(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210875739.1 (22)申请日 2022.07.25 (71)申请人 福建华闽晟业 生物科技有限公司 地址 350003 福建省福州市 鼓楼区五四路 159号世界金 龙大厦10层C2单 元 (72)发明人 刘波　陈燕萍　刘平山　王志明　 王阶平　张海峰　吕祥熙　车建美　 郑雪芳　刘欣　 (74)专利代理 机构 北京万景律师事务所 1 1993 专利代理师 张文祎 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12R 1/25(2006.01) (54)发明名称 巨菌草汁作为植物乳杆菌发酵培养基的应 用 (57)摘要 本发明提供了巨菌草汁作为植物乳杆菌发 酵培养基的应用； 所述应用的方法步骤如下： S1、 生产用液体菌种的制备： 以植物乳杆菌FJAT ‑ 13737为菌种， 以MRS液体培养基为菌种用培养 基， 制备生产用液体菌种； S2、 植物乳杆菌制剂的 制备： 以巨菌草汁为液体培养基， 灭菌后， 接种S1 制得的液体菌种， 在35 ‑39℃条件下静置培养28 ‑ 32h， 制得植物乳杆菌 液体发酵产物。 该应用方法 以工业上生产木板的废弃物巨菌草汁为培养基， 能够使得培养的植物乳杆菌活菌数≧(4.10 ± 0.42)×109cfu/ml； 本发明应用方法简单、 成本 低， 发酵后得到的植物乳杆菌含量显著高于常用 的MRS培养基发酵效果。 权利要求书1页 说明书5页 CN 115404181 A 2022.11.29 CN 115404181 A 1.巨菌草 汁作为植物乳杆菌发酵培 养基的应用。 2.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于： 所述植物乳杆菌是植物乳杆菌FJAT ‑ 13737。 3.根据权利要求1所述的应用， 其特 征在于： 所述应用的方法步骤如下： S1、 生产用液体菌种的制备： 以植物乳杆菌FJAT ‑13737为菌种， 以MRS液体培养基为菌种用培养基， 制备生产用液体 菌种； S2、 植物乳杆菌制剂的制备： 以巨菌草汁为液体培养基， 灭菌后， 接种S1制得的液体菌种， 在35 ‑39℃条件下静置培 养28‑32h， 制得植物乳杆菌液体发酵产物。 4.根据权利要求3所述的应用， 其特征在于： 步骤S1中， 所述生产用液体菌种的制备的 具体步骤如下： S11、 菌种的活化： 配置MRS固体培养基， 121℃灭菌20min， 冷却至45℃倒于灭菌平板中， 备用； 取 ‑70℃保 存的植物乳杆菌FJAT ‑13737菌株于MRS培养基平板上划 线培养， 37℃恒温培养2天； 直到培 养基平板中出现植物乳杆菌FJAT ‑13737菌落； S12、 制备生产用液体菌种 配置MRS液体培养基， 挑取步骤S11中菌落接种于MRS液体培养基中， 在37℃条件下静置 培养30h， 即得生产用液体菌种。 5.根据权利 要求4所述的应用， 其特征在于： 步骤S11中， 所述MRS固体培养基中包括： 蛋 白胨10.0g， 牛肉膏5.0g， 酵母膏4.0g， 柠檬酸三铵2.0g， 葡萄糖(C6H12O6·H2O)20.0g， 吐温80   1.0mL， 乙酸钠(CH3COONa·3H2O)5.0g， 磷酸氢二钾(K2HPO4·3H2O)2.0g， 硫酸镁(MgSO4· 7H2O)0.58g， 硫酸锰(MnSO4·H2O)0.25g， 琼脂18g， 蒸馏水10 00mL， pH＝6.2 ‑6.6。 6.根据权利 要求4所述的应用， 其特征在于： 步骤S12中， 所述MRS液体培养基中包括： 蛋 白胨10.0g， 牛肉膏5.0g， 酵母膏4.0g， 柠檬酸三铵2.0g， 葡萄糖(C6H12O6·H2O)20.0g， 吐温80   1.0mL， 乙酸钠(CH3COONa·3H2O)5.0g， 磷酸氢二钾(K2HPO4·3H2O)2.0g， 硫酸镁(MgSO4· 7H2O)0.58g， 硫酸锰(MnSO4·H2O)0.25g， 蒸馏水10 00mL， pH＝6.2 ‑6.6。 