ICS 67.200.20 B 33 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 2794—2015 花生仁中氨基酸含量测定 近红外法 Determination of amino acids content in peanut-Near-infrared method 行业标准信息服务平台 2015-05-21发布 2015-08-01实施 中华人民共和国农业部 发布 NY/T 2794—2015 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由农业部农产品加工局提出。 本标准由农业部农产品加工标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：中国农业科学院农产品加工研究所。 本标准主要起草人：王强、刘红芝、王丽、于宏威、刘丽、石爱民、胡晖。 行业标准信息服务平台 NY/T 2794—2015 引言 本标准根据花生仁中氨基酸分子CH、N一H、O一H等化学键的倍频和合频吸收会产生近 红外光谱，能反映花生仁丰富的结构和组成信息的原理制定。在化学值测定和近红外光谱扫描的基础 上，通过偏最小二乘法等现代化学计量学的手段，建立近红外吸收光谱与待测成分含量间的线性或非线 性关系模型，以此计算未知花生仁样品中氨基酸含量。 本标准是建立在常规方法基础上的花生仁中氨基酸含量的快速测定方法，对于仲裁检验，应以国家 标准已规定的常规方法，即天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、亮氨酸和精氨酸7种氨基酸按照 《食品中氨基酸的测定》（GB/T5009.124），胱氨酸按照《饲料中含硫氨基酸测定方法离子交换色谱 法》（GB/T15399）。 行业标准信息服务平台 Ⅱ NY/T2794—2015 花生仁中氨基酸含量测定 近红外法 1范围 本标准规定了近红外分析方法测定花生仁中氨基酸含量（湿基）的术语和定义、仪器与软件、样品选 择与准备、模型建立与未知样品测定、结果处理和表示、异常样品的确认和处理、定标模型的升级与监 控、准确性和精密度及测试报告的要求。 本标准适用于花生仁中天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、亮氨酸、精氨酸和胱氨酸8种氨 基酸含量（湿基)的无损测定，本方法的最低检出量为0.01%。 本标准不适用于仲裁检验。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T1532花生 GB/T5009.124食品中氨基酸的测定 GB5491粮食、油料检验扦样、分样法 GB/T15399饲料中含硫氨基酸测定方法—一离子交换色谱法 GB/T24895近红外分析定标模型验证和网络管理与维护通则 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3. 1 基频 fundamental frequency 从基态跃迁到第一能级跃迁产生的近红外吸收频率。 3. 2 倍频frequencymultiplication 基频以外的其他振动能级跃迁产生的近红外吸收频率。 3. 3 合频combinedfrequency 一个光子同时激发两种或多种跃迁所产生的泛频，包括二元组合频，三元组合频以及其他类型组 合频。 3. 4 外部验证externalvalidation 样品集分为定标样品集和验证样品集，利用验证样品集验证定标模型的方法。 3. 5 相关系数correlationcoefficient 近红外光谱法测定值与参考值之间的相关性，通常定标样品相关系数以Rc表示，验证样品相关系 1 NY/T2794—2015 数以Rv表示。 3. 6 剩余预测偏差residualpredictivedeviation 通过线性回归法计算纵坐标预测值所产生的标准误差，定标模型剩余预测偏差以RPDc表示，验证 模型剩余预测偏差以RPDv表示。 3. 7 马氏距离mahalanobisdistance 用于鉴定未知样品浓度是否超过了定标样本的浓度范围，其计算公式是： MD, =[(t-t).(TmTen)-1.(t;-t)T] 式中： 一定标集第i样品光谱的得分； t: 定标集所有样品的得分矩阵； t T的平均得分向量； T的均值中心化矩阵，即T=T一t。 3. 8 准确性 accuracy 表明近红外测定值与参考值的接近程度，用测定值与参考值之间的标准差（SD）来表示。 4仪器与软件 4.1近红外光谱仪 近红外光谱仪符合GB/T24895的要求。 4.2样品杯 近红外光谱仪上的旋转样品杯。 4.3软件 具有近红外光谱数据的收集、存储、加工等功能的软件。 