(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210976355.9 (22)申请日 2022.08.15 (71)申请人 中国农业科 学院麻类 研究所 地址 410000 湖南省长 沙市岳麓区咸 嘉湖 西路348号 (72)发明人 刘亮亮　肖爱平　段盛文　冷鹃　 廖丽萍　游宗毅　 (74)专利代理 机构 北京集佳知识产权代理有限 公司 11227 专利代理师 张雪娇 (51)Int.Cl. C12P 7/42(2006.01) C12N 1/20(2006.01) C07C 51/42(2006.01) C07C 51/47(2006.01)C07C 65/19(2006.01) C12R 1/07(2006.01) (54)发明名称 大麻二酚酸的提取方法 (57)摘要 本发明涉及生物 技术领域， 尤其涉及大麻二 酚酸的提取方法。 本发明提供了大麻二酚酸的提 取方法， 包括： 取工业大麻 灭菌后， 与保藏编号为 CGMCC:1.3604 的菌株混合， 发酵， 调节pH值为碱 性， 超声提取， 抽滤， 收集提取液， 经有机溶剂萃 取， 纯化， 获得所述大麻二酚酸。 本发明提供了大 麻二酚酸的提取方法， 弥补了现有技术的空缺， 并且目前大部分针对工业大麻的提取手段多为 基础的化学提取手段， 本发明采用微生物的方式 增加相关成分提取的方法选择。 通过本发明提供 的方法， 提取的大麻二 酚酸纯度较高。 权利要求书1页 说明书5页 附图3页 CN 115216496 A 2022.10.21 CN 115216496 A 1.大麻二酚酸的提取 方法， 其特 征在于， 包括： 取工业大麻灭菌后， 与保藏编号为CGMCC:1.3604的菌株混合， 发酵， 调节pH值为碱性， 超声提取， 抽滤， 收集 提取液， 经有机溶剂萃取， 纯化， 获得 所述大麻二酚酸。 2.如权利要求1所述的提取方法， 其特征在于， 所述混合中取所述菌株制备成菌液， 所 述菌株的培 养温度为37℃， 时间为72h， 所述菌液中活菌数为6 ×108CFU/mL。 3.如权利要求1或2所述的提取方法， 其特征在于， 所述发酵采用培养液， 所述工业大麻 与所述培 养液的料 液比为1:20kg/L。 4.如权利要求1至3任一项所述的提取方法， 其特征在于， 所述发酵的温度为37℃， 时间 为72h， 通 风量为0.3vvm。 5.如权利要求1至4任一项所述的提取方法， 其特征在于， 所述调节pH值为碱性中采用 的溶液为碱溶 液。 6.如权利 要求1至5任一项所述的提取方法， 其特征在于， 所述调 节pH值中所述pH值为9 ～12。 7.如权利 要求1至6任一项所述的提取方法， 其特征在于， 所述超声的功率为400w， 时间 为20～40mi n。 8.如权利要求7所述的提取方法， 其特征在于， 所述调节pH值为碱性后， 所述超声提取 前， 所述工业大麻与所述培养液、 所述菌液和所述碱溶液的总量的料液比为1:(35～ 45)kg/ L。 9.如权利要求1至8任一项所述的提取方法， 其特征在于， 所述纯化的方法为液相色谱； 所述液相色谱的条件为： 进样量 为1～5mL， 流速为2 ～5mL/mi n； 柱温为15～3 5℃。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115216496 A 2大麻二酚酸 的提取方 法 技术领域 [0001]本发明涉及生物技 术领域， 尤其涉及大 麻二酚酸的提取 方法。 背景技术 [0002]工业大麻因为其大麻素的药用功能得到了市场的喜爱， 许多针对大麻素的提取纯 化研究被广泛实施。 由于大麻二酚作为近些年热门的活性 成分， 其药效得到了确认， 因此大 部分提取纯化都围绕大麻二酚进行。 而大麻二酚酸是大麻二酚的一个衍生物， 大麻二酚酸 在许多条件下会脱除羧基而变成大麻二酚， 有很多研究利用这个脱除羧基的特性提高提取 物中的大麻二酚含量。 但是， 大麻二酚酸作为一种 亲水性大麻素， 其具有独特 的生物活性， 许多生物功能是大麻二酚酸无法达到的。 因此有必要对大麻二酚酸开展相应的提取纯化技 术研究， 并进 行系统深入的生物活性研究。 这有利于工业大麻在医药、 健康领域的健康和多 元化发展。 [0003]尽管大麻二酚酸与大麻二酚仅一个羧基基团的差异， 但是它们的溶解性、 物理化 学性质和 生物活性都不相同， 针对大麻二酚的提取纯化技术并不能完全适合大麻二酚酸， 因此需要针对性的做出优化。 大麻二酚酸水溶性相对较好， 热稳定性不 足， 因此在实验过程 中需特别注意。 现在单独针对大麻二酚酸的发明专利比较少， 且前大部分针对工业大麻 的 提取手段多为基础的化学提取手段， 因此需要寻找一种新的提取 方法填补相应的空白。 发明内容 [0004]有鉴于此， 本发明提供了大麻二酚酸的提取方法。 本发明提供了大麻二酚酸的提 取方法， 弥补了现有技术的空缺， 并且目前大部分针对工业大麻 的提取手段多为基础的化 学提取手段， 本发明采用微生物的方式增加相关成分提取 的方法选择。 通过本发明提供 的 方法， 提取的大 麻二酚酸纯度较高。 [0005]为了实现上述发明目的， 本发明提供以下技 术方案： [0006]本发明提供了大 麻二酚酸的提取 方法， 包括： [0007]取工业大麻灭菌后， 与保藏编号为CGMCC:1.3604的菌株混合， 发酵， 调节p H值为碱 性， 超声提取， 抽滤， 收集 提取液， 经有机溶剂萃取， 纯化， 获得 所述大麻二酚酸。 [0008]具体的， 在本发明的一些实施方案中， 上述提取方法中所述工业大麻中大麻二酚 酸(CBDA)的含量 为40％。 [0009]在本发明的一些实施方案中， 上述提取方法中所述混合中取所述菌株制备成菌 液， 所述菌株的培 养温度为37℃， 时间为72h， 所述菌液中活菌数为6 ×108CFU/mL。 [0010]具体的， 在本发明的一些实施方案中， 上述提取方法中培养所述菌株 的培养基包 括Horikoshi  I培养基； 所述Horikoshi  I培养基包括： 葡萄糖100 g/L、 聚合蛋白胨5.0 g/L、 酵母浸出物5.0 g/L、 磷酸氢二钾1.0 g/L、 硫酸镁0.2g/L、 碳酸钠10.0 g/L和氯化钠20.0 g/L； 所述Hori koshi I培养基的pH为10 。 [0011]更具体的， 在本发明的一些实施方案中， 上述 提取方法中所述培 养的时间为 48h。说　明　书 1/5 页 3 CN 115216496 A 3