(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210780368.9 (22)申请日 2022.07.04 (71)申请人 福建益昕葆生物制药有限公司 地址 363000 福建省漳州市芗城区兴亭路9 号 申请人 江西傲新生物科技有限公司 　 福建傲农生物科技 集团股份有限公 司 (72)发明人 何英霞　覃智斌　傅莲玉　蔡冬　 梁世仁　吴有林　 (74)专利代理 机构 北京超凡宏宇专利代理事务 所(特殊普通 合伙) 11463 专利代理师 宋家会 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01)C07K 16/02(2006.01) C12N 9/10(2006.01) A23K 10/18(2016.01) A23K 20/158(2016.01) A23K 40/10(2016.01) A23K 40/30(2016.01) A23K 50/30(2016.01) A23K 10/20(2016.01) A23K 20/163(2016.01) A23K 10/30(2016.01) A23K 20/189(2016.01) A23K 20/24(2016.01) A23K 50/60(2016.01) C12R 1/07(2006.01) (54)发明名称 抗腹泻卵黄抗体包被乳酸芽孢杆菌制剂及 制备方法和应用 (57)摘要 本发明公开了抗腹泻卵黄抗体包被乳酸芽 孢杆菌制剂及制备方法和应用， 涉及饲料技术领 域。 该制备方法包括： 将乳酸芽孢杆菌加入至含 有流行性腹泻病毒卵黄抗体的溶液中， 搅拌静置 后分离第一次包被物； 将第一次包被物与植物油 混合， 搅拌静置后分离第二次包被物； 将第二次 包被物与胶液混合， 搅拌静置固化， 分离后干燥。 由于卵黄抗体对乳酸芽孢杆菌进行包被， 提升了 乳酸芽孢杆菌在胃酸中的存活率， 更有利于乳酸 芽孢杆菌在肠道内定植， 抑制有害菌群， 维持正 常的微生态平衡。 此外， 该抗腹泻卵黄抗体包被 乳酸芽孢杆菌制剂性能稳定， 适于减抗和禁抗养 殖， 可以改善日粮的适口性， 增强仔猪机体免疫， 提高了采食量， 且提高了营养物质的消化利用 率。 权利要求书2页 说明书12页 CN 115074288 A 2022.09.20 CN 115074288 A 1.一种抗腹泻卵黄抗体包被乳酸芽孢杆菌制剂的制备 方法， 其特 征在于， 其包括： 将乳酸芽孢杆菌加入至含有流行性腹泻病 毒卵黄抗体的溶液中， 搅拌静置后分离第 一 次包被物； 将所述第一次包被物与植物油混合， 搅拌 静置后分离第二次包被物； 将所述第二次包被物与胶液混合， 搅拌 静置固化， 分离后干燥。 2.根据权利要求1所述的抗腹泻卵黄抗体包被乳酸芽孢杆菌制剂的制备方法， 其特征 在于， 所述含有流行性腹泻病毒卵黄抗体的溶液是将流行性腹泻病毒卵黄抗体加入至脱脂 奶粉水溶液， 再加入转谷氨酰胺酶， 搅拌均匀后制得的； 优选地， 所述流行性腹泻病毒卵黄抗体与脱脂奶粉水溶液的质量体积比为(5 ‑6)g： (18‑22)ml； 优选地， 所述 流行性腹泻病毒卵黄抗体与所述 转谷氨酰胺酶的质量比为10 0:1‑2。 3.根据权利要求1所述的抗腹泻卵黄抗体包被乳酸芽孢杆菌制剂的制备方法， 其特征 在于， 所述 流行性腹泻病毒卵黄抗体与所述乳酸芽孢杆菌的质量比为(5 ‑6)： (2‑3)； 优选地， 所述乳酸芽孢杆菌的菌含量 为1.8×108‑2.2×108cfu/g； 优选地， 所述乳酸芽孢杆菌为猪源乳酸芽孢杆菌或鸡源乳酸芽孢杆菌； 优选地， 所述猪源乳酸芽孢杆菌为猪源乳酸芽孢杆菌Q ‑21； 优选地， 在将所述乳酸芽孢杆菌加入至所述含有流行性腹泻病毒卵黄抗体的溶液后， 还包括向混合液中加入CaCl2； 优选地， 所述 流行性腹泻病毒卵黄抗体与所述CaCl2的质量比为10 0:2‑5。 4.