ICS 67. 050 x 04 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T 18415—2001 小麦粉中过氧化苯甲酰的测定方法 Methods of determination for benzoyl peroxide in wheat flour 2001-08-29发布 2001-09-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 中华人民共 和 国 国家标准 小麦粉中过氧化苯甲酰的测定方法 GB/T 18415—2001 * 中国标准出版社出版发行 北京西城区复兴门外三里河北街16号 邮政编码：100045 http://www.spc.net.cn 电话：63787337、63787447 2001年9月第一版 2005年7月电子版制作 书号：155066·1-17885 版权专有 侵权必究 举报电话：（010）68533533 GB/T 18415--2001 前言 本标准参考美国AOAC935.34《面粉中的过氧化苯甲酰漂白剂（苯甲酸）--光度法》、AOAC 983.16《食品中的苯甲酸和山梨酸（气相色谱法）》、日本厚生省环境卫生局汇编标准方法中关于面粉中 过氧化苯甲酰的分析方法以及GB/T5009.29-1996《食品中山梨酸、苯甲酸的测定方法》中的有关原 理和技术内容，在试验的基础上，通过简化操作步骤，提高方法的可操作性和准确性而研究制定。 本标准由国家粮食局提出并归门。 本标准起草单位：国家粮食局谷物油脂化学研究所、国家粮油质量监督检验中心 本标准主要起草人：凌家煜、周光俊、尚艳娥、阮玲、周语非。 中华人民共和国国家标准 小麦粉中过氧化苯甲酰的测定方法 GB/T 18415---2001 Methods of determination for benzoyl peroxide in wheat flour 1 范围 本标准规定广小麦粉中过氧化苯甲酰含鼠的测定方法及其原理、试剂、仪器和设备、分析步骤、结果 计算和结果表述， 本标准适用于小麦粉。 2引用标准 下列标准所包含的条文，通过在本标准打引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均 为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。 （135491一1985粮食、油料检验拆样、分样法 第一篇气相色谱法（I） 3原理 小麦粉中的过氧化苯甲酰被还原铁粉和盐酸反应产生的原子态氢还原，生成苯甲酸，经提取净化 后，用气相色谱仪测定，与标准系列比较定罩。 4 试剂 4.1 乙醚，分析纯。 4.2 盐酸，分析纯。 4.31 盐酸，1+1（V/V）：50ml.盐酸（分析纯）与50ml.蒸馏水混合。 4.4 还原铁粉，分析纯。 4.5氯化钠，分析纯。 4.65%氯化钠溶液：称取5g氯化钠溶于100ml蒸馏水中。 4.7 碳酸氢钠，分析纯。 4.81%碳酸氢钠的5%氯化钠水溶液：称取1g碳酸氢钠溶于100ml.5%氟化钠溶液中。 4.9闪酮，分析纯。 4.10石油醚（沸程60℃～90℃），分析纯。 4.11石油醚-乙醚（3+1，V/V）：量取3体积石油醚与1体积乙醚混合。 4.12苯甲酸（含量99.95%~100.05%），基准试剂。 4.13苯甲酸标准贮备溶液：准确称取苯甲酸（基准试剂)0.1000g，用丙酮溶解并转移至100mI容量 瓶中，定容。此溶液浓度为1mg/mL。 4.14苯甲酸标准使用液：准确吸取上述苯甲酸标准贮备溶液10.00ml于100ml容量瓶中，以丙酮 稀释并定容，此溶液浓度为100μg/mL。 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局2001-08-29批准 2001-09-01实施 1 GB/T18415—2001 5仪器和设备 实验室常用仪器及下述物品： 5.1气相色谱仪，附有氢火焰离子化检测器。 5.210μL微量注射器。 5.3天平（感量0.01g和0.0001g）。 5.4150mL具塞三角瓶。 5.5150mL分液漏斗。 5.650mL具塞比色管。 6分析步骤 6.1样品的扦样、分样 按GB5491执行。 