(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211245981.7 (22)申请日 2022.10.12 (71)申请人 信阳农林学院 地址 464000 河南省信阳市羊山 新区新24 大街与北环路交叉口西北 (72)发明人 黄双杰　罗金蕾　常亚丽　尹鹏　 陈义　孙慕芳　郭桂义　 (74)专利代理 机构 苏州久元知识产权代理事务 所(普通合伙) 32446 专利代理师 袁欣琪 (51)Int.Cl. G01N 21/31(2006.01) G01N 1/28(2006.01) (54)发明名称 一种茶叶硝态 氮的测定方法 (57)摘要 本发明提出了一种茶叶硝态氮的测定方法， 属于检测技术领域， 将茶叶煮沸过滤后的得到的 茶汤经过脱色剂脱色后， 采用比色法测定硝态氮 的含量； 所述脱色剂为活性炭， 所述脱色剂为活 性炭组合物， 包括活性炭A和/或活性炭B， 所述活 性炭A为细度为80目的理论比表面积为450 ‑ 900m2·g‑1的活性炭， 活性炭B为细度为200目， 理 论比面积约1000m2·g‑1的活性炭。 本发明在水杨 酸比色法的基础上， 探索粉末活性炭A和活性炭B 的脱色效果， 确定最佳用量， 并发现其组合物具 有更好的脱色效果， 减少了干扰， 提高硝态氮回 收率。 权利要求书1页 说明书7页 附图1页 CN 115452749 A 2022.12.09 CN 115452749 A 1.一种茶叶硝态氮的测定方法， 其特征在于， 将茶叶煮沸过滤后的得到的茶汤经过脱 色剂脱色后， 采用比色法测定硝态 氮的含量； 所述脱色剂为活性炭。 2.根据权利要求1所述的茶叶硝态氮的测定方法， 其特征在于， 所述脱色剂为活性炭组 合物， 包括活性炭A和/或活性炭B， 所述活性炭A为细度为80目的理论比表面积为450 ‑ 900m2·g‑1的活性炭， 活性炭B为细度为20 0目， 理论比面积约10 00m2·g‑1的活性炭。 3.根据权利要求2所述的茶叶硝态氮的测定方法， 其特征在于， 所述脱色剂为活性炭A 和活性炭B的组合物， 质量比为9 ‑11： 1。 4.根据权利要求1所述的茶叶硝态 氮的测定方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： S1.样品处理： 将 茶粉加入水中， 用保鲜膜封口， 置入沸水浴中提取20 ‑40min后取出， 抽 滤， 洗涤试样， 加入脱色剂， 搅拌脱色， 抽滤， 将试样洗入容 量瓶中， 加水定容至刻度； S2.试剂配制： (1)NO3‑‑N标准溶液： 精确称取0.7221g烘干至恒重的硝酸钾溶于去离子水中， 定容至 1000mL； (2)5％水杨酸 ‑硫酸溶液： 称取5g水杨酸溶于100mL浓硫酸中， 搅拌溶解后， 贮存于棕 色 瓶中， 置冰箱保存1周内有效； (3)8％氢 氧化钠溶 液： 称取20g氢 氧化钠溶于25 0mL去离子水中； S3.硝态氮系列浓度标准溶液配制： 吸取100mg ·L‑1NO3‑‑N标准溶液0、 2.5、 5、 10、 15、 20、 30、 40、 50和60mL分别放入100mL的容量瓶， 用去离子 水定容至刻度， 使之成0、 2.5、 5、 10、 15、 20、 30、 40、 50和60mg·L‑1NO3‑‑N系列标准溶 液； S4.标准曲线 的绘制： 吸取步骤S3中系列标准溶液置于刻度带盖离心管中， 加入5％的 水杨酸‑硫酸溶液， 混匀后置室温下10 ‑30min， 再加 入8％NaOH溶液， 待冷却至室温后， 以空 白做参比， 在酶标仪410nm波长下测其吸光度， 作出 标准曲线； S5.色法检测： 吸取上述处理组样品液置于刻度带盖离心管中， 加入5％的水杨酸 ‑硫酸 溶液， 混匀后置室温下10 ‑30min， 再加 入8％NaOH溶液， 待冷却至室温后， 以空白做参比， 在 酶标仪410nm波长下测其吸光度， 根据标准曲线， 得 出硝态氮含量。 5.根据权利要求4所述的茶叶硝态氮的测定方法， 其特征在于， 步骤S1中所述搅拌脱色 的时间为10 ‑30min， 温度为3 0‑40℃。 