(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210897445.9 (22)申请日 2022.07.28 (71)申请人 宜宾五粮液股份有限公司 地址 644007 四川省宜宾市岷江西路15 0号 (72)发明人 廖勤俭　李杨华　安明哲　赵东　 乔宗伟　胡娇　王小琴　罗珠　 周韩玲　郭艳　王芳　 (74)专利代理 机构 成都虹桥专利事务所(普通 合伙) 51124 专利代理师 吴中伟 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/72(2006.01) (54)发明名称 一种白酒中甾醇的检测方法 (57)摘要 本发明主要涉及化学技术分析领域。 为了解 决白酒中的甾醇含量难以测量的问题， 本发明提 供一种白酒 中甾醇的检测方法， 所述方法以白酒 作为样品进行甾醇含量检测； 白酒样品采用固相 萃取小柱进行预处理得到待测样品， 采用气相质 谱法对待测样品进行检测， 计算甾醇含量。 权利要求书1页 说明书5页 附图3页 CN 115112804 A 2022.09.27 CN 115112804 A 1.一种白酒中甾醇的检测方法， 其特征在于， 所述方法 以白酒作为样品进行甾醇含量 检测： 白酒样品采用固相萃取小柱进行预处理得到待测样品， 采用气相质谱法对待测样品 进行检测， 计算甾醇含量。 2.根据权利要求1所述的一种白酒中甾醇的检测方法， 其特征在于， 采用固相萃取小柱 进行预处理的步骤 包括小柱活化、 平衡、 上样， 淋洗， 洗脱， 浓 缩洗脱液。 3.根据权利要求2所述的一种白酒中甾醇的检测方法， 其特征在于， 所述小柱 活化中以 甲醇或乙腈作为小柱活化溶剂。 4.根据权利要求2所述的一种白酒中甾醇的检测方法， 其特征在于， 所述平衡中采用 0.1％甲酸水 溶液进行平衡。 5.根据权利要求2所述的一种白酒中甾醇的检测方法， 其特征在于， 所述上样包括： 将 白酒样品稀释至酒精浓度5％～ 20％后进行 上样。 6.根据权利要求2所述的一种白酒中甾醇的检测方法， 其特征在于， 所述淋洗中淋洗液 为浓度80％～ 90％的甲醇水溶液。 7.根据权利要求2所述的一种白酒中甾醇的检测方法， 其特征在于， 所述洗脱中洗脱液 为甲醇或乙腈。 8.根据权利要求1所述的一种白酒中甾醇的检测方法， 其特征在于， 所述甾醇为β －谷 甾醇、 菜油甾醇、 豆甾醇、 麦角甾醇四种甾醇中的至少两种的混合物。 9.根据权利要求1所述的一种白酒中甾醇的检测方法， 其特征在于， 使用气相色谱－三 重四极杆质谱仪对待测样品进行气相质谱检测； 所述气相色谱的检测条件为： 色谱柱： HP ‑5MS毛细管色谱柱； 程序升温： 200℃保持 0min， 以15℃/min升至300℃， 保持20min； 采用恒流模式， 载气He流速1.0mL/min， 不分流进 样， 进样量1 μL， 进样口温度3 00℃； 所述质谱检测条件为： 电子轰击电离源： 电子能量70eV； 离子源温度230℃； 传输线温度 230℃； 四极杆温度15 0℃； 定性采用全扫描模式， 质量扫描范围M /Z45‑500， MRM模式。 10.根据权利要求1 ‑9任意一项所述的一种白酒中甾醇的检测方法， 其特征在于， 所述 甾醇含量计算方法包括以下步骤： 绘制标准曲线： 配制甾醇混合标准母液， 以甾醇混合标准母液浓度为横坐标， 以甾醇母 离子－子离子对质荷比信号峰的峰面积为纵坐标， 绘制浓度－峰面积标准曲线； 检测并计算甾醇含量： 将待测样品进样至气相色谱－三重四极杆质谱仪， 根据甾醇母 离子－子离子对质荷比信号峰的峰面积与绘制的标准曲线计算出 各种甾醇的含量。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115112804 A 2一种白酒中甾醇的检测方 法 技术领域 [0001]本发明主 要涉及化学分析技 术领域， 尤其是 涉及一种白酒中甾醇的检测方法。 背景技术 [0002]甾醇， 一类由3个己烷环及一个环戊烷稠合而成的环戊烷多氢菲衍生物。 除细 菌中 缺少外， 是广泛存在于生物体内的一种重要的天然活性物质， 按其原料来源分为动物性甾 醇、 植物性甾醇和菌类甾醇等三大类。 甾醇有多种不同的生物学功能， 如作为细胞膜的成分 及构成肾上腺皮质激素和性激素等。 不少植物甾醇还具有很强的药 理或毒理效应， 如β －谷 甾醇有降胆固醇、 止咳、 祛痰 及抑制肿瘤和修复组织作用。 [0003]白酒属于固态发酵蒸馏酒， 主要以粮食为原料， 酒曲作为发酵剂， 经长时间自然固 态发酵后蒸馏所得。 固态发酵过程中， 原辅材料中的各种活性成分在各酶系、 微生物代谢等 作用下释放到酒糟中， 一些活性成分再经以酒糟为填料 的精馏塔式的特殊蒸馏方式， 随着 酒精蒸汽或水蒸气的拖带作用进入酒体， 使白酒区别于液态发酵蒸馏酒， 而含有大量由粮 食原料及发酵过程所产生的风味及活性成分。 研究白酒中的甾醇类物质， 阐明其生理活性， 对白酒产品的市场推广有重要的意义。 同时， 对比分析液态发酵蒸馏酒与固态发酵白酒中 的微量活性成分 甾醇， 并以此评价固态发酵白酒的真实性， 有利于提升白酒品质， 并有助于 白酒的质量的有效监控。 [0004]甾醇具有高沸点、 不挥发、 弱极性的物理化学性质， 普通的蒸馏方式很难蒸馏得 到， 而白酒蒸馏过程中层层酒糟所形成的精馏塔， 使得甾醇可以在乙醇蒸气的拖带作用下 进入酒体， 但是含量很低， 由此未见白酒中甾醇检出的相关报道， 因此， 亟需提供一种操作 简便、 灵敏度高、 准确度高的检测方法。 发明内容 [0005]本发明所要解决的技 术问题： [0006]提供一种白酒中甾醇的检测方法， 解决白酒中的微量甾醇的含量无法测定的问 题。 [0007]本发明解决上述 技术问题所采用的技 术方案： [0008]一种白酒中甾醇的检测方法， 所述方法以白酒作为样品进行甾醇含量检测； 白酒 样品采用固相萃取小柱进行预处理得到待测样品， 采用气相质谱法对待测样品进行检测， 计算甾醇含量。 [0009]进一步的， 采用固相萃取小柱进行预处理的步骤包括小柱活化、 平衡、 上样， 淋洗， 洗脱， 浓缩洗脱液； [0010]以甲醇或乙腈作为小柱活化溶剂； [0011]采用0.1％甲酸水 溶液进行平衡； [0012]将白酒样品稀释至酒精浓度5％～ 20％后进行 上样； [0013]淋洗液为浓度80％～ 90％甲醇水 溶液；说　明　书 1/5 页 3 CN 115112804 A 3