(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210852482.8 (22)申请日 2022.07.20 (71)申请人 北京市农林科 学院 地址 100097 北京市海淀区曙光 花园中路9 号 (72)发明人 李安　靳欣欣　赵杰　潘立刚　 杨旭升　 (74)专利代理 机构 北京智为时代知识产权代理 事务所(普通 合伙) 11498 专利代理师 王加岭　杨静 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/08(2006.01) G01N 30/72(2006.01) (54)发明名称 一种定性定量检测芝麻油特殊成分芝麻素 的方法 (57)摘要 本发明提供了一种定性定量检测芝麻油特 殊成分芝麻素的方法， 该方法采用相互饱和的乙 腈/正己烷 混合溶剂提取芝麻油， 之后利用GCB吸 附剂净化后， 再利用GC ‑MS进行定性定量检测。 本 发明的方法基于液液萃取 ‑吸附剂净化 ‑气质联 用分析的芝麻油特殊成分芝麻素检测方法， 与现 有方法相比， 操作简便快速、 测定灵敏度和准确 度高， 并解决了现有气相色谱质谱法检测前处理 过程的提取净化难题， 在芝麻素分析领域具有较 好的实际应用价 值。 权利要求书1页 说明书6页 附图5页 CN 115144504 A 2022.10.04 CN 115144504 A 1.一种定性定量检测 芝麻油特殊成分芝麻素的方法， 其特征在于， 采用相 互饱和的乙 腈/正己烷混合溶剂提取芝麻油， 之后利用石墨化碳黑吸附剂净化后， 再利用GC ‑MS进行定 性定量检测； 所述相互饱和的乙腈/正己烷混合溶剂为正己烷饱和的乙腈与乙腈饱和的正己烷按体 积比为3:1进行混合， 芝麻油与乙腈/正己烷混合溶剂按单位mg  : mL为10~15: 1的比例添 加； 石墨化碳黑吸附剂净化的操作为： 将采用乙腈/正己烷混合溶剂与芝麻油提取后的乙 腈层， 加入石墨化碳黑进行吸附， 石墨化碳黑的加入量按芝麻油： 石墨化碳黑的单位为mg： mg 为50： 60的比例进行。 2.根据权利要求1所述的方法， 其特征在于， GC ‑MS的检测条件为： 进样口温度为： 280 ℃， 色谱柱： 5%苯基 ‑甲基聚硅氧烷的非极性苯基芳基聚合物色谱柱； 色谱柱升温程序为： 60 ℃保持1min， 30℃／min升温至210℃， 再以10℃／min升温至300℃保持5min； 载气： 氦气； 流 速： 1mL/min； 质谱接口温度： 280℃； EI离子源温度： 230℃； 扫描模式： 选择离子扫描， 定性离 子： 354， 149， 13 5； 定量离 子149。 3.根据权利要求1所述的方法， 其特 征在于， 其包括以下步骤： （1） 正己烷饱和的乙腈和乙腈饱和的正己烷混合液加入待测的芝麻油后， 涡旋混合后 萃取， 静置后分层； （2） 取下层乙腈层溶液， 并加入GCB， 涡旋离心， 取上清液过0.22  μm滤膜， 并利用丙酮稀 释后进样； （3） 将步骤 （2） 得到的样品进行GC ‑MS检测， 通过保留时间和特征离子： m/z  354， m/z  149， m/z 135进行定性分析， 并提取 特征离子m/z 149的气相色谱图进行定量分析； （4） 将芝麻素标准品用丙酮制备成不同浓度的标准品， 进行步骤 （3） 的检测， 之后绘制 标准曲线； （5） 根据待测样品特征离子的响应值与芝麻素标准品浓度建立的标准曲线， 计算被测 芝麻油样品中芝麻 素的含量。 4.根据权利要求3所述的方法， 其特征在于， 步骤 （1） 中， 所述正己烷饱和的乙腈和乙腈 饱和的正己烷混合液中其体积比为3:1。 5.根据权利要求3所述的方法， 其特征在于， 芝麻油与乙腈/正己烷混合溶剂按单位mg:   mL为10~15: 1的比例添加。 6.根据权利要求3所述的方法， 其特征在于， 步骤 （2） 中， GCB的加入量按芝麻油： GCB的 单位为mg： mg 为50： 60的比例进行， 丙酮稀释按稀释20倍进行。 