SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 0973—2010 代替SN/T0973—2000 进出口肉、肉制品及其他食品 中肠出血性大肠杆菌 O157：H7检测方法 Determination of entero-hemorrhagic E. coli O157:H7 in meats/meat product and other food for import and export 业标准信息服务平台 2010-11-01发布 2011-05-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T0973—2010 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准代替SN/T0973一2000《进出口肉及肉制品中肠出血性大肠杆菌O157：H7检测方法》。 本标准与SN/T0973一2000相比，主要技术变化如下： 补充了ELISA方法快速检测肠出血性大肠杆菌O157:H7的内容； 补充了微生物遗传分子特征性鉴定技术（基因分型）内容，便于对该危害性致病菌的溯源性调 查和变异性研究。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国上海出人境检验检疫局、中华人民共和国深圳出人境检验检疫 局、3M中国有限公司、生物梅里埃（中国）公司。 本标准主要起草人：张树宏、顾鸣、韩伟、杨捷琳、范放、吕敬章、万志刚、吕雷、朱华、刘毅。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： SN/T0973—2000。 行业标准信息服务平台 I SN/T 0973—2010 进出口肉、肉制品及其他食品 中肠出血性大肠杆菌 O157:H7检测方法 1范围 本标准规定了进出口肉及肉制品中肠出血性大肠杆菌O157：H7的检测方法。 本标准适用于进出口肉、肉制品及其他食品中的肠出血性大肠杆菌O157：H7的定性检验。 2定义和术语 下列术语和定义适用于本文件。 2. 1 肠出血性大肠杆菌0157：H7entero-hemorrhagicE.Coli0157：H7 本细菌为需氧或兼性厌氧、革兰氏阴性，有周鞭毛，并有菌毛，不产生芽孢，发酵乳糖，不发酵或迟缓 发酵山梨醇，氧化酶阴性，β葡萄糖苷酶阴性的杆菌。 3方法原理 采用Tecra微孔板法大肠杆菌Q157：H7快速检测试剂盒方法"。样品增菌液煮沸裂解，裂解液与 标准信息服务平台 物，利用肉眼或酶标仪进行检测。 4设备和材料 4.1恒温培养箱：（10℃~50℃）±1℃。 4.2均质器：小于12000r/min。 4.3 高压灭菌锅。 4.4 科玛嘉大肠杆菌O157：H7显色琼脂平板²。 4. 5 VIDAS自动酶联免疫检测仪，法国梅利埃公司产品或其他等效产品。 4.6 VITEK自动微生物生化鉴定仪或其他等效产品3。 4.7 微生物实验室通用玻璃器血、移液管、玻皿等。 4.8 铂铱或镍铬丝接种环，直径约3mm；玻璃L棒。 1）、2）分别为由美国3M公司和法国科玛嘉公司提供的产品的商品名。给出这一信息是为了方便本标准的使用 者，并不表示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效的产品。 3）由法国生物梅里埃公司提供的产品的商品名。给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品 的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效的产品。 1 SN/T 0973—2010 4.9电子天平：精确值0.001g。 4.10移液枪及枪头：1mL、0.2mL。 4.11洗板机。 4.12酉 酶标仪（波长450nm）。 5培养基和试剂 除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水（Tecra法试剂的配制使用重蒸水）。 5.1改良E.C新生霉素增菌肉汤[m(EC)n]:见附录A中A.1。 5.2山梨醇麦康凯琼脂（SMAC)：见附录A中A.2。 5.3月桂基磷酸盐胰蛋白陈MUG肉汤(LST-MUG):见附录A中A.3。 等效产品。 5.5含新生霉素的缓冲胰蛋白陈大豆肉汤(BTSB+N）：见附录A中A.4。 5.6Imbentin补充液：见附录A中A.5。 6 试样制备与保存 6.1制备 从混合样品中取出代表性样品，将可食用部分（去掉可见脂肪）充分均质。用四分法所分出不少于 500g作为试样，装人灭菌容器内，加封后标明标记。 行业标准信息服务平台 6.2保存 试样于一18℃以下冷冻保存 7木 检测流程 检测流程见图1。 2