ICS 65.020.20 B 05 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 3537—2020 甘薯脱毒种薯（苗）生产技术规程 Technical code of practice for virus-free sweetpotato seed roots or plant 2020-03-20 发布 2020-07-01实施 中华人民共和国农业农村部 发布 NY/T3537—2020 前誉 本标准由农业农村部种植业管理司提出并归口。 本标准起草单位：全国农业技术推广服务中心、江苏徐州甘薯研究中心、河南省农业科学院植物保护 研究所、山东省农业科学院作物研究所、徐州中农薯科农业发展有限公司。 本标准主要起草人：孙厚俊、鄂文弟、贺娟、张振臣、谢逸萍、李荣德、王庆美、谢睿寰、张成玲、乔奇、杨 冬静、马居奎、王欣、孙井康、储凤丽、张梅、董玲霞、侯夫云。 I NY/T3537—2020 甘薯脱毒种薯（苗）生产技术规程 1范围 本标准规定了甘薯脱毒种薯(苗)生产的术语和定义、脱毒组培室、脱毒组培苗繁育、田间鉴定、脱毒种 苗繁育、脱毒种薯(苗)生产。 本标准适用于甘薯脱毒种薯、种苗的培育和生产 2规范性引用文件 凡是不注日期的引用文件 NY/T402 脱毒甘薯种暮苗 NY/T1200 甘薯脱毒种薯 人 3术语和定义 S 下列术语和定 适用于 文件 3. 1 A 甘薯茎尖分生组 sweetpotato meristen 甘薯茎尖部位 具有持续 细胞君 3. 2 脱毒组培苗 virustfree tissue culture plant 由茎尖分生 主组织培养获得的未受甘薯羽状斑驳病 (SPEMV) 薯潜 LV)、甘薯G病毒 （SPVG）、甘薯褪绿 斑病毒（SPC 甘薯褪绿矮化病毒（SPCSV）和 薯双生 eepoviruses）侵染 的试管苗。 R 3. 3 脱毒种薯（苗） 由脱毒组培苗经逐代繁殖生产山的符合质量标准的种薯（苗） 原原种 、生产用种3个级别。 3. 4 原原种 pre-elite 用脱毒组培苗在60目防虫网室、温室内生产出的符合质量标准的种薯（苗） 3.5 原种elite 用原原种在隔离条件下生产出的符合质量标准的种薯（苗）。 3. 6 生产用种 certifiedseed 用原种在隔离条件下生产出的符合质量标准的种薯（苗）。 4脱毒组培室 4.1 组培室基本条件 组培室应清洁、干燥，具有可提供充足光源、温度、湿度的条件，周围应无污染源，应配备更衣室、清洗 室、配制室、灭菌室、无菌储藏室、接种室等。 1 NY/T3537—2020 4.2卫生要求 4.2.1接种组培室消毒 接种室消毒：实施甘薯脱毒前应对接种室进行消毒，可用紫外灯照射30min。 -组培室消毒：组培室应定期消毒，可用紫外灯消毒灭菌或熏蒸消毒等方式，如每1m用40%甲醛 10mL、高锰酸钾5g，密闭熏蒸24h，彻底通风后使用。 4.2.2器具消毒 用于组培的所有器具在1.1kg/cm²、121℃条件下高压灭菌20min。 超净工作台使用前应用紫外灯照射20min，接种时打开风机，台面及内壁用75%乙醇消毒。 操作过程中镊子、剪刀、解部针、手术刀等工具，每次使用前接触植物材料的部分应灼烧消毒或插 人高温灭菌器中灭菌，冷却后使用。 4.2.3操作人员消毒 操作前用肥皂清洗双手，更换消过毒的工作服、工作鞋、工作帽、无菌口罩。进入操作台用75%乙醇 严格擦拭双手或戴无菌手套进行操作。 5脱毒组培苗繁育 5.1茎尖培养基制备 茎尖分生组织培养基配方参见附录A。将制备好的茎尖培养基快速分装于容器中，封口，在1.1kg/ cm²、121℃条件下高压灭菌20min，冷却后在无菌室放置3d～5d，无污染的培养基放人超净工作台 备用。 5.2茎尖材料的选择 将具有品种典型性状的薯块盆栽育苗，长至4叶～6叶期时使用，或将薯块直接在消毒的植物生长培 养箱内催芽后，待芽长到2cm以上使用。剪取生长期间较细嫩、再生能力强、无病毒病症状的茎尖部位作 为备用材料。 5.3茎尖消毒处理 剪取2cm～3cm的顶芽，剪去外叶，自来水冲洗20min～30min，在超净台内先用75%乙醇浸泡40s， 再用2%次氯酸钠溶液浸泡5min，用无菌水冲洗4次~5次。 5.4茎尖剥离与接种 在超净工作台内将5.3处理的茎尖置于40倍双目体视解镜下，用镊子和解剖针或手术刀剥离茎尖 直至露出半圆形光滑生长点，用手术刀或解针从0.1mm～0.3mm处切下只含1个～2个叶原基的微 茎尖，迅速接种于茎尖培养基上，进行离体培养。用酒精灯烤干容器口并封口，在容器上注明编号、品种名 称、接种时间。 5.5培养条件 甘薯组织培养室最适温度保持在26℃～30℃相对湿度应<70%，光照时间12h/d～16h/d，光照强 度20001x~30001x。 