(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210920799.0 (22)申请日 2022.08.02 (71)申请人 人福普克 药业 （武汉） 有限公司 地址 430206 湖北省武汉市东湖新 技术开 发区神墩二路9 9号 (72)发明人 张志鹏　程凯　林娟　李雪艳　 蒋露露　陈丽琴　王秀荣　 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/72(2006.01) (54)发明名称 一种测定维生素D类软胶囊溶 出的方法 (57)摘要 本发明公开了一种测定维生素D类软胶囊 溶 出的方法， 属于医药化学分析技术领域。 本发明 公开了一种测定维生素D类软胶囊溶出的方法， 溶出介质为0.1 ％‑1.0％(g/mL)的十二烷基硫 酸 钠水溶液， 并采用UPLC ‑MS法测定供试品溶液中 维生素D类化合物的含量， 经换算得到相应的溶 出度。 本发明提供了一种测定维生素D类软胶囊 溶出的方法， 更加真实的反映了维生素D类软胶 囊体内溶出释放行为， 克服了油性基质的内容物 的批内或批间溶出结果差异性的问题， 客观反映 了维生素D类软胶囊的实际溶出行为和制剂质 量。 权利要求书2页 说明书8页 附图3页 CN 115266992 A 2022.11.01 CN 115266992 A 1.一种测定维生素D类软胶囊溶 出的方法， 其特 征在于， 具体包括以下步骤： S1、 配制溶 出介质： 称取十二 烷基硫酸钠， 并与纯化水， 配制成十二 烷基硫酸钠水 溶液； S2、 运行溶出仪： 室温避光条件下， 设定条件为篮法， 溶出转速75 ‑150rpm/min， 温度37 ±0.5℃； S3、 供试品溶液的制备： 往溶出杯中加入步骤S1中的溶出介质， 仪器运行， 将溶出介质 温度恒定在至37 ±0.5℃， 加入维生素D类软胶囊， 溶出至取样点， 吸取溶出液至离心管， 经 离心处理后得到供 试品溶液； S4、 配制对照品溶 液； S5、 测定： 采用UPLC ‑MS法测定供 试品溶液及对照品溶 液中维生素D类化 合物的含量。 2.根据权利要求1所述的一种测定维生素D类软胶囊溶出的方法， 其特征在于， 在步骤 S1中， 所述十二 烷基硫酸钠水 溶液的浓度为0.1 ‑1.0％(g/mL)； 所述配制的具体操作为： 取脱气水并加热至40℃， 加入十二烷基硫酸钠， 加热搅拌60 ‑ 120min， 使其溶解混匀， 充分搅拌排气泡后备用。 3.根据权利要求1所述的一种测定维生素D类软胶囊溶出的方法， 其特征在于， 在步骤 S3中， 所述取样点为10min、 15min、 30min、 60min、 90min、 120min和180min， 取样体积为5mL， 取样后补加溶 出介质5mL； 所述离心处理的具体操作为： 将离心管在转为速8000 ‑12000转/min的条件下， 离心时 间8‑12min。 4.根据权利要求1所述的测定维生素D类软胶囊溶出的方法， 其特征在于， 在步骤S4中， 所述对照品溶 液的配制方法为： (1)对照储备液的配制： 取维生素D类化合物置于容量瓶中， 用少量乙醇溶解后， 加入中 链甘油三酸酯， 涡旋混匀至少5min， 配制成浓度为25 μg/g的维生素D类溶液； 取浓度为25 μg/ g的维生素D类溶液加入中链甘油三酸酯， 涡旋混匀至少5min， 配制成浓度为7.5 μg/g的对照 储备液； (2)对照品溶液的配制： 称取对照储备液， 用甲醇稀释并摇匀， 取稀释后的液体并用溶 出介质稀释， 振摇混匀至少5mi n， 配制成浓度为1.5ng/mL的对照品溶 液。 5.根据权利要求1所述的一种测定维生素D类软胶囊溶出的方法， 其特征在于， 在步骤 S5中， 所述UPLC ‑MS法的色谱条件为： 色谱柱： 十八烷基硅烷键合硅胶； 流动相A： 0.1mM醋酸锂/甲醇＝(25)/(75)； 流动相B： 乙醇； 流速： 0.3 5mL/min； 柱温： 40℃； 样品盘温度： 20℃； 进样量： 10 μL； 运行时间： 12mi n； 洗脱方式： 梯度洗脱。 6.根据权利要求5所述的测定维生素D类软胶囊溶出的方法， 其特征在于， 所述色谱柱 规格为： 填料为Triar t C18， 内径为2.1m m， 长度为5 0mm， 填料粒径为1.9 μm。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115266992 A 27.根据权利要求5所述的测定维生素D类软胶囊溶出的方法， 其特征在于， 所述梯度洗 脱的程序为： 时间(min) 流动相A(V％) 流动相B(V％) 0.0 100 0 5.0 100 0 5.5 0 100 8.5 0 100 9.0 100 0 12.0 100 0 。 8.根据权利要求1所述的一种测定维生素D类软胶囊溶出的方法， 其特征在于， 在步骤 S5中， 所述UPLC ‑MS法的质谱条件为： 检测器： 串联四级杆质谱检测器； 监测模式： MRM； 离子化模式： ESI+； 锥孔电压： 90V； 母离子m/z为497.3； 子离子m/z为83.1； 碰撞能： 32 V。 9.根据权利要求1所述的一种测定维生素D类软胶囊溶出的方法， 其特征在于， 在步骤 S5中， 所述UPLC ‑MS法的调谐方法为： 锥孔气流速： 5 0L/h； 离子源温度： 15 0℃； 脱溶剂温度： 40 0‑600℃； 雾化气流速： 80 0‑1200L/h； 毛细管电压： 1.5kv。 10.根据权利要求1 ‑9任一项所述的测定维生素D类软胶囊溶出的方法， 其特征在于， 所 述维生素D类软胶囊包括麦角钙化醇软胶囊、 胆钙化醇软胶囊、 骨化二醇软胶囊、 骨化三醇 软胶囊、 阿法骨化醇软胶 囊、 帕立骨化醇软胶 囊、 艾地骨化醇软胶 囊和维生素AD软胶 囊中一 种。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115266992 A 3