SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 06842011 代替SN0684—1997 出口肉及肉制品中奥芬哒唑、芬苯哒唑、 苯硫胍及奥芬哒唑砜残留量检测方法 液相色谱-质谱/质谱法 Determiantion of oxfendazole,fenbendazole,febantel and oxfendazole sulphone residues in meat and meat products for export-HPLC-MS/MS method 业标准信息服务平台 2011-09-09发布 2012-04-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 0684—2011 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准代替SN0684一1997《出口肉及肉制品中奥芬哒唑残留量检验方法》。与SN0684-1997相 比主要修改如下： 对标准的名称进行了修改； 增加了检测项目，除奥芬哒唑外，还包括了芬苯哒唑、苯硫胍及奥芬哒唑砜； 一检测方法由液相色谱法改为液相色谱-质谱/质谱法； 一修改了奥芬哒唑检验结果的表述，奥芬哒唑、芬苯哒唑、苯硫胍的检验结果均以可能被氧化成 奥芬哒唑砜的可萃取残留总量计。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国上海出人境检验检疫局、 本标准主要起草人：郭德华、邓晓军、韩丽、盛永刚、伊雄海、赵善贞。 本标准于1997年首次发布，本次为第一次修订。 行业标准信息服务平台 I SN/T 0684—2011 出口肉及肉制品中奥芬哒唑、芬苯哒唑、 本硫胍及奥芬哒唑砜残留量检测方法 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了出口肉及肉制品中奥芬哒唑、芬苯哒唑、苯硫胍和奥芬哒唑砜残留量的测定方法。 本标准适用于牛肉、猪肝、午餐肉中奥芬哒唑、芬苯哒唑、苯硫胍和奥芬哒唑砜残留量的检测。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 试样以盐酸乙睛混合溶液提取、正已烷脱脂离心，吸取部分下层溶液并调节pH值到8～9，再用乙 酸乙酯提取，旋转蒸十后，用液相色谱-串联质谱仪测定，内标法定量。 4试剂和材料 除另有规定外，试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 4.1正已烷。 4.2异丙醇。 4.3甲醇：色谱纯。 4.4 乙腈：色谱纯。 乙酸乙酯：色谱纯。 4. 6 25%氨水。 4.7 N,N-二甲基甲酰胺：色谱纯。 4.8 N,N-二甲基甲酰胺-甲醇混合溶液：水-N,N-二甲基甲酰胺-甲醇溶液（7十2十1,体积比）。 4.9浓盐酸：36%，密度为1.18g/L。 4.101moL/L盐酸：量取浓盐酸83mL，加水稀释至1000mL。 4.110.75mol/L盐酸乙溶液：乙睛-1mol/L盐酸溶液（1+3.体积比）。 4.12标准品：奥芬哒唑（oxfendazole，CAS号53716-50-0）、芬苯哒唑（fenbendazole，CAS号43210-67- 9）、奥芬哒唑矾（oxfendazolesulphone，CAS号54029-20-8）、苯硫胍（febantel，CAS号58306-30-2），纯 度均大于99%。 4.13芬苯哒唑-d3标准品：甲酯位的3个H被D取代，纯度大于99%。 4.14标准储备液：分别称取适量奥芬哒唑、芬苯哒唑、奥芬哒唑砜、苯硫胍、芬苯哒唑-d3，用10mL 1 SN/T 0684—2011 4.15标准工作溶液：根据需要，用乙睛-水溶液（2十8，体积比）将奥芬哒唑、芬苯哒唑、奥芬哒唑砜、苯 硫胍标准储备液配成供液相色谱-串联质谱测定用的浓度为5ug/L、10ug/L、50μg/L、100μg/L、 200μg/L的混合标准工作溶液。其中同位素内标芬苯哒唑-d3浓度均为10.0μg/L，混合标准工作溶液 使用前配制。 4.16滤膜：0.2μm，有机相。 5仪器和设备 5.1液相色谱-串联质谱仪，配有电喷雾离子源。 5.2均质器。 5.3 pH计。 5.4涡旋振荡器。 5.5离心机：4000r/min。 5.6旋转蒸发仪。 5.7 超声波水浴。 5.8分析天平：感量0.1mg.0.01g。 6试样制备与保存 制样操作过程中应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。 从所取全部样品中取出有代表性样品可食部分约500g，用组织捣碎机充分捣碎均匀，装人洁净容 器中，密封，并标明标记，于一18℃以下冷冻存放。 行业标 7测定步骤 7.1提取和净化 称取5g样品（准确至0.01g）于50mL离心管中.加人10mL乙腈盐酸溶液（4.11）、3mL异丙醇 和10mL正已烷，50ng芬苯哒唑-d3，涡旋混匀2min，14000r/min速度高速匀质30s，以4000r/min 下清液，并用水稀释到25mL，混匀。 吸取上述溶液5mL到50mL离心管，用氨水调节pH值到8～9，再加人10mL乙酸乙酯，涡旋混 匀3min，以4000r/min离心3min，收集上层溶液。再向离心管中加人1mL乙晴，5mL乙酸乙酯，重 复上述操作。合并上层溶液，于40℃减压旋转蒸发至干。 用1.0mLN,N-二甲基甲酰胺-甲醇混合溶液（4.8)溶解残渣，超声5min后过0.2um滤膜，滤液 供液相色谱-串联质谱测定。 7.2测定 7.2.1液相色谱-质谱/质谱条件 7.2.1.1色谱柱：SBCis柱,100mmX2.1mm（内径）,1.8μm或相当者。 7.2.1.2流动相：A：0.1%甲酸水溶液，B：0.1%甲酸乙腈溶液；流速：0.3mL/min，梯度洗脱程序见 表1。 2