7.根据权利要求3所述的方法， 其特征在于， 步骤 （3） 中所述的GC ‑MS检测条件为： 进样 口温度为： 280℃， 色谱柱：  5%苯基‑甲基聚硅氧烷的非极性苯基芳基聚合物色谱柱 （30m × 0.25mm， 0.25 μm） ； 色谱柱升温程序为： 60℃保持1min， 30℃ ／ min升温至210℃， 再以10℃ ／ min 升温至300℃保持5min； 载气： 氦气； 流速： 1mL/min； 质谱接口温度： 280℃； EI离子源温度： 230℃； 扫描模式： 选择离 子扫描， 定性离 子： 354， 149， 13 5； 定量离 子149。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115144504 A 2一种定性定量 检测芝麻油特殊成分芝麻素的方 法 技术领域 [0001]本发明属于色谱分析检测技术领域， 具体涉及一种定性定量检测芝麻油特殊成分 芝麻素的方法。 背景技术 [0002]芝麻素是芝麻油中典型的木脂素类化合物， 且是芝麻油的特有成分。 芝麻素不仅 是提高芝麻油贮藏稳定性的抗氧化活性成分， 也是鉴别芝麻油真伪的特征化合物。 目前对 芝麻素的检测方法主要有分光光度法、 薄层色谱法 （TLC） 和高效液相色谱法 （HPLC） 。 分光光 度法的原理是基于芝麻素在235nm和287nm处的紫外区具有 特征吸收， 利用其吸收的强弱来 确定芝麻油中木脂素含量的高低， 此法虽然简 便快速， 但受其他木脂素成分干扰、 准确性较 低， 一般适用于木脂素总量的测定。 TLC法主要用于芝麻油木脂素成分的分离和鉴定， 然而 要实现芝麻素的准确定量测定需要复杂繁琐的分离和制备过程。 HPLC法是目前定量分析 芝 麻油中芝麻素等木脂素类化合物的主要方法， 通常是基于溶剂萃取、 高效液相色谱分离结 合紫外检测器测定的分析原理， HPLC法具有定量准确、 精密度高等优点， 但同时也存在易受 甘油三酯成分、 流动相不稳定等因素 的干扰， 且在操作简便性和灵敏度方面不如气相色谱 质谱法。 气相色谱法具有灵敏度高、 仪器操作简便的优点， 缺点是对提取净化程度要求较 高， 对于沸点较高难以气化的样品响应差， 影响准确性。 由于甘油三酯不易气化， 因此含有 甘油三酯的样品不能直接进气相色谱， 因此需去除甘油三酯的干扰，  目前尚未有针对GC ‑ MS法检测芝麻油中芝麻 素如何去除甘油三酯成分的报道。 发明内容 [0003]本发明的目的是克服传统测定方法的不足， 解决了前处理过程中， 油 脂的干扰问 题， 并提出一种精确的芝麻油特殊成分芝麻 素定性定量检测方法。 [0004]为实现上述目的， 本发明采用以下的技 术方案为： 一种定性定量检测芝麻油特殊成分芝麻素的方法， 采用相互饱和的乙腈/正己烷 混合溶剂提取芝麻油， 之后利用GCB吸附剂净化后， 再利用GC ‑MS进行定性定量检测。 [0005]如上所述的方法， 优选地， 所述相互饱和的乙腈/正己烷混合溶剂为正己烷饱和的 乙腈与乙腈饱和的正己烷按体积比为3:1进 行混合， 芝麻油与乙腈/正己烷混合溶剂按 单位 mg : mL为10~15： 1的比例添加。 [0006]进一步地， 优选麻油与乙腈/正己烷混合溶剂按单位mg  : mL为12.5:1的比例添 加。 [0007]如上所述的方法， 优选地， GCB吸附剂净化的操作为： 将采用乙腈/正己烷混合溶剂 与芝麻油提取后的乙腈层， 取1mL乙腈层加入GCB进行吸附， GCB的加入量按芝麻油： GCB的单 位为mg： mg 为50： 60的比例进行。 [0008]如上所述的方法， 优选地， GC ‑MS的检测条件为： 进样口温度为： 280℃， 色谱柱： 5% 苯基‑甲基聚硅氧烷的非极性苯基芳基聚合物色谱柱 （30m ×0.25mm， 0.25 μm） ； 色谱柱升温说　明　书 1/6 页 3 CN 115144504 A 3