6.根据权利要求3所述的茶叶硝态氮的测定方法， 其特征在于， 所述活性炭B经过聚多 巴胺改性处 理。 7.根据权利要求6所述的茶叶硝态氮的测定方法， 其特征在于， 所述改性方法如下： 将 活性炭B均匀分散于水中， 加入多巴胺盐酸盐和催化剂， 加热反应， 离心， 干燥， 得到改性活 性炭B。 8.根据权利要求7所述的茶叶硝态氮的测定方法， 其特征在于， 所述催化剂为pH为5 ‑6 的Tris‑HCl溶液。 9.根据权利要求7所述的茶叶硝态氮的测定方法， 其特征在于， 所述加热温度为50 ‑60 ℃， 反应时间为1 ‑3h。 10.根据权利要求7所述的茶叶硝态氮的测定方法， 其特征在于， 所述活性炭B、 多巴胺 盐酸盐和催化剂的质量比为10:14 ‑17:0.5‑1。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115452749 A 2一种茶叶硝态氮的测定方 法 技术领域 [0001]本发明涉及检测技 术领域， 具体涉及一种茶叶硝态 氮的测定方法。 背景技术 [0002]茶作为世界三大非酒精饮料之一， 因具有独特的滋味、 香气、 营养价值和保健功效 而受到广大消费者的喜 爱。 据统计， 世界饮 茶人口已超过30亿， 遍布160多个国家和地区。 近 年来， 随着人们生活水平的提高， 食品安全越来越受到关注。 茶树作为多年生叶用作物， 具 有喜氮和 易于积累硝酸盐的特点。 因此， 建立和完善茶叶硝酸盐含量检测方法具有重要的 现实意义。 [0003]目前国内外已报道的硝酸盐测定方法有很多， 如分光光度法、 离子色谱法、 气相分 子吸收光谱法和电化学法等。 其中， 分光光度法具备操作简单、 经济、 对实验设备要求低等 特点， 应用较为普遍。 水杨 酸比色法作为分光光度法的一种， 常用于植物组织中硝酸盐氮含 量的测定， 其原理是在浓H2SO4条件下， NO3‑与水杨酸反应生成硝基水杨酸， 产物硝基水杨酸 在碱性条件下(pH＞12)显黄色， 于波长410nm处有最大吸收峰， 在一定范围内， 其颜色深浅 与含量成正比， 可直接比色测定。 水杨 酸比色法测定 茶叶硝酸盐的研究早有报道， 但发明人 在采用水杨酸比色法测定茶叶硝酸盐氮含量时， 发现茶叶消煮后的滤液为黄褐色， 加显色 剂后并不呈现特征性颜色， 可能在于茶叶中含有 大量的多酚、 色素和抗坏血酸等物质， 干扰 了显色效果。 古小玲等在采用比色法测定茶叶亚硝酸盐时遇到同样的问题， 通过加入碱式 乙酸铅饱和溶 液对茶汤进行脱色处 理， 将回收率 提高到60％。 [0004]活性炭是由木质、 煤质和石油焦等含碳原料经热解、 活化加工制备而成， 是一种价 格低廉、 吸附性能良好的吸 附剂， 具有发达的孔隙结构、 较大的比表面和良好的化学结构， 能够吸附液体中的色素物质， 具有脱色、 脱 臭的效果。 依据形状可将其分为粉末和颗粒两大 类， 其中粉末活性炭常用于饲料、 酱腌菜和调味酱中的硝酸盐和亚硝酸盐测定， 脱色效果良 好， 回收率在95％以上。 那么它是否可用于茶叶硝酸盐氮含量测定， 目前尚不清楚。 发明内容 [0005]本发明的目的在于提出一种茶叶硝态氮的测定方法， 在水杨酸比色法的基础上， 探索粉末活性炭A和活性炭B的脱色效果， 确定最佳用量， 并发现其组合物具有更好的脱色 效果， 减少了 干扰， 提高硝态 氮回收率。 [0006]本发明的技 术方案是这样实现的： [0007]本发明提供一种茶叶硝态氮的测定方法， 将茶叶煮沸过滤后的得到的茶汤经过脱 色剂脱色后， 采用比色法测定硝态 氮的含量； 所述脱色剂为活性炭。 [0008]作为本发明的进一步改进， 所述脱色剂为活性炭组合物， 包括活性炭A和/或活性 炭B， 所述活性炭A为细度为80目的理论比表面积为450 ‑900m2·g‑1的活性炭， 活性炭B为细 度为200目， 理论比面积约10 00m2·g‑1的活性炭。 [0009]作为本发明的进一步改进， 所述脱色剂为活性炭A和活性炭B的组合物， 质量比为说　明　书 1/7 页 3 CN 115452749 A 3