7.根据权利要求3所述的应用， 其特征在于： 步骤S2中， 所述植物乳杆菌制剂的制备的 具体步骤如下： S21、 以新鲜巨菌草为材料， 采用榨汁机压榨后出汁液， 过滤废渣后得巨菌草汁； 过滤废 渣可以作为工业上生产木 板的主原料； S22、 以纯菌草 汁为液体培 养基， 调整pH值 为6.2， 121℃灭菌20mi n； S23、 向灭菌后的液体培养基中按接种量1％接种步骤S1中得到的生产用液体菌种， 在 37℃恒温下， 静置 培养30h， 即植物乳杆菌液体发酵产物。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115404181 A 2巨菌草汁作 为植物乳杆菌发酵培养基的应用 技术领域 [0001]本发明涉及细菌培养基技术领域， 尤其是涉及巨菌草汁作为植物乳杆菌发酵培养 基的应用。 背景技术 [0002]植物乳杆菌(Lactobacillus  plantarum)属于乳杆菌科乳杆菌属， 是一种同型发 酵乳酸菌， 革兰氏染色呈阳性， 不产芽孢， 且兼性厌 氧， 具有很强的发酵碳水化合物的能力， 较耐盐、 耐酸(曲冬梅等， 2008.植物乳杆菌及其在食品工业中的应用.中国食品添加剂,S1: 219‑222.)。 植物乳杆菌作为一种重要的益生菌， 具有改善食品风味、 增强免疫力(Hiroseet   al.,2006.Daily  intake of heat‑killed Lactobacillus  plantarum L‑137 augments   acquired  immunity  in healthy adults.J  Nutr,136(12):3069 ‑73.)、 调节肠道健康、 降 低胆固醇(胡梦坤等， 2008.植物乳杆菌LP1103的筛选及其降胆固醇作用机理的研 究.食品 科学,29(6):226 ‑229.)、 改善焦虑抑郁等功能， 在食品发酵、 工业发酵及医疗保健等领域都 有着广泛的应用。 获得高密度植物乳杆菌对其商业化生产具有重要作用， 培养基的成分优 化获得高密度细胞是最为经济、 有效的途径(金玉洁等， 2020.植物乳杆菌ZU018增殖培养基 的优化.食品工业科技,14:94 ‑99.)。 有鉴于此， 所示植物乳杆菌的生物培养具有重要的意 义； 目前， 植物乳杆菌的培养主要使用的是常用的MRS液体培养基。 但是， 该培养基培养的植 物乳杆菌只能达 到(8.61±1.74)×108cuf/mL左右， 且成本较高。 [0003]巨菌草是系多年生禾本科直立丛生型植物， 根系发达， 生长迅速， 已知其富含有机 酸、 多酚类、 蛋白质、 纤维素、 糖类等生物物质。 巨菌草适应能力强， 在我国各地区被广泛种 植。 目前巨菌草多用于饲料、 沼气发酵生产、 燃烧发电、 生物质乙醇制造等传统领域上。 [0004]目前， 还未见过利用巨菌草汁作为植物乳杆菌 的培养基 的报道， 对于巨菌草的高 附加值利用也具有重要意 义。 发明内容 [0005]本发明要解决的技术问题是提供一种巨菌草汁作为植物乳杆菌发酵培养基的应 用。 该应用方法以工业上生产木板的废弃物巨菌草汁为培养基， 能够使得培养的植物乳杆 菌活菌数≧(4.10 ±0.42)×109cfu/mL； 本发明应用方法简单、 成本低， 发酵后得到的植物 乳杆菌含量显著高于常用的MRS液体培 养基发酵效果。 [0006]为解决上述 技术问题， 本发明采用如下的技 术方案： [0007]巨菌草汁作为植物乳杆菌发酵培 养基的应用。 [0008]作为一种实施方式， 所述 植物乳杆菌是植物乳杆菌FJAT ‑13737。 [0009]作为一个优选的实施方式， 所述应用的方法步骤如下： [0010]S1、 生产用液体菌种的制备： [0011]以植物乳杆菌(Lact obacillus  plantarum)FJAT ‑13737为菌种， 以MRS液体培养基 为菌种用培 养基， 制备生产用液体菌种；说　明　书 1/5 页 3 CN 115404181 A 3