(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211299076.X (22)申请日 2022.10.24 (71)申请人 格莱康美生物医学技 术 （北京） 有限 公司 地址 100176 北京市大兴区北京经济技 术 开发区永昌北路3号1幢714单元3层 302 (72)发明人 丁彬彬　 (74)专利代理 机构 北京众达德权知识产权代理 有限公司 1 1570 专利代理师 刘杰 (51)Int.Cl. A61K 35/32(2015.01) A61K 47/36(2006.01) A61P 19/02(2006.01)A61P 29/00(2006.01) A61P 39/06(2006.01) C12N 5/0775(2010.01) A61K 31/05(2006.01) A61K 31/4965(2006.01) A61K 31/728(2006.01) A61K 35/28(2015.01) (54)发明名称 一种用于治疗骨关节炎/软骨损伤的组合物 及其制备方法 (57)摘要 本发明公开了一种用于治疗骨关节炎/软骨 损伤的组合物及其制备方法， 所述组合物包括脐 带间充质干细胞、 软骨干细胞外泌体和基质； 所 述基质包括如下质量体积百分含量的组分： 透明 质酸2％～4％、 白藜芦醇0.1％～0.5％、 四甲基 吡嗪0.01％～0.03％、 麦芽糖醇0.1％～0.4％， 余量为生理盐水； 本发明组合物中透明质酸可以 作为各物质的载体， 同时能够降低软组织间的摩 擦， 再辅以软骨干细胞外泌体、 白藜芦醇和四甲 基吡嗪， 有效消除自由基， 改善关节内微环 境、 降 低免疫反应， 同时能够更好的促进脐带间充质干 细胞的增殖和向软骨干细胞的分化， 进而实现快 速修复软骨损伤， 因此， 将本申请组合物能够有 效治疗骨关节炎 /软骨损伤， 且效果显著。 权利要求书1页 说明书7页 CN 115487208 A 2022.12.20 CN 115487208 A 1.一种用于治疗骨 关节炎/软骨损伤的组合物， 其特征在于， 所述组合物包括脐带间充 质干细胞、 软骨干细胞外泌体和基质； 所述基质包括如下质量体积百分含量的组分： 透明质酸2％～4％、 白藜芦醇0.1％～ 0.5％、 四甲基吡嗪0.01％～0.0 3％、 麦芽糖醇0.1％～0.4％， 余 量为生理盐水。 2.根据权利要求1所述的用于治疗骨关节炎/软骨损伤的组合物， 其特征在于， 所述脐 带间充质干细胞浓度为1 ×105～1×107cells/ml。 3.根据权利要求1所述的用于治疗骨关节炎/软骨损伤的组合物， 其特征在于， 所述软 骨干细胞外泌体浓度为10 0～200 μg/ml。 4.根据权利要求1所述的用于治疗骨关节炎/软骨损伤的组合物， 其特征在于， 所述组 合物包括脐带间充质干细胞、 软骨干细胞外泌体和基质； 所述脐带间充质干细胞浓度为1 ×106cells/ml； 所述软骨干细胞外泌体浓度为150 μg/ ml； 所述基质包括如 下质量体积百分含量的组分： 透明质酸3 ％、 白藜芦醇0.3％、 四甲基吡 嗪0.02％、 麦 芽糖醇0.3％， 余 量为生理盐水。 5.根据权利要求1所述的用于治疗骨关节炎/软骨损伤的组合物， 其特征在于， 所述脐 带间充质干细胞为第3代 ～第5代的脐带间充质干细胞。 6.根据权利要求1所述的用于治疗骨关节炎/软骨损伤的组合物， 其特征在于， 所述透 明质酸的分子量 为20000～500000。 7.根据权利要求1所述的用于治疗骨关节炎/软骨损伤的组合物， 其特征在于， 所述软 骨干细胞外泌体通过如下 方法制得： (1)取3～5代人 前软骨干细胞培 养上清、 离心， 收集上清液置 于冰上； (2)向上清液中加入外泌体沉淀试剂并混匀、 静置， 再 经离心， 吸去上清， 保留沉淀物； (3)采用PBS重悬沉淀物， 再 经纯化， 冷冻干燥， 即得 所述软骨干细胞外泌体。 