6.2样品前处理 准确称取试样5.00g于具塞三角瓶中，加人0.01g还原铁粉、约20粒玻璃珠（$6mm左右）和 20mL乙醚，混匀。逐滴加人0.5mL盐酸，回旋摇动，用少量乙醚冲洗三角瓶内壁，放置至少12h后，摇 匀，静置片刻，将上清液经快速滤纸滤人分液漏斗中。用乙醚洗涤三角瓶内的残渣，每次15mL（工作曲 线溶液每次用10mL），共洗三次，上清液一并滤人分液漏斗中。最后用少量乙醚冲洗过滤漏斗和滤纸， 滤液合并于分液漏斗中。 向分液漏斗中加人5%氯化钠溶液30mL，回旋摇动30s，防止气体顶出活塞，并注意适时放气。静 置分层后，弃去下层水相溶液。重复用氯化钠溶液洗涤一次，弃去下层水相。加人1%碳酸氢钠的5%氟 化钠水溶液15mL，回旋摇动2min（切勿剧烈振荡，以免乳化，并注意适时放气）。待静置分层后，将下层 碱液放入已预置3～4固体氯化钠的50mL比色管中。分液漏斗中的醚层用碱性溶液重复提取一次， 合并下层碱液于比色管中。加人0.8mL盐酸（1十1），适当摇动比色管以充分驱除残存的乙醚和反应产 生的二氧化碳气体（室温较低时可将试管置于50C水浴中加热，以便于驱除乙醚），至确认管内无艺 的气味为止。加入5.00mL石油醚-乙醚（3十1）混合溶液，充分振摇1min，静置分层。上层醚液即为进 行气相色谱分析的测定液。 6.3制作工作曲线 准确吸取苯甲酸标准使用液0、1.0、2.0、3.0、4.0和5.0ml，置于150mL具塞三角瓶中，除不加 还原铁粉外，其他操作同6.1样品前处理。其测定液的最终浓度分别为0、20、40、60，80和100μg/mL。 以微量注射器分别取不同浓度的苯甲酸溶液2.0uL注人气相色谱仪。以其苯甲酸峰面积为纵坐标，苯 甲酸浓度为横坐标，绘制工作曲线。 6.4测定 80）目Chromo50rbW/AWDMCS。调节载气（氮气）流速，使苯甲酸于（5～10)min出峰。柱温为180C， 检测器和进样口温度为250C。不同型号仪器调整为最佳工作条件。 曲线比较定量。 7结果计算 试样中的过氧化苯甲酰含量按式（1）进行计算： Xi= C X 5 5X 0.992 .(1) m ×1 000 2 GB/T 18415-2001 式中：X,—试样中的过氧化苯甲酰含量，g/kg C1-—由工作曲线上查出的试样测定液中相当于苯甲酸溶液的浓度，ug/ml； 5-试样提取液的体积，mL; m1-试样的质量，g 0.992由苯甲酸换算成过氧化苯甲酰的换算系数。 8结果表述 取双试验测定算术平均值的二位有效数字。双试验测定值的相对相差不得大于15%。 第二篇气相色谱法（I） 9原理 小麦粉中的过氧化苯甲酰在酸性条件下被还原，生成苯甲酸，以溶剂提取并用气相色谱法测定。 10 试剂 10.1石油醚（60℃～90℃），分析纯。 10.2冰乙酸，分析纯。 10.3酸性石油醚：在500mL石油醚中加人15ml.冰乙酸，混匀备用。 10.4苯甲酸（含量99.95%～100.05%），基准试剂。 10.5苯甲酸标准贮备溶液：准确称取苯甲酸（基准试剂)0.1000g，用闪酮溶解并转移至100ml.容量 瓶中，定容。此溶液浓度为1000μg/ml。 10.6苯甲酸标准溶液：由上述苯甲酸标准贮备溶液逐级稀释，制备成浓度为0、5、10、15和20uμg/mi. 的苯甲酸标准溶液，供制作标准曲线之用。 11仪器和设备 实验室常用仪器及下述物品： 11.1气相色谱仪，附有氢火焰离子化检测器。 11.210uL微量注射器。 11.3天平（感量0.01g和0.0001g）。 11.4100ml具塞三角瓶。 11.5磁力搅拌器。 12分析步骤 12.1样品的扦样、分样 按GB5491执行。 12.2测定液的制备 准确称取试样5.00g，移人具塞三角瓶中，加人30mL酸性石油醚和搅拌块，以磁力搅拌器将试样 分散（也可直接用手工操作，将试样旋荡分散），于30℃恒温放置，并每隔15min搅拌或旋荡一次。4h 后样品溶液经滤纸过滤，收集滤液于50mL容量瓶中。分数次用酸性石油醚将三角瓶中残余试样尽量 洗人过滤漏斗，收集滤液于容量瓶中。最后以少许酸性石油醚淋洗过滤漏斗中的试样残渣并用以定容， 作为试样测定液。 12.3标准曲线的制作 以微量注射器依次取不同浓度的苯甲酸标准溶液2.0L，注人气相色谱仪。以其苯甲酸峰面积为