(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210583517.2 (22)申请日 2022.05.25 (83)生物保 藏信息 CCTCC NO： M 202 2346 202 2.03.30 (71)申请人 华中农业大 学 地址 430070 湖北省武汉市洪山区狮子山 街1号 (72)发明人 吴健　任竹青　徐明江　王国磊　 李茹玉　韩虹波　黄逸豪　凌世东　 靳易　 (74)专利代理 机构 武汉开元知识产权代理有限 公司 42104 专利代理师 冯超 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01)A01C 1/00(2006.01) A01G 7/06(2006.01) A01G 13/00(2006.01) A01N 63/22(2020.01) A01P 3/00(2006.01) C05G 3/60(2020.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 多粘类芽孢杆菌21-2及其应用 (57)摘要 本发明公开了一株多粘类芽孢杆菌21 ‑2及 其应用， 所述多粘类芽孢杆菌21 ‑2， 命名为： Paenibacillus  polymyxa 21‑2， 其保藏编号为： CCTCC NO： M 2022346。 该菌21 ‑2从多年种植半夏 的土壤中分离筛选得到， 该菌株对5种半夏常见 病原菌均为高度抑菌， 尤其对能引起半夏猝倒 病、 块茎软腐病和枯萎病的尖孢镰刀菌具有高度 抑制作用。 多粘类芽孢杆菌21 ‑2菌液及其生物有 机肥对尖孢镰刀菌引起的半夏病害具有显著防 治效果。 同时， 该菌能够促进半夏种子的萌 发， 对 半夏的株高、 鲜重、 球茎和叶绿素含量都有显著 促生作用。 本发 明能够为人工种植半夏的促生防 病提供理论和实 践依据。 权利要求书1页 说明书9页 附图4页 CN 115125165 A 2022.09.30 CN 115125165 A 1.一株多粘类芽孢杆菌21 ‑2， 其特征在于： 所述多粘类芽孢杆菌21 ‑2， 命名为： Paenibacillus polymyxa 21‑2， 其保藏编号 为： CCTCC NO： M 2022346。 2.一种权利要求1所述的多粘类芽孢杆菌21 ‑2在促进中草药植物的种子萌发和植株生 长中的应用。 3.根据权利要求2所述的应用， 其特 征在于： 所述中草药植物为半夏。 4.一种促进中草药植物的种子萌发和植株生长的促进剂， 其特征在于： 所述促进剂中 含有权利要求1所述多粘类芽孢杆菌21 ‑2的培养得到悬 液。 5.根据权利要求4所述的促进剂， 其特征在于： 所述悬液的由以下步骤制备而成： 多粘 类芽孢杆菌21 ‑2活化， 将活化的多粘类芽孢杆菌21 ‑2接种在LB液体培养基中培养， 离心， 用 无菌水将沉淀 重悬， 得到悬 液； 其中， 悬 液中多粘类芽孢杆菌21 ‑2的数量为108cfu/ml。 6.一种权利要求1所述的多粘类芽孢杆菌21 ‑2在促进中草药植物生长中的应用。 7.一种权利要求1所述的多粘类芽孢杆菌21 ‑2在抑制尖孢镰刀菌中的应用。 8.一种权利要求1所述的多粘类芽孢杆菌21 ‑2在防治中草药植物中的应用。 9.一种半夏的生物有机肥， 其特 征在于： 所述 生物有机肥中含有 多粘类芽孢杆菌21 ‑2。 10.根据权利要求9所述半夏的生物有机肥， 其特征在于： 所述生物有机肥包括秸秆生 物炭、 鸡粪有机肥和多粘类芽孢杆菌21 ‑2； 其中， 秸秆生物炭和鸡粪有机肥重量比为3:15～ 20； 且所述 生物有机肥中， 菌株21 ‑2的浓度107cfu/g。