5模型建立与测定未知样品 5.1样品选择与准备 5.1.1样品的选择 样品应覆盖产地、品种、含量、季节、种植条件、收获条件及应用范围等，并在一定时间段内，按一定 程序采集大量花生仁，从中挑选的花生仁应符合GB/T1532的要求。创建一个新的定标模型，花生样 品数不得少于100个。 5.1.2建模样品准备 样品的取样和分样按照GB5491的规定执行，整理样品，除去样品中杂质。将样品分为两组，密 封，一组用于测定花生仁氨基酸参考值，另一组用于近红外光谱扫描。 5.2花生仁氨基酸参考值的测定 以GB/T5009.124和GB/T15399的测定值作为参考值。 5.3定标模型的建立 5.3.1近红外光谱扫描 近红外光谱扫描应与样品参考值测定同期进行。 5.3.1.1仪器预热和测试 每次扫描前应按照近红外光谱仪说明书的要求进行仪器预热和自我测试。 2 NY/T2794—2015 5.3.1.2样品扫描 每个样品重复装样3遍，每遍都振动样品杯，每遍扫描2次光谱，取6次扫描的平均光谱值用于定 标和验证。 5.3.2定标模型的建立与验证 利用软件建立定标模型，并采用外部验证对定标模型进行验证。定标模型的参数要求，应满足表1 的要求。 表1 花生仁中氨基酸模型参数要求 氨基酸 R." R.2 RPD RPD, 天冬氨酸 0. 88 0.84 1.56 2.52 苏氨酸 0. 83 0. 82 2.25 3.00 丝氨酸 0.86 0.82 1. 41 2.40 谷氨酸 0.87 0.85 1.47 2.57 甘氨酸 0.88 0.82 1.44 2.36 亮氨酸 0.88 0. 81 0. 88 3.00 精氨酸 0. 89 0.86 1. 69 2.88 胱氨酸 0.96 0.99 3.50 7.50 注：R²、R、RPD.和RPD,为相应指标的最低限。 5.3.3对未知样品的测定 未知样品应符合GB/T1532的要求。近红外光谱扫描按照5.3.1的要求执行。然后将未知样品 近红外光谱与定标样品光谱进行比较，当未知样品MD值在定标样品集MD范围内，则仪器将直接给 出样品的氨基酸值；当待测样品MD值不在定标样品集MD范围内，则说明样品已超出了定标模型的 分析能力，该样品被定为疑似异常样品。 6结果处理和表示 6.1测定结果应在近红外光谱仪使用的定标模型所覆盖的氨基酸含量范围内。 6.23次测定结果的标准差应符合本标准第9章的要求，取3次数据的平均值作为测定结果，测定结 果保留小数点后两位。 6.3对于仪器警报异常的测定结果，所得数据不应作为有效测定数据。异常样品的确认和处理按照本 标准第7章的要求执行。 7异常样品的确认和处理 7.1异常样品的确认 务平台 应对造成测定结果异常的原因进行分析和排查，并再次进行近红外测定予以确认。造成测定结果 异常的原因，可能包括以下几个方面： a）样品中含有过多杂质； b）该样品的氨基酸含量参考值超过了定标模型的范围； c）光谱扫描过程中样品发生了位移； d）定标模型采用不当。 如仍出现报警，则确认为异常样品。 7.2异常样品的处理 发现异常样品后，应按GB/T5009.124和GB/T15399规定的方法对该样品的氨基酸含量进行测 定分析，并封存样品。 3 NY/T2794—2015 8定标模型的升级与监控 8.1 定标模型的升级 扫描未知样品的近红外光谱，将未知样品的光谱加入到定标样品的光谱中，利用参考方法测定的氨 基酸含量，用原有的定标方法进行计算，即获得升级的定标模型。 8.2定标模型的监控 用监控样品（监控样品的制备见附录A）进行定期检测，每周2次～3次，同一监控样品的测试结 果，应满足9.2.1的要求。如检验出现结果不一致时，应重新多次采集光谱，进行预测分析，以确保光谱 采集的正确。若仍存在显著性差异，则需要对光谱仪的硬件进行全面的测试检验。 9准确性和精密度 9.1准确性 未知样品氨基酸含量近红外测定值与参考值之间的标准差（SD)的具体要求见表2。 表2花生仁中氨基酸近红外分析要求 S, SR 氨基酸 SD 天冬氨酸 0.04 0.04 0.05 苏氨酸 0. 04 0. 03 0.04 丝氨酸 0.04 0.05 0.06 谷氨酸 0.04 0.03 0.04 甘氨酸 0.04 0.03 0.04 亮氨酸 0. 04 0. 05 0.06 精氨酸 0.04 0.04 0.05 0.04 0.05 胱氨酸 0.02 注：表中数值为相应指标的最高限 9.2精密度 9.2.1重复性 在同一实验室，由同一操作者使用相同仪器设备，按相同测试方法，通过重新分样和重新装样，对同 一花生仁样品相互独立进行测试，获得的3次花生仁中氨基酸含量的测定结果的标准差S,的具体要求 见表2。 9.2.2再现性 在不同实验室，由不同操作人员使用同一型号不同设备，按相同的测试方法，对相同的花生仁样品 总服务平台 进行3次独立测试，获得3次花生仁中氨基酸含量的测定结果的标准差S的具体要求见表2。 10 测试报告