8.权利要求1～7任一所述的用于治疗骨关节炎/软骨损伤的组合物的制备方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： (a)将透明质酸、 白藜 芦醇和麦 芽糖醇分别溶解于生理盐水中、 灭菌， 得到基质； (b)将脐带间充质干细胞和软骨干细胞外泌体添加至基质中并混匀， 即得所述用于治 疗骨关节炎 /软骨损伤的组合物。 9.根据权利要求8所述的制备 方法， 其特 征在于， 所述 步骤(b)中， 基质温度为2 ～6℃。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115487208 A 2一种用于治疗骨关节炎/软骨损伤的组合物及其制备方 法 技术领域 [0001]本发明涉及生物工程技术领域， 具体涉及一种用于治疗骨关节炎/软骨损伤的组 合物及其制备 方法。 背景技术 [0002]退行性骨关节病又称骨关节炎、 退行性关节炎、 老年性关节炎、 肥大性关节炎， 是 一种退行性病变， 系由于增 龄、 肥胖、 劳损、 创伤、 关节先天性异常、 关节畸形等诸多因素引 起的关节软骨退化损伤、 关节 边缘和软骨下骨反应性增生。 本病多 见于中老年人群， 好 发于 负重关节及活动量较多的关节(如， 颈椎、 腰椎、 膝关节、 髋关节 等)。 过度负重或使用这些关 节， 均可促进退行性变化的发生。 临床表现为缓慢发展的关节疼痛、 压痛、 僵硬、 关节肿胀、 活动受限和关节畸形等。 [0003]骨关节炎的主要症状为关节疼痛， 常为休息痛， 表现为休息后出现疼痛， 活动片刻 即缓解， 但活动过多后， 疼痛又加剧。 另一症状是关节僵硬， 常出现在早晨起床时或白天关 节长时间保持一定体位后。 [0004]透明质酸是构成关节软骨和滑液的主要成分， 关节中的透明质酸主要是由滑膜细 胞及单核吞噬细胞合成； 滑液中的透明质酸对关节生理功 能的发挥起着重要作用， 透明质 酸和糖蛋白使滑液具有润滑性和黏弹性， 可降低软组织间及软骨 间的摩擦， 并能消除自由 基。 [0005]目前， 现有技术已有将透明质酸和间充质干细胞共同用于治疗骨关节炎中， 例如 专利申请号为201610271862.7的中国专利公开了一种使用干细胞治疗骨关节炎的方法和 组合物； 该组合物能够提高干细胞的存活率， 其具有一定的软骨损伤修复能力， 但修复效果 并不理想； 因此， 亟需一种具有更加优异的软骨损伤修复的组合物以满足市场需求。 发明内容 [0006]本发明的目的在于提供一种用于治疗骨关节炎/软骨损伤的组合物及其制备方 法， 本发明组合能够更好的促进干细胞成软骨分化并改善骨关节微环境， 能够更好的修复 软骨损伤， 达 到治疗骨关节炎 /软骨损伤的目的。 [0007]为了实现本发明的上述目的， 特采用以下技 术方案： [0008]本发明第一方面提供一种用于治疗骨关节炎/软骨损伤的组合物， 所述组合物包 括脐带间充质干细胞、 软骨干细胞外泌体和基质； [0009]所述基质包括如下质量体积百分含量的组分： 透明质酸2％～4％、 白藜芦 醇0.1％ ～0.5％、 四甲基吡嗪0.01％～0.0 3％、 麦芽糖醇0.1％～0.4％， 余 量为生理盐水。 [0010]优选地， 所述脐带间充质干细胞浓度为1 ×105～1×107cells/ml。 [0011]优选地， 所述软骨干细胞外泌体浓度为10 0～200 μg/ml。 [0012]优选地， 所述组合物包括脐带间充质干细胞、 软骨干细胞外泌体和基质； [0013]所述脐带间充质干细胞浓度为1 ×106cells/ml； 所述软骨干细胞外泌体浓度为说　明　书 1/7 页 3 CN 115487208 A 3