的挥发 性有机化合物(如一氧化氮浓缩物)具有区分不稳定患者和稳定患者的能力。 因此， 从原理 上看， 通过对呼出的可挥发代谢物或其相对浓度的评估完全有可能为儿童肥胖分类 或风险 预测提供线索。说　明　书 1/5 页 3 CN 115326958 A 3