(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211023193.3 (22)申请日 2022.08.25 (71)申请人 广西中医药大学制药厂 地址 530000 广西壮 族自治区南宁市东葛 路60号 (72)发明人 吴玉强　覃洁萍　梁梓敏　谭红声　 郭海姣　罗宇东　谭安蔷　陈晓艺　 庞晓云　 (74)专利代理 机构 北京华仁联合知识产权代理 有限公司 1 1588 专利代理师 霍春荣 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) (54)发明名称 一种扶芳 参芪口服液多组分含量测定方法 (57)摘要 本发明提出了一种扶芳参芪口服液多组分 含量测定方法， 属于分析检测技术领域， 采用高 效液相色谱测定扶芳参芪口服液中人参皂苷 Rg1、 人参皂苷Re、 人参皂苷Rb1、 黄芪甲苷的含 量。 采用本发 明测定方法检测扶芳参芪口服液多 组分含量， 并得到指纹图谱， 精密度、 准确性、 重 复性良好， 24h内稳定， 各批样品中所含指标性成 分的一致性较好， 提供了一种更加全面、 准确的 检测扶芳参芪口服液的新方法， 有利于稳定产品 的质量， 确保临床用药安全性和有效性。 权利要求书1页 说明书7页 附图3页 CN 115236241 A 2022.10.25 CN 115236241 A 1.一种扶芳参芪口服液多组分含量测定方法， 其特征在于， 采用高效液相色谱测定扶 芳参芪口服液中人参皂苷Rg1、 人参皂苷Re、 人参皂苷Rb1、 黄芪甲苷的含量。 2.根据权利要求1所述扶芳参芪口服液多组分含量测定方法， 其特征在于， 包括以下步 骤： S1.对照品溶液的制备： 分别取人参皂苷 Rg1、 Re、 Rb1、 黄芪甲苷对照品适量， 精密称定， 加甲醇溶解并定容至刻度的混合对照品溶 液； S2.供试品溶液的制备： 精密吸取装量差异项下的扶芳参芪口服液置于分液漏斗 中， 加 入浓氨水， 然后精密量取水饱和正丁醇加入分液漏斗中， 振摇萃取， 分取上层溶液， 加入适 量的甲醇使其完全溶解后， 并移至容量瓶中， 定容， 摇匀； 取适量该溶液于离心管中， 离心， 取上层清液， 过 滤， 即得供试品溶液； S3.对照药材溶液的制备： 按扶芳参芪口服液处方工艺分别制备扶芳藤药材、 黄芪药材 及人参药材提取液， 取适量各药材提取液分别置于分液漏斗中， 按供试品溶液制备方法同 法制备， 得扶芳藤药 材、 黄芪药 材和人参药 材对照溶 液； S4.色谱条件： 色谱柱为岛津Shim ‑pack CLC‑ODS； 流动相乙腈为A相， 水为B相； 采用梯 度洗脱， 流速0.5 ‑1.5mL·min‑1； 柱温为30 ‑40℃； 漂移管温度为70 ‑90℃； 空气气体流量为 1.5‑2.5L/min； 增益值为0.5‑1.5， 检测器为蒸发光散射检测器。 S5.分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液， 注入高效液相色谱仪， 按照步骤S4所述色 谱条件测定， 即得。 3.根据权利要求2所述扶芳参芪口服液多组分含量测定方法， 其特征在于， 步骤S2中所 述扶芳参芪口服、 浓氨水、 水饱和正 丁醇的体积比为3 0∶ 1‑3∶ 10‑20。 4.根据权利要求2所述扶芳参芪口服液多组分含量测定方法， 其特征在于， 步骤S2中所 述萃取重复操作3 ‑5次。 5.根据权利要求2所述扶芳参芪口服液多组分含量测定方法， 其特征在于， 步骤S2中所 述离心的转速为13000r/min， 时间为5 ‑10min； 所述过滤为经0.45 μm微孔滤膜过滤； 所述浓 氨水的浓度为25 ‑28wt％。 6.根据权利要求2所述扶芳参芪口服液多组分含量测定方法， 其特征在于， 步骤S4中所 述梯度洗脱的步骤如下： 0 ‑5min： 21％ ‑22％A相， 余量为B相， 5 ‑15min： 22％ ‑22.5％A相， 余 量为B相， 15 ‑30min： 22.5％‑30％A相， 余 量为B相， 30‑70min： 30％‑40％A相， 余 量为B相。 7.