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115125165 A 2多粘类芽孢杆菌21 ‑2及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及微 生物应用领域， 具体涉及一株多粘类芽孢杆菌21 ‑2及其应用。 背景技术 [0002]随着中药产业的不断发展， 半夏作为我国重要的中药材之一， 其市场需求和药用 价值在不断提升。 人工种植半夏是目前半夏的主要来源， 但种植过程中极易 发生病害， 其常 见病害主要有疫病、 猝倒病、 软腐病、 块茎腐烂病等， 导致半夏产量锐减， 经济利益受损， 已 成为阻碍人工种植半夏产业发展的重要因素。 其中， 在高湿的环境下， 半夏猝倒病极易发 生， 严重危害半夏幼 苗的地上或地下部嫩茎， 病原菌多为尖孢镰刀菌和疫霉。 半夏软腐病发 病率为35％ ‑47.5％， 具有传播范围广、 治疗难度大、 病时短等的特点， 高温高湿天气多发， 严重时导致种植区绝收， 病原菌为胡萝卜果胶杆菌胡萝卜软腐亚种(Pectobacterium  caro  tovorum subsp.carotov orum)和产酸克雷伯氏杆菌(Klebsiella  oxytoca KCTC 1686)。 半 夏块茎腐烂病发病率高达15％ ‑30％， 发病植株叶片枯黄， 地下块茎部分或全部腐烂并发出 恶臭味， 产量损失高达30％以上， 其病原菌为镰刀菌真菌(Fusarium  sp.)、 尖孢镰刀菌 (F.oxysporum)和茄病镰刀菌(F.solani)。 半夏疫病是人工种植半夏过程常见的病害之一， 该病害传播性 强， 可导致半夏产量锐减， 是半夏生长后 期危害半夏的主要病害， 发病率高达 20％以上， 其病原菌为寄生疫霉。 综上所知， 尖孢镰刀菌可能导致半夏常见猝倒病、 茎腐烂 病及枯萎病。 目前， 针对半夏病害的防治处于探索和研究阶段， 常用的防治方法主要有农业 防治、 化学防治和生物防治。 农业防治周期 长且操作复杂， 化学防治 见效快但会造成土壤高 浓度农药残留， 影响半夏的品质。 而生物防治是一种安全、 绿色且无公害的稳定防治方式， 尤其是在中药材种植， 具有很大的应用前景。 目前， 针对半夏病害的生物防治研究较少。 有 研究报道， 铜绿假单胞菌pY11T ‑3‑1能够在半夏根际土壤中稳定定殖生长， 减缓半夏软腐病 的发生率， 同时对半夏的发芽率、 株高、 鲜重及日增 长量都有不同程度的提高(董飞2011)。 闫杨等将3株对不同病原菌抑菌效果较好的菌株， 通过采用灌根的方法开展半夏大田试验， 结果表明加入菌液能够提高半夏根际土壤中相关酶活性， 进而提高半夏的产量(闫杨等 2018)。 唐汉 萌通过开展盆栽和大田试验表明， 施用生防菌株制成的微生物菌剂能显著提高 半夏的产量与品质(唐汉萌2019)。 [0003]微生物肥料作为一种新型绿色肥料， 是生物防治的主要手段， 尤其是在中药材种 植中， 具有很大 的应用价值。 由多粘类芽孢杆菌制备 的微生物肥料以其良好的环境友好性 和生物防治机制的多样性， 已成为植物病害防治的重要策略之一。 多粘类芽孢杆在其它植 物的生长防病中已有部 分的研究。 金莉萍发现多粘类芽孢杆菌菌株CF05能产生IAA,其最高 浓度达到5.35 μg ·mL‑1,对番茄植株表现出明显促生效果,鲜质量提 高29.4％,干质量提高 38.4％(金莉萍2016)。 王佳欢研究表明， 多粘类芽孢杆菌肥施用后茶树的百芽重、 茶叶产 量、 水浸出物、 茶多酚、 咖啡碱、 氨基酸含量均高于对照组(王佳欢和李慧莉2022)； 邓云分离 筛选出一株具有广谱抗真菌活性的多粘类芽孢杆菌， 能够有效防治小麦赤霉病,防治率达 58.43％， 同时,小麦 籽粒千粒重比对照增 加8.83％,理论产量增 加45.21％(邓云202 2)。说　明　书 1/9 页 3 CN 115125165 A 3