ICS 65.150 CCS B 5 0 4505 北 海 市 地 方 标 准 DB 4505 /T 000 6 — 202 3 岛礁海参生态增殖技术规范 Technical specification for ecological enhancement of reef - inhabiting sea cucumbers 202 3 - 0 3 - 08 发布 20 2 3 - 04 - 08 实施 北海市市场监督管理局 发 布 DB4505/T 0006 — 2023 I 目 次 前言 ................................ ................................ ................ III 1 范围 ................................ ................................ ............... 1 2 规范性引用文件 ................................ ................................ ..... 1 3 术语和定义 ................................ ................................ ......... 1 4 海域选择 ................................ ................................ ........... 2 自然条件 ................................ ................................ ....... 2 海水理化条件 ................................ ................................ ... 2 5 物种选择 ................................ ................................ ........... 2 6 种苗培育及苗种要求 ................................ ................................ . 2 7 苗种检验检疫 ................................ ................................ ....... 2 检验资质机构要求 ................................ ............................... 2 抽检原则与数量要求 ................................ ............................. 3 检验内容与方法 ................................ ................................ . 3 8 生态增殖 ................................ ................................ ........... 3 苗种转运 ................................ ................................ ....... 3 适应性驯化 ................................ ................................ ..... 3 底播增殖 ................................ ................................ ....... 3 9 增殖容量 ................................ ................................ ........... 4 10 海参丰度监测 ................................ ................................ ...... 4 潜水员和设备 ................................ ................................ .. 4 潜水断面设置 ................................ ................................ .. 4 丰度监测与计算 ................................ ................................ 4 11 效果评估 ................................ ................................ .......... 4 基于海参丰度的增殖效果评估 ................................ .................... 4 基于环境 DNA 的增殖效果评估 ................................ .................... 5 基于增殖群体回捕占比率的增殖效果评估 ................................ .......... 5 12 管理 ................................ ................................ .............. 5 附录 A （规范性） 海参生态增殖放流情况记录表 ................................ ........... 6 附录 B （资料性） 基于环境 DNA 的海参丰度计算 ................................ ........... 7 B.1 特异性 qPCR 扩增引物设计 ................................ ........................ 7 B.2 PCR 扩增、质粒构建及质粒标准模板制备 ................................ ............ 7 B.3 DNA 标准定量曲线制作 ................................ ............................ 7 B.4 环境 DNA 的 qPCR 扩增及海参丰度计算 ................................ .............. 7 附录 C （资料性） 基于微卫星分子标记的海参 增殖群体回捕占比率 计算 ....................... 9 DB4505/T 0006 — 2023 II C.1 样本采集 ................................ ................................ ........ 9 C.2 样本保存 ................................ ................................ ........ 9 C.3 样本 DNA 提取 ................................ ................................ .... 9 C.4 多态性 SSR 位点的筛选 ................................ ............................ 9 C.5 PCR 扩增及基因分型 ................................ .............................. 9 C.6 海参回捕抽样样本的遗传区分及回捕占比率计算 ................................ ...... 9 参考文献 ................................ ....