5.6组培苗繁殖 以一个茎尖分生组织发育来的植株为一个株系进行繁殖，每品种应保证20个以上株系。 5.7茎尖苗病毒检测 一个株系在培养基中扩繁至20株左右时可进行病毒检测。 一检测方法按NY/T402的规定执行。 6田间鉴定 将5.7获得的株系20株～30株移栽到大田，种植观察，检验是否发生变异，淘汰变异的株系，保留符 合原品种的典型性状且高产的株系繁殖。 2 NY/T3537—2020 7脱毒种苗繁育 7.1组培室繁育 将经过田间鉴定的株系在超净工作台内切段扩繁。切成一叶一节或两叶两节的茎段，扦插扩繁培养 基上，培养条件同5.5，生长至5片6片叶进人下一轮扩繁，重复继代培养至移栽。 扩繁培养基配方参见附录B，制备方法见5.1。 7.2网棚繁育 7.2.1苗圃准备 移栽圃应覆盖60目的防虫网棚，隔离条件好，周边无其他级别种薯或商品薯和十字花科、茄科及其他 易引诱粉虱和蚜虫的作物。中等肥力地块每666.7m²施尿素20kg、磷酸二铵25kg～30kg、硫酸钾23 kg～26kg，深翻、整细、耙平。 7.2.2移栽 地表0cm～5cm地温稳定至18℃以上即可移栽。将长至5片～6片叶的试管苗用镊子轻轻从培养 瓶中夹出，去掉老叶、残留培养基，按脱毒组培苗密度为100棵/m²～150棵/m²移栽。浇水保湿，气温上 升至30℃以上时覆盖遮阳网。 7.2.3扩繁 脱毒组培苗生长至25cm以上时，剪苗移栽扩繁。 7.2.4管理 -移栽和扩繁时常规水肥管理，遇旱适量浇灌，遇涝及时排渍，灌溉水质应符合GB5084的要求。 -按NY/T1200的规定淘汰感染病虫害植株。 8脱毒种薯(苗)生产 8.1脱毒种薯生产 8.1.1原原种生产 气温保持在18℃以上时，将移栽成活的脱毒组培苗剪成20cm～30cm长的茎段，栽插至无病田 生产原原种。 一原原种繁殖应覆盖60目的防虫网棚，隔离条件好，周边无其他级别种薯或商品薯和十字花科、茄 科及其他易引诱粉虱和蚜虫的作物。 原原种病毒检测及质量要求分别按NY/T402和NY/T1200的规定执行。 8.1.2原种生产 气温保持在18℃以上时，将原原种繁殖苗剪成20cm～30cm长的茎段，栽插至无病田繁殖原种 原种繁殖应隔离条件好，周边无生产用种甘薯或商品薯和十字花科、茄科及其他易引诱粉虱和蚜 虫的作物。 原种病毒检测及质量要求分别按NY/T402和NY/T1200的规定执行。 8.1.3生产用种生产 气温保持在18℃以上时，将原种繁殖苗剪成20cm～30cm长的茎段，栽插至无病田繁殖生产 用种。 生产用种繁殖应有一定隔离条件，周边无商品薯和十字花科、茄科及其他易引诱粉虱和蚜虫 的作物。 生产用种病毒检测及质量要求分别按NY/T402和NY/T1200的规定执行。 8.1.4田间管理 田间常规水肥管理，遇旱适量浇灌，遇涝及时排渍，灌溉水质应符合GB5084的要求。 一及时中耕除草。 病虫害发生时，选择合适药剂防治病虫害。 3 NY/T3537—2020 8.1.5 收获储藏 收获：在日平均温度10℃以上时适时收获，剔除破皮断裂伤薯后储藏。 储藏：人窖前对窖进行熏蒸灭菌，入窖后及时通风，保持储藏温度10℃～14℃、相对湿度80%～ 90%。 愈伤：必要时采取高温愈合处理措施，即在1d～2d加温到平均堆内温度35℃～38℃，处理 2d~3d，再用1d~2d恢复到正常储藏温度。 8.2脱毒种苗生产 选用各级别脱毒种薯，在无病田排种育苗生产脱毒种苗，选用合适药剂防治病虫害。脱毒种苗病毒检 测及质量要求分别按NY/T402和NY/T1200的规定执行 NY/T3537—2020 附 干录 A （资料性附录） 茎尖培养基配方 茎尖培养基配方见表A.1。 表A.1 茎尖培养基配方 母液成分 化学试剂 质量浓度 硝酸铵（NHNO） 1 650 mg/L 硝酸钾(KNO3） 1 900mg/L 大量元素 氯化钙(CaCl2·2HzO) 440 mg/L 硫酸镁（MgSO：·7H,O) 370 mg/L 磷酸二氢钾（KH,PO,） 170 mg/L 碘化钾(KI) 0. 83 mg/L 硼酸（H,BOs) 6. 2 mg/L 硫酸锰（MnSO·4H2O) 22.3mg/L 微量元素 硫酸锌（ZnSO·7H2O) 8.6mg/L 钼酸钠(NazMoO,·2H2O) 0.25mg/L 硫酸铜（CuSO：·5H2O) 0.025mg/L 氯化钻(CoClz·6H,O) 0.025mg/L 硫酸亚铁(FeSO·7H2O) 27.8 mg/L 铁盐 乙二胺四乙酸二钠（Naz·EDTA·2H,O) 37.3 mg/L 肌醇 100 mg/L 烟酸 0.5mg/L 有机成分 盐酸吡哆素（维生素B） 0.5mg/L 盐酸硫胺素