(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210844033.9 (22)申请日 2022.07.18 (71)申请人 山西农业大 学 地址 030031 山西省太原市小店区龙城大 街81号 (72)发明人 郭晓红　曹燕篆　乔昊　姬亚慧　 刘青　王岩　王畅　魏强利　 (74)专利代理 机构 北京路浩知识产权代理有限 公司 11002 专利代理师 黄爽 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 1/14(2006.01) C05F 15/00(2006.01) C05F 17/20(2020.01)C05F 17/80(2020.01) C12R 1/10(2006.01) C12R 1/11(2006.01) C12R 1/125(2006.01) C12R 1/645(2006.01) (54)发明名称 好氧堆肥用复合微生物菌剂及其制备方法 与应用 (57)摘要 本发明提供一种好氧堆肥用复合微生物菌 剂及其制备方法与应用。 所述复合微生物菌剂的 活性成分为枯草芽孢杆菌、 地衣芽孢杆菌、 巨大 芽孢杆菌和黄孢原毛平革菌。 本发 明提供的复合 微生物菌剂能提高好氧堆肥的分解速率与腐熟 程度、 降低堆肥产品的生物毒性、 增加堆肥产品 的养分保留、 提高了堆肥中重 金属Cu、 Zn、 Pb、 Cr、 Ni的钝化效率。 本发明提供的微生物菌剂效果显 著， 具有良好的重金属钝化作用， 可提高堆肥产 品的养分含量与安全性。 权利要求书1页 说明书6页 附图5页 CN 115261268 A 2022.11.01 CN 115261268 A 1.好氧堆肥用复合微生物菌剂， 其特征在于， 活性成分为枯草芽孢杆菌(Bacillus   subtilis)、 地衣芽孢杆菌(Bacillus  licheniformis)、 巨大芽孢杆菌(Bacillus   megaterium)和黄孢 原毛平革菌(Phaneroc haete chrysosporium)。 2.根据权利要求1所述的复合微生物菌剂， 其特征在于， 所述复合微生物菌剂中枯草芽 孢杆菌的菌含量为107‑109cfu/mL， 地衣芽孢杆菌的菌含量为107‑109cfu/mL， 巨大芽孢杆菌 的菌含量 为107‑109cfu/mL， 黄孢 原毛平革菌的菌含量 为105‑107cfu/mL。 3.根据权利要求1或2所述的复合微生物菌剂， 其特征在于， 所述枯草芽孢杆菌的保藏 号为BNCC109047， 所述地衣芽孢杆菌的保藏号为BNCC336463， 所述巨大芽孢杆菌的保藏号 为BNCC336464和所述黄孢 原毛平革菌的保藏 号为BNCC189286。 4.好氧堆肥用复合 微生物菌剂的制备 方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： 1)将枯草芽孢杆菌于营养琼脂固体培养基 中活化， 然后挑取菌落接种于营养琼脂液体 培养基中培 养， 得到枯 草芽孢杆菌 菌液； 2)将地衣芽孢杆菌、 巨大芽孢杆菌分别于含MnSO4的营养琼脂固体培养基中活化， 然后 挑取菌落接种于含MnSO4的营养琼脂液体培养基中活化， 然中培养， 分别得到地衣芽孢杆菌 菌液、 巨大芽孢杆菌 菌液； 3)将黄孢原毛平革菌于含MgSO4的综合PDA固体培养基中活化， 然后挑取菌落接种于含 MgSO4的综合PDA液体培 养基中培 养， 得到黄孢原毛平革菌 菌液； 4)将枯草芽孢杆菌菌液、 地衣芽孢杆菌菌液、 巨大芽孢杆菌菌液和黄孢原毛平革菌菌 液按比例混合， 得到复合微生物菌剂； 所述复合微生物菌剂中枯草芽孢杆菌的菌含量为 107‑109cfu/mL， 地衣芽孢杆菌的菌含量为107‑109cfu/mL， 巨大芽孢杆菌的菌含量为107‑ 109cfu/mL， 黄孢原毛平革菌的菌含量为105‑107cfu/mL， 且混合前， 所述枯草芽孢杆菌菌液、 地衣芽孢杆菌菌液、 巨大芽孢杆菌菌液、 黄孢原毛平革菌菌液中的活菌数不少于2.0 × 109cfu/mL。 5.