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(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210702104.1 (22)申请日 2022.06.21 (83)生物保 藏信息 CCTCC NO:M202 2288 2022.03.18 CCTCC NO:M202 2286 2022.03.18 (71)申请人 湖南省蔬菜研究所 地址 410000 湖南省长 沙市芙蓉区马坡岭 农科院内 (72)发明人 李鑫 陶禹 陈杰 龚正 姜宁  陈芳 谭放军 周池  (74)专利代理 机构 长沙和雅知识产权代理事务 所(普通合伙) 43238 专利代理师 林传贵 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01)C12R 1/01(2006.01) C12R 1/025(2006.01) (54)发明名称 提高无色杆菌或肠杆菌的菌体丰度的培养 基及其发酵 方法 (57)摘要 本发明涉及微生物 技术领域, 本发 明公开一 种提高无色杆菌丰度的发酵方法: 以0.4 ‑0.5% 酵母粉、 0.5 ‑1.5%豆粕, 0.5 ‑1.5%二氢钾, 其余 为去离子 水的培养基为基础, 调节pH为8 ‑8.5, 装 瓶量为10 ‑20%, 温度26 ‑28℃、 转速160 ‑220rpm 摇床培养。 还公开了一种提供肠杆菌丰度的发酵 方法: 以0.4 ‑0.5%酵母粉、 0.5 ‑1.5%豆粕、 0.5 ‑ 1.5%二氢钾, 其余为去离子 水的培养基为基础, 调节pH为8 ‑8.5, 装瓶量为10 ‑20%, 温度26 ‑28 ℃、 转速160 ‑220rpm摇床培养。 能实现快速、 大量 无色杆菌或肠杆菌的扩大培养, 为无色杆菌或肠 杆菌的工业应用提供基础。 权利要求书1页 说明书9页 序列表2页 CN 115141769 A 2022.10.04 CN 115141769 A 1.一种提高无色杆菌菌体丰度的培养基, 其特征在于, 所述培养基包括以下成分: 0.4 ‑ 0.5%酵母 粉、 0.5‑1.5%豆粕, 0.5 ‑1.5%二氢钾, 其 余为去离子水。 2.根据权利要求1所述的培养基配, 其特征在于, 所述培养基包括以下成分: 0.4%酵母 粉、 1.0%豆粕, 1.5%二氢钾, 其 余为去离子水。 3.根据权利要求1或2所述的培养基配, 其特征在于, 所述无色杆菌为无色杆菌 (Achromobacter  insuavis)SL8, 保藏 号: CCTCC M 2022286。 4.一种提高无色杆菌丰度的发酵方法, 其特征在于, 所述方法为: 将无色杆菌的菌液接 种到权利要求1 ‑3任一所述的培养基, 调节培养基的pH为8 ‑10, 装瓶量为20 ‑40%, 温度26 ‑ 28℃、 转速16 0‑220rpm摇床培 养。 5.根据权利要求4所述的发酵方法, 其特征在于, 所述培养基的pH为9, 装瓶量为30%, 温度27℃、 转速180rpm。 6.一种提高肠杆菌菌体丰度的培养基, 其特征在于, 所述培养基包括以下成分: 0.4 ‑ 0.6%酵母 粉、 1.0‑1.5%蛋白胨, 1.0 ‑1.5%磷酸氢二钾, 其 余为去离子水。 7.根据权利要求6所述的培养基, 其特征在于, 所述培养基包括以下成分: 0.6%酵母 粉、 1.5%蛋白胨, 1.5%磷酸氢二钾, 其 余为去离子水。 8.根据权利要求6或7所述的培养基, 其特征在于, 所述肠 杆菌为肠 杆菌(Enterobacter   cancerogenus)SL12, 保藏 号: CCTCC M 2022288。 9.一种提高肠杆菌丰度的发酵方法, 其特征在于, 所述方法为: 将肠杆菌的菌液接种到 权利要求6 ‑8任一所述的培养基, 调节培养基的pH为8 ‑8.5, 装瓶量为10 ‑20%, 温度26 ‑28 ℃、 转速16 0‑220rpm摇床培 养。 10.根据权利要求9所述的发酵方法, 其特征在于, 所述培养基的pH为8.2, 装瓶量为 15%, 温度26℃、 转速180rpm。权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 115141769 A 2提高无色杆菌或肠杆菌的菌 体丰度的培养基 及其发酵 方法 技术领域 [0001]本发明涉及 微生物技术领域, 具体涉及提高无色杆菌或肠杆菌菌体丰度的培养基 及其发 酵方法。 背景技术 [0002]中国发明专利(CN  109266575  A)公开了一种耐受镉的肠杆菌(Enterobacter   sp.)FM‑1, 采用LB液体培养基扩大培养, LB液体培养基配制为每升培养基含牛肉膏5g、 蛋 白胨10g、  NaCl 5g, 121℃高压蒸汽灭菌20mi n, 自然pH 。 [0003]中国发明专利(CN  105062926  A)公开了一种用于重金属镉污染治理的无色杆菌   (Achromobacter  sp.)H380及其应用, 将H380菌株接种到新鲜的0.5倍LB培养基中活化过   夜, 然后以1%(v/v)的接种量接种到新鲜的0.5倍LB培养基中, 28℃恒温摇床中培养至 OD600 =0.5。 [0004]在肠杆菌和无色杆等功能微生物投入实际应用中, 对菌 的需求量巨大, 而普通的 LB液 体培养基难以满足快速扩大培 养肠杆菌和无色杆菌的需求。 发明内容 [0005]本发明为了解决在肠杆菌或者无色杆等功能微生物投入实际应用中, 难以快速扩 大培养 的技术问题, 本发明提供以下技 术方案: [0006]一种提高无色杆菌菌体丰度的培养基, 所述培养基包括以下成分: 0.4 ‑0.5%酵母 粉、 0.5‑  1.5%豆粕, 0.5 ‑1.5%二氢钾, 其 余为去离子水。 [0007]优选地, 所述培养基包括以下成分: 0.4%酵母粉、 1.0%豆粕, 1.5%二氢钾, 其余 为去离 子水。 [0008]优选地, 所述无色杆菌为无色杆菌(Achromobacter  insuavis)SL8, 保藏号: CCTCC   M 2022286。 [0009]本发明还提供一种提高无色杆菌丰度的发酵方法, 所述方法为: 将无色杆菌 的菌 液接种 到权利要求1 ‑3任一所述的培养基, 调节培养基的pH为8 ‑10, 装瓶量为20 ‑40%, 温 度26‑  28℃、 转速16 0‑220rpm摇床培 养。 [0010]优选地, 在无色杆菌丰度的发酵方法所述培养基的pH为9, 装瓶量为30%, 温度27 ℃、 转速180rpm。 [0011]一种提高肠杆菌菌体丰度的培养基, 所述培养基包括以下成分: 0.4 ‑0.6%酵母 粉、 1.0‑1.5% 蛋白胨, 1.0 ‑1.5%磷酸氢二钾, 其 余为去离子水。 [0012]优选地, 所述培养基包括以下成分: 0.6%酵母粉、 1.5%蛋白胨, 1.5%磷酸氢二 钾, 其余 为去离子水 [0013]优选地, 所述肠杆菌为肠杆菌(Enter obacter cancerogenus)SL 12, 保藏号: CCTCC   M 2022288。 [0014]一种提高肠杆菌丰度的发酵方法, 所述方法为: 将肠杆菌的菌液接种到以0.4 ‑说 明 书 1/9 页 3 CN 115141769 A 3

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