(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210892815.X (22)申请日 2022.07.27 (71)申请人 康普药业股份有限公司 地址 415900 湖南省常德市汉 寿县高新产 业园康普大道8号 (72)发明人 曾文洁　陆才洋　贺莲　张静　 刘娟　杨世平　刘爱霞　 (74)专利代理 机构 北京风雅颂专利代理有限公 司 11403 专利代理师 曾志鹏 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/32(2006.01) G01N 30/34(2006.01) G01N 30/36(2006.01)G01N 30/54(2006.01) (54)发明名称 一种托拉塞米中间甲苯胺的检测方法 (57)摘要 本发明属于化学物质检测技术领域， 具体是 涉及一种托拉塞米中间甲苯胺的检测方法， 步骤 为， 将待检品和间甲苯胺对照品分别进行高效液 相色谱检测， 色谱条件为， 检测波长2 34±2nm， 柱 温25‑35℃， 流速1.0 ±0.2ml/min， 流动相为 0.05％‑0.5％体积浓度的三乙胺溶液： 甲醇＝ 55‑65:35‑45， 三乙胺溶液的pH值为4.5 ‑5.5， 本 发明提供的方法能够避免原料及制剂中可能存 在的杂质A对间甲苯胺的检测干扰， 同时通过对 方法的专属性、 准确度、 精密度、 检测限、 定量限、 线性范围、 耐用性等研究， 证明本发明提供的方 法适合于托拉塞米原料及制剂中间甲苯胺的检 测要求。 权利要求书1页 说明书10页 附图7页 CN 115219631 A 2022.10.21 CN 115219631 A 1.一种托拉塞米 中间甲苯胺的检测方法， 其特征是， 步骤为， 将待检品和间甲苯胺对照 品分别进行高效液相色谱检测， 色谱条件为， 检测 波长234±2nm， 柱温25 ‑35℃， 流速1.0 ± 0.2ml/min， 流动相为0.05％ ‑0.5％体积浓度的三乙胺溶液： 甲醇＝55 ‑65:35‑45， 三乙胺溶 液的pH值 为4.5‑5.5。 2.如权利要求1所述的托拉塞米中间甲苯胺的检测方法， 其特征是， 三乙胺溶液的体积 浓度为0.08％ ‑0.12％。 3.如权利要求2所述的托拉塞米中间甲苯胺的检测方法， 其特征是， 三乙胺溶液的体积 浓度为0.1％。 4.如权利要求1所述的托拉塞米 中间甲苯胺的检测方法， 其特征是， 调节三乙胺溶液pH 值的物质为磷酸。 5.如权利要求1或4所述的托拉塞米中间甲苯胺的检测方法， 其特征是， 三乙胺溶液的 pH值为5.0。 6.如权利要求1所述的托拉塞米中间甲苯胺的检测方法， 其特征是， 间甲苯胺对照品的 溶剂为流动相， 浓度为0.04 ‑1.2 μg/mL。 7.如权利要求6所述的托拉塞米中间甲苯胺的检测方法， 其特征是， 间甲苯胺对照品的 浓度为0.1 ‑1 μg/mL。 8.如权利要求1所述的托拉塞米中间甲苯胺的检测方法， 其特征是， 所述待检品含有托 拉塞米原料 药或托拉塞米制剂。 9.如权利要求8所述的托拉塞米中间甲苯胺的检测方法， 其特征是， 所述待检品的溶剂 为流动相， 托拉塞米的浓度为0.1 ‑2mg/ml。 10.如权利要求1所述的托拉塞米 中间甲苯胺的检测方法， 其特征是， 进样体积为5 ‑20 μ l。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115219631 A 2一种托拉塞米中间甲苯胺的检测方 法 技术领域 [0001]本发明属于化学物质检测技术领域， 具体是涉及 一种托拉塞米中间甲苯胺的检测 方法。 背景技术 [0002]托拉塞米是一种吡啶 ‑磺酰脲类袢利尿剂， 其化学名称为1－异丙基－3－[(4 –间 甲苯氨基－3－吡啶基)磺酰基]脲， 分子式： C16H20N4O3S， 分子量 为： 348.43， 结构式为： [0003] [0004]托拉塞米作为新一代高效髓袢利尿剂， 与其他利尿剂相比， 有起效迅速， 作用持 久， 量效关系稳定， 适应症广泛， 耐受性 好等特点。 [0005]在托拉塞米原料药的合成过程中， 第四步反应中使用了间甲苯胺， 未转化的间甲 苯胺可进一 步转移存在于托拉塞米原料 药及终产品托拉塞米制剂中。 [0006]间甲苯胺是苯胺类警示结构杂质， 属于ICH  M7(R1)( 《评估和控制药物中DNA反应 性(致突变)杂质以限制潜在的致癌风险》 )指南中提及的物质， 托拉塞米日最大剂量为 100mg， 临床使用不得超过一周， 根据 《 ICH指导原则M7评估和控制药物中DNA反应性(致突 变)杂质以限制潜在致癌风险》 中用药疗程小于1月， 日摄取量为120 μg/天计算， 间甲苯胺限 值为0.12％。 针对这种潜在毒性杂质开发灵敏、 高效、 专属性强的分析方法， 严格控制其含 量是药物质量控制的关键一环。 [0007]托拉塞米产 品中起始原料残留量分析方法的研究， 曹晓燕等， 药物研究， 2008年9 月第5卷第26期， 公开了原料药托拉塞米中起始原料4 ‑羟基吡啶与间甲苯胺的残留量的分 析方法， 采用Agilent  C18柱， 以0.02mol/L磷酸二氢钾溶液 ‑甲醇(3∶2)为流动相， 检测波长 240nm， 流速为1.5ml/min， 柱温为室温。 结果:两种物质4 ‑羟基吡啶浓度为0.014 ‑1.244 μg/ ml， 间甲苯胺浓度为0.081 ‑1.317μg/ml的溶液的峰面积与浓度成线性关系， 相关系数r≥ 0.99； 定量限和检测限试验中， 信噪比符合规定， 能够达到定量检测及检出的要求。 各浓度 下的4‑羟基吡啶、 间甲苯胺平均回收率均在90％～110％范围内， 且9个回收率的RSD均小于 5.0％。 但是上述检测方法中， 其他杂质对间甲苯胺的检测形成了较为严重的干扰， 导致其 结果准确性不高。 发明内容 [0008]本发明要解决的技术问题是提供一种托拉塞米中间甲苯胺的检测方法， 抗干扰能 力强。 [0009]本发明的内容为一种托拉塞米中间甲苯胺的检测方法， 步骤为， 将待检品和间甲 苯胺对照品分别进行高效液相色谱检测， 色谱 条件为， 检测波长234 ±2nm， 柱温25 ‑35℃， 流说　明　书 1/10 页 3 CN 115219631 A 3