根据权利要求4所述的方法， 其特征在于， 步骤1)中枯草芽孢杆菌的培养温度为30 ℃‑37℃， 步骤2)中地衣芽孢杆菌、 巨大芽孢杆菌的培养温度为30℃ ‑35℃， 步骤3)中黄孢原 毛平革菌的培 养温度为25℃ ‑‑30℃。 6.权利要求1 ‑3任一项所述复合 微生物菌剂的以下任一应用： 1)用于畜禽粪便堆肥； 2)用于重金属钝 化。 7.根据权利要求6所述的方法， 其特 征在于， 所述重金属包括镍、 铜、 铅、 镉、 锌。 8.畜禽粪便堆肥方法， 其特征在于， 所述方法包括： 将畜禽粪便、 作物秸秆混匀， 调节碳 氮比至25～30， 加水至含水量为55％ ‑65％， 然后将权利要求1 ‑3任一项所述复合微生物菌 剂按0.6mL/100g ‑1.0mL/100g接种于所述堆肥物料中， 在室温条件下好氧发酵35d ‑50d， 堆 肥期间进行翻堆处 理。 9.根据权利要求8所述的方法， 其特 征在于， 于堆肥第10d、 20d进行翻堆。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115261268 A 2好氧堆肥用复合微生物菌剂及其制备方 法与应用 技术领域 [0001]本发明属于有机肥料技术领域， 具体地说， 涉及一种好氧堆肥用复合微生物菌剂 及其制备 方法与应用。 背景技术 [0002]据统计， 我国畜禽粪便的年资源产量约40亿吨， 综合利用率不足75％。 大量的畜禽 粪便未被资源化利用， 不但造成了巨大 的资源浪费， 也严重污染了大气、 水体和土壤， 其中 重金属污染是土壤污染的主 要问题。 [0003]由于畜禽养殖中饲料成分中重金属元素的添加， 导致畜禽粪便中普遍存在重金属 超标现象。 堆肥过程中添加钝化剂可以提高重金属钝化效率， 降低重金属生物有效性。 微生 物钝化剂因其成本低、 安全性高、 钝 化效率高等优势常应用于堆肥中重金属钝 化。 [0004]目前将微生物用于治理畜禽粪便中的重金属污染， 对重金属钝化的效果并不理 想， 大多数微生物 钝化重金属的机理仍不明确。 为有效治理畜禽粪便的重金属污染问题， 有 必要筛选出更高效、 钝 化率更高的微 生物钝化剂。 发明内容 [0005]本发明的目的是提供一种好氧堆肥用复合 微生物菌剂及其制备 方法与应用。 [0006]为了实现本发明 目的， 第一方面， 本发明提供一种好氧堆肥用复合微生物菌剂， 活 性成分为枯草芽孢杆菌(Bacillus  subtilis)、 地衣芽孢杆菌(Bacillus  licheniformi s)、 巨大芽孢杆菌(Bacillus  megaterium)和黄孢原毛平革菌(Phanerochaete   chrysosporium)。 [0007]所述复合微生物 菌剂中枯草芽孢杆菌的菌含 量为107‑109cfu/mL， 地衣芽孢杆菌的 菌含量为107‑109cfu/mL， 巨大芽孢杆菌的菌含量为107‑109cfu/mL， 黄孢原毛平革菌的菌含 量为105‑107cfu/mL。 [0008]优选地， 所述 枯草芽孢杆菌的保藏 号为BNCC109047。 [0009]优选地， 所述 地衣芽孢杆菌的保藏 号为BNCC336463。 [0010]优选地， 所述巨大芽孢杆菌的保藏 号为BNCC336464。 [0011]优选地， 所述黄孢 原毛平革菌的保藏 号为BNCC189286。 [0012]第二方面， 本发明提供好氧堆肥用复合 微生物菌剂的制备 方法， 包括以下步骤： [0013]1)将枯草芽孢杆菌于营养琼脂固体培养基中活化， 然后 挑取菌落接种于营养琼脂 液体培养基(牛肉膏3.0g、 蛋白胨10.0g、 NaCl  5.0g、 蒸馏水 1.0L， pH 7.0， 121℃灭菌15min) 中培养， 得到枯 草芽孢杆菌 菌液； [0014]2)将地衣芽孢杆菌、 巨大芽孢杆菌分别于含MnS O4的营养琼脂固体培养基中活化， 然后挑取菌落接种于含MnSO4的营养琼脂液体培养基(牛肉膏3.0g、 蛋白胨10.0g、 NaCl   5.0g、 蒸馏水1.0L， MnSO4·H2O 5mg、 pH 7.0， 121℃灭菌15min)中活化， 然中培养， 分别得到 地衣芽孢杆菌 菌液、 巨大芽孢杆菌 菌液；说　明　书 1/6 页 3 CN 115261268 A 3