根据权利要求1所述的抗腹泻卵黄抗体包被乳酸芽孢杆菌制剂的制备方法， 其特征 在于， 所述 流行性腹泻病毒卵黄抗体的制备 方法包括： 向产蛋鸡注射流行性腹泻病毒油乳剂免疫抗原进行多次免疫， 检测抗体效价， 当抗体 效价>128时开始收集鸡蛋， 无菌收集卵黄， 加入普鲁兰多糖和原花青素， 搅拌均匀， 即得所 述流行性腹泻病毒卵黄抗体； 所述卵黄、 所述普鲁兰多糖和所述原花青素的质量比为10 0‑120： 8‑10： 0.3‑0.5； 优选地， 多次免疫包括： 向产蛋鸡的鸡胸肌注射流行性腹泻病毒油乳剂免疫抗原0.4 ‑ 0.6mL作为第一次免疫； 于第2周 和第4周分别向所述产蛋鸡的鸡胸肌注射所述流行性腹泻 病毒油乳剂免疫抗原0.8 ‑1.2mL进行第二次和第三次免疫， 于第6周向所述产蛋鸡的鸡胸 肌、 腿肌多点注射所述 流行性腹泻病毒油乳剂免疫抗原1.6 ‑2.4mL进行第四 次免疫； 优选地， 所述流行性腹泻病 毒油乳剂免疫抗原是水相和油相的混合液， 其中， 所述水相 包括灭活流行性腹泻病毒的稀释液和吐温的混合液， 所述吐温占所述混合液的质量百分数 为3‑5％； 所述油相按质量百分数计包括92 ‑94％白油， 5 ‑7％司班85和1 ‑2％硬脂酸铝； 将所 述水相和所述油相按照1:1.4 ‑1.6的比例混合搅拌； 优选地， 所述灭活流行性腹泻病 毒的稀释液的制备方法包括： 选择2 ‑3日龄感染发病的 产房仔猪， 无菌采集小肠， 剪碎充分研磨后， 使用无菌生理盐水进行稀释， 7000 ‑9000r/min 离心10‑20分钟， 收集上清液， 加入0.1 ‑0.2％甲醛于 35‑40℃恒温振荡24 ‑28h。 5.根据权利要求1所述的抗腹泻卵黄抗体包被乳酸芽孢杆菌制剂的制备方法， 其特征 在于， 在制备所述第一次包被物时， 于150 ‑170r/min的搅拌速度下搅拌3 ‑5min， 接着静置 30‑50min， 清洗过 滤；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115074288 A 2优选地， 在制备所述第二次包被物时， 于150 ‑170r/min的搅拌速度下搅拌10 ‑20min， 接 着静置20 ‑30min， 于3 ‑5℃的条件下4000 ‑6000r/min的离心速度下离心10 ‑20min， 分层并去 除剩余植物油， 获得 所述第二次包被物。 6.根据权利要求1 ‑5任一项所述的抗腹泻卵黄抗体包被乳酸芽孢杆菌制剂的制备方 法， 其特征在于， 所述植物油包括辣木籽油、 猕猴桃籽油、 酪梨油、 紫苏籽油 和美藤果油中的 一种或几种。 7.根据权利要求1 ‑5任一项所述的抗腹泻卵黄抗体包被乳酸芽孢杆菌制剂的制备方 法， 其特征在于， 所述胶液包括海藻酸钠、 亚麻籽胶和羧甲基罗望 子胶中的一种或几种； 优选地， 所述胶液包括海藻酸钠、 亚麻籽胶和羧甲基罗望 子胶； 优选地， 所述海藻酸钠、 所述亚麻籽胶和所述羧甲基罗望子胶的重量份数比为(8 ‑10)： (2‑3)： (2‑3)。 8.根据权利要求1 ‑5任一项所述的抗腹泻卵黄抗体包被乳酸芽孢杆菌制剂的制备方 法， 其特征在于， 所述干燥 为喷雾干燥； 优选地， 所述喷雾干燥的干燥参数包括： 进口温度为120 ‑150℃、 通风量为40 ‑60hz、 进 料速度600‑700ml/h、 出口温度5 0‑60℃。 9.一种抗腹泻卵黄抗体包被乳酸芽孢杆菌制 剂， 其特征在于， 其采用如权利要求1 ‑8任 一项所述的抗腹泻卵黄抗体包被乳酸芽孢杆菌制剂的制备 方法制备而得； 优选地， 所述 抗腹泻卵黄抗体包被乳酸芽孢杆菌制剂为颗粒状， 其粒径为6 ‑600 μm。 10.如权利要求9所述的抗腹泻卵黄抗体包被乳酸芽孢杆菌制剂在制备饲料添加剂或 饲料中的应用。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115074288 A 3