根据权利要求2所述扶芳参芪口服液多组分含量测定方法， 其特征在于， 步骤S4中所 述色谱条件： 色谱柱为岛津Shim ‑pack CLC‑ODS； 流动相乙腈为A相， 水为B相； 采用梯度洗 脱， 流速1  mL·min‑1； 柱温为35℃； 漂移管温度为80℃； 空气气体流量为2L/min； 增益值为1， 检测器为蒸发光散射检测器。 8.根据权利要求2所述扶芳参芪口服液多组分含量测定方法， 其特征在于， 步骤S4中所 述色谱柱的规格为6m m×150mm， 粒径为5 μm。 9.根据权利要求2所述扶芳参芪口服液多组分含量测定方法， 其特征在于， 通过该测定 方法建立扶芳参芪口服液HPLC指纹图谱， 共生 成10个共有特征峰， 从左至右依次编号， 1、 2、 5、 7号特征峰分别为人参皂苷Rg1、 Re、 Rb1和黄芪甲苷。 10.一种如权利要求1 ‑9任一项所述的扶芳参芪口服液多组分含量测定方法测得的扶 芳参芪口服液HPLC指纹图谱。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115236241 A 2一种扶芳参芪口服液多组分含量测定方 法 技术领域 [0001]本发明涉及分析检测技术领域， 具体涉及 一种扶芳参芪口服液多组分含量测定方 法。 背景技术 [0002]扶芳参芪口服液是广西中医药大学的名老中医黄英儒教授献方， 由广西中医药大 学制药厂独家研发生产的OTC中成药， 连续3版 《中 国药典》 收录品种， 具有益气补血， 健脾养 心等功效， 临床上用于治疗气血不 足， 心脾两虚引起的神疲乏力， 少言懒 语， 头昏眼花， 津伤 口渴及失眠等症。 该制剂为黄芪、 扶芳藤和人参三味药材制备而成的复方制剂 。 目前扶芳参 芪口服液 的质量控制方法 除了原标准对人参和扶芳藤的薄层鉴别及运用薄层色谱扫描法 对黄芪甲苷成分 的含量测定外， 文献报道大多是通过HPLC ‑ELSD法对该制剂中皂苷类成分 的含量测定， 对制剂中黄芪、 扶芳藤中其它成分的研究和报道较少。 复方制剂成分复杂， 仅 通过对制剂中皂苷类成分的测定来控制其制剂质量的方法未达到制剂质量控制的目的。 扶 芳参芪口服液毒副作用小， 安全性高。 产品产销30年来， 因生产工艺成熟， 质量稳定， 疗效确 切， 不良反应极少而被临床广泛应用， 需要更加全面控制扶芳 参芪口服液的质量。 发明内容 [0003]本发明的目的在于提出一种扶芳参芪口服液多组分含量测定方法， 采用本发明测 定方法检测扶芳参芪口服液多组分含量， 并得到指纹图谱， 精密度、 准确性、 重复性良好， 24h内稳定， 各批样品中所含指标性成分的一致性较好， 提供了一种更加全面、 准确的检测 扶芳参芪口服液的新方法， 有利于稳定产品的质量， 确保临床用药安全性和有效性。 [0004]本发明的技 术方案是这样实现的： [0005]本发明提供一种扶芳参芪口服液多组分含量测定方法， 采用高效液相色谱测定扶 芳参芪口服液中人参皂苷Rg1、 人参皂苷Re、 人参皂苷Rb1、 黄芪甲苷的含量。 [0006]作为本发明的进一 步改进， 包括以下步骤： [0007]S1.对照品溶液 的制备： 分别取人参皂苷Rg1、 Re、 Rb1、 黄芪甲苷对照品适量， 精密 称定， 加甲醇溶解并定容至刻度的混合对照品溶 液； [0008]S2.供试品溶液的制备： 精密吸取装量差异项下的扶芳参芪口服液置于分液漏斗 中， 加入浓氨水， 然后精密量取水饱和正丁醇加入分液漏斗中， 振摇 萃取， 分取上层溶液， 加 入适量的甲醇使其完全溶解后， 并移至容量瓶中， 定容， 摇匀； 取适量该溶液于离心管中， 离 心， 取上层清液， 过 滤， 即得供试品溶液； [0009]S3.对照药材溶液的制备： 按扶芳参芪口服液处方工艺分别制备扶芳藤药材、 黄芪 药材及人参药材提取液， 取适量各药材提取液分别置于分液漏斗中， 按供试品溶液制备方 法同法制备， 得扶芳藤药 材、 黄芪药 材和人参药 材对照溶 液； [0010]S4.色谱条件： 色谱柱为岛津Shim ‑pack CLC‑ODS； 流动相乙腈为A相， 水为B相； 采 用梯度洗脱， 流速0.5 ‑1.5mL·min‑1； 柱温为30 ‑40℃； 漂移管温度为 70‑90℃； 空气气体 流量说　明　书 1/7 页 3 CN 115236241 A 3