(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210705281.5 (22)申请日 2022.06.21 (71)申请人 重庆大学 地址 400044 重庆市沙坪坝区沙正 街174号 申请人 中国水利水电第九工程局有限公司 (72)发明人 陈猷鹏　王谨　李文超　晏鹏　 白青　方芳　 (74)专利代理 机构 重庆博凯知识产权代理有限 公司 50212 专利代理师 万霞 (51)Int.Cl. C12N 11/10(2006.01) C12N 11/084(2020.01) C12N 11/04(2006.01) C12N 1/20(2006.01)C02F 3/34(2006.01) (54)发明名称 厌氧氨氧化细菌-短程硝化细菌共包埋小球 及其制备方法和应用 (57)摘要 本发明公开了厌 氧氨氧化细菌 ‑短程硝化细 菌共包埋小球及其制备方法和应用， 其制备方法 包括： 将聚乙烯醇、 海藻酸钠依次加入到去离子 水中， 搅拌均匀后灭菌冷却， 得到混合液 Ⅰ和混合 液Ⅱ； 将厌氧氨氧化细菌与混合液 Ⅰ等体积混合， 得到菌液混合液 Ⅰ； 将菌液混合液 Ⅰ交联， 再经水 洗、 磷酸化和水洗后， 得到固定化厌氧氨氧化细 菌凝胶小球； 将氨氧化细菌和混合液 Ⅱ等体积混 合， 得到菌液混合液 Ⅱ； 将固定化厌氧氨氧化细 菌凝胶小球缓慢加入到菌液混合液 Ⅱ中， 然后交 联， 再经水洗、 磷酸化、 水洗， 从而得到厌氧氨氧 化细菌‑短程硝化细菌共包埋小球。 该共包埋小 球能有效延长污泥停留时间， 保证生物量的增 殖， 同时能有效避免氧气 对厌氧氨氧化细菌的抑 制影响。 权利要求书2页 说明书7页 附图5页 CN 115011585 A 2022.09.06 CN 115011585 A 1.厌氧氨氧化细菌 ‑短程硝化细菌共包埋小球的制备方法， 其特征在于， 包括以下步 骤： （1） 将聚乙烯醇、 海藻酸钠依次加入到去离子水中， 并加热搅拌至混合均匀， 然后灭菌 后冷却， 得到 混合液Ⅰ， 所述混合液 Ⅰ中聚乙烯醇的体积质量百分比为6~15 %， 海藻酸钠的体 积质量百分比为1~2 %； （2） 将厌氧氨氧化细菌与步骤 （1） 配制得到的混合液 Ⅰ等体积混合， 得到 菌液混合液 Ⅰ； （3） 将菌液混合液 Ⅰ缓慢滴入交联剂中交联， 从而得到包埋颗粒， 再取出包埋颗粒经水 洗、 磷酸化和水洗后， 得到固定化厌氧氨氧化细菌 凝胶小球， 备用； （4） 将聚乙烯醇、 海藻酸钠依次加入到去离子水中， 并加热搅拌至混合均匀， 然后再灭 菌后冷却， 得到混合液 Ⅱ， 所述混合液 Ⅱ中聚乙烯醇的体积质量百分比为3~8 %， 海藻酸钠 的体积质量百分比为3~5 %； （5） 将氨氧化细菌和步骤 （4） 配制得到的混合液 Ⅱ等体积混合， 得到 菌液混合液 Ⅱ； （6） 将步骤 （3） 制备得到的固定化厌氧氨氧化细菌凝胶小球缓慢加入到菌液混合液 Ⅱ 中， 并使固定化厌氧氨氧化细菌凝胶小球完全浸没在菌液混合液 Ⅱ中， 从而得到在厌氧氨 氧化细菌凝胶小球表 面包覆有氨 氧化细菌凝胶的共包埋颗粒， 再将共包埋颗粒取出投加到 交联剂中交联， 再经水洗、 磷酸化、 水洗， 从而得到厌 氧氨氧化细菌 ‑短程硝化细菌共包埋小 球。 2.根据权利要求1所述的厌氧氨氧化细菌 ‑短程硝化细菌共包埋小球的制备方法， 其特 征在于， 步骤 （1） 和步骤 （4） 中加热温度为70~100℃， 且采用高压锅进行灭菌， 其 灭菌温度为 100~150℃， 灭菌时间为15~45 min。 3.根据权利要求1所述的厌氧氨氧化细菌 ‑短程硝化细菌共包埋小球的制备方法， 其特 征在于， 步骤 （2） 中的厌氧氨氧化细菌是通过将厌 氧氨氧化颗粒污泥用缓冲液清洗三次， 然 后将其研磨至粉状得到 。 4.根据权利要求3所述的厌氧氨氧化细菌 ‑短程硝化细菌共包埋小球的制备方法， 其特 征在于， 所述缓冲液为磷酸盐缓冲液。 5.根据权利要求1所述的厌氧氨氧化细菌 ‑短程硝化细菌共包埋小球的制备方法， 其特 征在于， 步骤 （3） 和步骤 （6） 中的交联剂均为饱和硼酸和1%氯化钙溶 液构成的混合溶 液。 6.根据权利要求1所述的厌氧氨氧化细菌 ‑短程硝化细菌共包埋小球的制备方法， 其特 征在于， 步骤 （3） 和步骤 （6） 中均采用0.2~0.8 M 磷酸二氢钠溶 液进行磷酸 化0.5~2 h。 7.根据权利要求1所述的厌氧氨氧化细菌 ‑短程硝化细菌共包埋小球的制备方法， 其特 征在于， 步骤 （2） 中， 厌氧氨氧化细菌的含水量为60~65 %； 步骤 （5） 中氨氧化细菌的含水量 为50~60 %。 8.一种厌氧氨氧化细菌 ‑短程硝化细菌共包埋小球， 其特征在于， 采用权利要求1~7任 一所述的制备 方法得到 。 9.根据权利要求8所述的一种厌氧氨氧化细菌 ‑短程硝化细菌共包埋小球应用于污水 处理， 且在处理污水前， 先将共包埋小球置于30~35 ℃恒温水浴摇床中用目标废水活化培 养12天， 使共 包埋小球的内部微 生物得到充分的恢复和 驯化。 10.根据权利要求9所述的一种厌氧氨氧化细菌 ‑短程硝化细菌共包埋小球的应用， 其 特征在于， 采用的培养基的组成如下： NH4HCO3 493mg/L； KH2PO4 22mg/L； CaCl2 36mg/L；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115011585 A 2MgCl2 25mg/L和1ml微量元素溶液， 所述微量元素溶液的组成如下： Na2·EDTA·2H2O 8.3  g/L； FeSO4·7H2O 5g/L； MnCl2·4H2O 0.495g/L； ZnSO4·7H2O 0.215g/L； CuSO4·5H2O 0.125  g/L； CoCl2·6H2O 0.120g/L； Na2MoO4·2H2O 0.11g/L； NiCl2·6H2O 0.095g/L； Na2SeO3  0.078 g/L； H3BO4 0.007g/L。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115011585 A 3